親子鑒定與DNA專業(yè)知識講座

親子判定與DNA親子判定歷史親子判定原理判定標準DNA指紋法比較第1頁所羅門審判：

大家都據(jù)說過所羅門審判這樣一件故事：兩位婦人都聲稱自己是孩子母親，于是所羅門就命令一名侍衛(wèi)把那個孩子帶來，要用劍將其辟成兩半分給他們兩，成果假母親同意所羅門判決，而孩子真正母親卻懇求侍衛(wèi)饒了孩子性命，她解釋說：“把孩子給了假母親，總比讓孩子慘死好?！碑斎?，真假母親也就水落石出了。第2頁《十二銅表法》：

公元前449年左右，相稱于我國春秋戰(zhàn)國時期，古羅馬制定了成文法典《十二銅表法》，它記載有最早有關(guān)“親子判定”法律條文。即根據(jù)妊娠月數(shù)推定父權(quán)。第3頁鷸術(shù)察情:

在我國，有關(guān)親權(quán)認定最常見辦法有兩種：一為“鷸術(shù)察情”，即先施詭計，后觀其真情并作出判斷。這種辦法和千前面所說所羅門斷案法如出一轍。第4頁滴骨驗親法：另一種辦法就是“滴骨驗親”法。即以生者血滴在尸骨上，觀測血能否浸入骨內(nèi)，浸入則被以為二者有血緣關(guān)系，在多種古籍中有多種統(tǒng)計。三國時代（公園220—280年）謝承著《會稽先賢傳》中《以弟血滴兄骨》也許是統(tǒng)計此法最早史料：陳業(yè)哥哥因海難不幸殞命，當初一同遇難有五六十人，并且尸體都已嚴重腐敗而無法識別死者身份。陳業(yè)就用刀刺破自己手臂將血分別滴在尸骨上，發(fā)覺其血液只能浸入一具尸骨，其他皆不能。陳業(yè)就這樣確認其兄尸骨。第5頁合血法：等到了明代，更是采取了“合血法”來識別親權(quán)。明末清初檢查書籍中都有相同記載：“親子弟兄或自幼分離，欲相結(jié)識。難辨真?zhèn)巍Ｃ鞔坛鲅?，滴一器?nèi)，真則共凝為一，不然不凝也?！钡?頁當代親子判定法：ABO血型檢查DNA指紋分析STR技術(shù)應(yīng)用第7頁ABO血型檢查：

人ABO血型是受三個復(fù)等位基因控制，i為隱性基因，IA、IB為顯性基因。決定ABO血型基因型有6種，體現(xiàn)型有4種：A型、B型、AB型和O型；根據(jù)孟德爾遺傳規(guī)律，即可計算出孩子也許血型概率。第8頁從表中可知：孩子血型不是惟一確定，而是一種大小差異很大概率事件。不過除了A型血與B型血人婚配外，其他血型組合都有概率為0不也許事件，即都有某些不也許出現(xiàn)血型。因此，用紅細胞進行親子判定，只能否認，不能肯定。也就是只能做親權(quán)排除。第9頁DNA指紋

大家懂得，每個人體細胞內(nèi)都具有23對染色體，每條染色體中部具有一種DNA分子，DNA分子中核苷酸序列包括著遺傳信息，在DNA分子中存在三種類型：單拷貝序列、中等程度反復(fù)序列、高度反復(fù)序。每個反復(fù)序列在300個核苷酸長度之內(nèi)，由于高度反復(fù)，序列通過超離心后以衛(wèi)星帶出目前主要DNA帶附近，因此也稱衛(wèi)星DNA，其中反復(fù)序列單元則稱為“小衛(wèi)星DNA”。“小衛(wèi)星”具有高度可變性，但在“小衛(wèi)星DNA“中有一小段序列則在所有個體中都同樣，稱為“關(guān)鍵序列”。假如把關(guān)鍵序列串聯(lián)起來作為分子探針與不一樣個體DNA進行分子雜交，就會出現(xiàn)各自特有雜交圖譜。它們與人指紋同樣具有專一性和特異性，因此稱作“DNA指紋”。

通過對人類基因組解析，發(fā)覺人與人之間99．99％堿基序列都相同，而剩下0.01%堿基特性序列則來自于雙親。據(jù)此可用于“親子判定”。第10頁第11頁第12頁第13頁長處：DNA指紋能夠同步檢測好些高度多態(tài)性位點，卻只需要少許血樣(不一定新鮮)．并對其他任何組織如被毛、皮屑等也同樣有效．DNA指紋不需要專門試驗室，程序相對簡單．一種通過對應(yīng)訓(xùn)練技術(shù)員，在任何能夠進行DNA重組工作試驗室里都能夠完成，也不需要準備大量特殊試劑．若用非放射性標識DNA探針則使用一般商業(yè)性試劑即可進行DNA指紋判定．伴隨探針和酶增多，DNA指紋辨別能力將會增強，足以處理父母未知個體親子判定問題．這是典型血液和生化多態(tài)性辦法無能為力．DNA指紋試驗室費用低．第14頁第15頁PCR技術(shù)原理

第16頁1953年，PCR技術(shù)開始被應(yīng)用到法醫(yī)判定中，它突破了“極微量”生物學(xué)檢材制約DNA檢測技術(shù)應(yīng)用范圍技術(shù)“瓶頸”，也是用于親子判定檢材幾乎包括所有人體組織，尤其是那些陳舊檢材。如1992年因國內(nèi)務(wù)部法醫(yī)服務(wù)中心主持和完成俄國末代沙皇尼古拉二世、皇后亞歷山德拉及其3位公主遺骸身份判定工作，成為了當今親子判定典型之作。第17頁STR(ShortTandemRepeats)

短串聯(lián)反復(fù)序列(STR)是由2—6bp反復(fù)單位組成關(guān)鍵序列，是一種廣泛分布在人類基因組中DNA片段，主要由關(guān)鍵序列拷貝數(shù)目標變化產(chǎn)生長度多態(tài)性。。其最大特點是具有很高突變率，從而體現(xiàn)出廣泛多態(tài)性，適合于統(tǒng)計短期進化事件，近年來已成為人類遺傳學(xué)研究有效遺傳標識。Y染色體是單倍體，呈父系遺傳，除擬常染色體區(qū)域外，其他Y染色體特異區(qū)不會發(fā)生重組，因此通過對Y染色體上DNA(Y—DNA)系統(tǒng)分析可直接反應(yīng)種族或人群父系演化歷史。Y—STR位于Y染色體非編碼區(qū)，屬于Y染色體特異區(qū)，利用其多態(tài)性，可研究在父系進化歷史中發(fā)生突變事件，探討關(guān)系較近群體之間親緣關(guān)系和他們之間存在微進化關(guān)系第18頁STR(Shorttandemrepeats)如D5S818：5’GGGTGATTTTCCTTTTGGT(AGAT)7-14TGTGGCTATGATTGGAATCA3’.目前試驗室判定常使用STR基因座有：TH01、VWFA31、TPOX、CSFIPO、FIBRA、DS1358、D7S820、D8S1179和D5S818。第19頁第20頁第21頁第22頁長處：

STR分型具有很高敏捷度和良好反復(fù)性，分型成果穩(wěn)定可靠。因此，STR技術(shù)較前者有更高非父排除率和個人識別幾率。STR位點總識別率為0。9999999999999935，合計非父排除為99．999％，在親子判定中已達成很高水平，因此被稱為“第二代DNA指紋”。STR位點在人類基因組中廣泛分布，具有豐富多態(tài)位點資源，并且擴增STR基因座僅需要少許模板DNA。聯(lián)合使用多種STR位點，可滿足多種需要?；谝陨祥L處，近幾年做親子判定多使用STR技術(shù)第23頁應(yīng)用范圍：產(chǎn)前親子判定此類判定主要針對遭遇性侵犯而懷孕婦女，目標是確定其所孕胎兒與性侵犯事實關(guān)聯(lián)性，方便為當事人是否終止妊娠提供科學(xué)根據(jù)。其間才起源于羊水，由于羊水中具有胎兒脫落細胞，羊水抽取時間一般在懷孕12—20周內(nèi)。第24頁無名尸骸身份確定：以往在此類判定中所面臨最大難題就是：無法找到死者生前合適檢材進行檢測比對，雖然死者遺有帶毛囊頭發(fā)或口腔上皮細胞等，但因傳統(tǒng)ABO血型以及血清型、紅細胞酶型和人白細胞抗原（HLA）型等檢測項目其檢測效果很差。同樣，無名尸體檢材條件往往也不適合作上述檢測。假如再采取親子判定辦法確認死者與假設(shè)父母之間存在著親生血緣關(guān)系，同樣能夠確定死者身份。不過當成果顯示死者與假設(shè)父母都不存在親生血緣關(guān)系時，是不是能夠得出排除該寺這不起源于該家庭組員呢？答案是“不能確定，也不能排除”，由于從邏輯上將該檢測成果不能排除該死者從其出生時就被換錯也許，而其父母也并不知曉。第25頁第26頁親權(quán)認定標準：從理論上講，在判定中只要出現(xiàn)排除指標并且充足排除存在基因突變也許，就能夠以此作出排除存在親權(quán)結(jié)論。需要說明是：其中最主要一項參數(shù)就是總檢測項目標累積非父排除率，既體現(xiàn)它排除假爸爸鑒別能力，通用