碘-淀粉比色法測定淀粉酶課件

實(shí)驗(yàn)119

碘-淀粉比色法測定淀粉酶董雷鳴1實(shí)驗(yàn)119

碘-淀粉比色法測定淀粉酶董雷鳴1一、概述（一）淀粉酶的分類α-淀粉酶（人體）β-淀粉酶（植物、微生物）2一、概述（一）淀粉酶的分類α-淀粉酶（人體）2（二）含淀粉酶的人體組織胰腺唾液腺（腮腺）胃、膽囊、輸卵管、子宮、脾、空腸、回腸、骨骼肌等3（二）含淀粉酶的人體組織胰腺3（三）淀粉的分類直鏈淀粉（糖淀粉）支鏈淀粉（膠淀粉）4（三）淀粉的分類直鏈淀粉（糖淀粉）4直鏈淀粉(糖淀粉)的結(jié)構(gòu)5直鏈淀粉(糖淀粉)的結(jié)構(gòu)5碘－淀粉包合物結(jié)構(gòu)6碘－淀粉包合物結(jié)構(gòu)6支鏈淀粉(膠淀粉)的結(jié)構(gòu)7支鏈淀粉(膠淀粉)的結(jié)構(gòu)7葡萄糖單位連接鍵分子量自然界中的比例直鏈50-250個α-1，4糖苷鍵150000-60000010-20%支鏈250-500個α-1，4糖苷鍵β-1，6糖苷鍵1000000-600000080-90%8葡萄糖單位連接鍵分子量自然界中直鏈50-250個α-1，4糖(一)原理二、實(shí)驗(yàn)α-淀粉酶淀粉葡萄糖+麥芽糖+糊精+碘液蘭色包合物9(一)原理二、實(shí)驗(yàn)α-淀粉酶淀粉葡萄糖+麥(二)試劑淀粉溶液（0.4g/L）碘應(yīng)用液10(二)試劑淀粉溶液（0.4g/L）10(三)操作加入物空白管測定管緩沖淀粉溶液(37℃預(yù)溫)0.50.5稀釋血清—0.1混勻，置37℃水浴準(zhǔn)確15min碘應(yīng)用液0.50.5蒸餾水3.13.0混勻，蒸餾水調(diào)零，波長660nm，比色。11(三)操作加入物空白管測定管緩沖淀粉溶液(37℃預(yù)溫)0.5(四)單位定義100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg為1個單位。12(四)單位定義100ml血清中的淀粉酶，在37℃,1(五)計(jì)算空白管吸光度－測定管吸光度100

150.4×0.5×××空白管吸光度0.0115

5淀粉酶（U）=※100ml血清中的淀粉酶，在37℃,15min水解淀粉5mg為1個單位。（）400=（ml）（min）（mg）13(五)計(jì)算空白管吸光度－測定管吸光度100(六)參考值血清80-180U尿液100-1200U14(六)參考值血清80-180U14(七)臨床意義升高

——急性胰腺炎、流行性腮腺炎；——急性膽囊炎、腸梗阻、胰腺癌、膽石癥、潰瘍病穿孔及嗎啡注射后。降低

——肝炎、肝硬化、肝癌；——腎功能障礙。15(七)臨床意義升高15急性胰腺炎時(shí)血、尿淀粉酶升高的不同表現(xiàn)開始升高時(shí)間高峰時(shí)間恢復(fù)時(shí)間血清8-12h12-24h2-5d尿液12-24h5-7d1-2w16急性胰腺炎時(shí)血、尿淀粉酶升高的不同表現(xiàn)開始升高時(shí)間高峰時(shí)間恢(八)注意事項(xiàng)草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA-Na2及氟化鈉對淀粉酶有抑制作用，肝素?zé)o抑制作用。唾液含高濃度淀粉酶，須防止帶入。緩沖淀粉溶液若出現(xiàn)渾濁或絮狀物，應(yīng)重新配制。17(八)注意事項(xiàng)草酸鹽、枸櫞酸鹽、EDTA-Na2及氟化鈉對淀實(shí)驗(yàn)115

比色法測定血清堿性磷酸酶董雷鳴18實(shí)驗(yàn)115

比色法測定血清堿性磷酸酶董雷鳴18一、概述含堿性磷酸酶酶的人體組織骨骼肝臟腸黏膜細(xì)胞胎盤等19一、概述含堿性磷酸酶酶的人體組織骨骼19(一)原理二、實(shí)驗(yàn)堿性磷酸酶磷酸苯二鈉磷酸+酚+4-氨基氨替比林鐵氰化鉀醌類化合物20(一)原理二、實(shí)驗(yàn)堿性磷酸酶磷酸苯二鈉磷酸(二)試劑碳酸鹽緩沖液(pH10)磷酸苯二鈉底物溶液鐵氰化鉀溶液酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液酚標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液21(二)試劑碳酸鹽緩沖液(pH10)21(三)操作(BeckmanCX7全自動生化分析系統(tǒng))22(三)操作(BeckmanCX7全自動生化分析系統(tǒng))22BeckmanCX7的規(guī)格檢測量

900個檢驗(yàn)結(jié)果/小時(shí)檢測項(xiàng)目及種類（共33項(xiàng)）

電解質(zhì)、急診項(xiàng)目、普通生化、特殊生化、免疫、蛋白、藥物檢測、毒品檢測檢測樣品種類血清、血漿、尿液、腦脊液23BeckmanCX7的規(guī)格檢測量23(四)單位定義100ml血清在37℃與底物作用15min,產(chǎn)生1mg酚為1個金氏單位。24(四)單位定義100ml血清在37℃與底物作用15mi(五)參考值成人3-13金氏單位兒童5-28金氏單位25(五)參考值成人3-13金氏單位25(六)臨床意義血清ALP活力測定常為肝膽疾病和骨骼疾病的臨床輔助診斷指標(biāo)。26(六)臨床意義血清ALP活力測定常為肝膽疾病活性升高——骨paget病、惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移或肝轉(zhuǎn)移、佝僂病、骨軟化、骨折愈合期、成骨細(xì)胞瘤；——膽道梗阻、甲旁亢等?；钚越档停ㄉ僖姡粜〔?、磷酸酶過少癥、維生素C缺乏癥等。27活性升高27