瑞替加濱胃漂浮型緩釋片的制備及體外評(píng)價(jià)

瑞替加濱胃漂浮型緩釋片的制備及體外評(píng)價(jià)

瑞利加林是一種新型抗癲癇藥物，由氨基丙烯酸組成。根據(jù)研究，它具有開(kāi)顱劑和硝基鉀通道開(kāi)劑的作用，可用作鉀離子通道的擴(kuò)張劑和氨基酸（gaba）的增強(qiáng)劑。因此，瑞利加林可以從不同的機(jī)制中控制癲癇的發(fā)作，緩解疾病。由于瑞替加濱片為薄膜包衣的速釋片,其半衰期相對(duì)較短(6~8h),患者用藥頻繁(3次·d從瑞替加濱藥物本身來(lái)說(shuō),其原料藥在酸中溶解度較高,而在pH>4.0的介質(zhì)中幾乎不溶通過(guò)對(duì)影響藥物釋放度的因素進(jìn)行深入研究,我們根據(jù)流體動(dòng)力學(xué)平衡體系設(shè)計(jì)的胃內(nèi)漂浮片以親水凝膠為骨架材料,遇胃液后表面凝膠膨脹,形成一層屏障,可延緩骨架的水化速度以維持制劑的密度小于胃液而漂浮于胃液表面,延長(zhǎng)制劑的體內(nèi)滯留時(shí)間,并使吸收增加1藥品、試劑與儀器旋轉(zhuǎn)壓片機(jī)(上海天凡藥機(jī)制造廠);ZRS-8G智能溶出儀(上海天大天發(fā));UV-1750紫外分光光度計(jì)(日本島津);CH10槽型混合機(jī)(江蘇黎明制藥機(jī)械有限公司);YK60型顆粒機(jī)(江蘇黎明制藥機(jī)械有限公司)。瑞替加濱原料藥(安徽萬(wàn)邦醫(yī)藥科技有限公司,批號(hào):20121201,藥用級(jí));瑞替加濱對(duì)照品(ToromtoResearchChemicalsInc,批號(hào):1-MIC-175-1,純度:98%);羥丙基纖維素(HPMC)K100m、K15m和K4m(安徽山河藥用輔料股份有限公司,批號(hào)分別為131001、20609、30905);乳糖(ForemostFarms,批號(hào):8511021261);微晶纖維素(MCC)(FmcBiopoilmer,批號(hào):p212824109);碳酸氫鈉(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號(hào):20121102);硬脂酸鎂(MS)(安徽山河藥用輔料股份有限公司,批號(hào):20121203);瑞替加濱市售片(規(guī)格:300mg/片,葛蘭素史克集團(tuán)有限公司,批號(hào):ERS20130211)。2方法和結(jié)果2.1槽型篩選-藥物處理法在預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上基本確定了處方的輔料種類(lèi),分別為HPMCK15m、乳糖、微晶纖維素、碳酸氫鈉、硬脂酸鎂;取處方量的過(guò)80目篩的原輔料(除硬脂酸鎂外)按等量遞增法加入CH10槽型混合機(jī),混勻15min,在機(jī)器轉(zhuǎn)動(dòng)過(guò)程中加入95%乙醇作為潤(rùn)濕劑,制得濕顆粒,減壓干燥,待水分在1%~3%時(shí),取出顆粒,折算加入硬脂酸鎂,混勻,壓圓形片(直徑12mm),使片劑硬度保持在3~4kg,每片含主藥300mg。2.2體外釋放度測(cè)定2.2.1測(cè)定波長(zhǎng)的選擇由于瑞替加濱難溶于pH=4.0以上的介質(zhì),而易溶于乙腈,故將瑞替加濱先溶于適量的乙腈,再用相應(yīng)的試劑稀釋至適當(dāng)?shù)臐舛?精密稱(chēng)取瑞替加濱對(duì)照品約10mg、用乙腈作溶媒,溶解定溶于10mL量瓶中;再分別從中精密移取1mL,用純化水、pH=1.2鹽酸、pH=4.0乙酸鹽緩沖液及pH=6.8磷酸鹽緩沖液稀釋至20mL,搖勻,按紫外-可見(jiàn)分光光度法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄ⅣA),以相應(yīng)溶劑為空白,在波長(zhǎng)200~600nm進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描,繪制紫外吸收曲線。獲得最大吸收波長(zhǎng)分別為294、293、293、293nm,故選擇293nm作為釋放度的測(cè)定波長(zhǎng),同時(shí)檢測(cè)各波長(zhǎng)處輔料幾乎無(wú)吸收。2.2.2法定介質(zhì)中標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱(chēng)取瑞替加濱對(duì)照品約10mg、用pH=1.2的鹽酸(模擬人工胃液)稀釋至10mL量瓶中;分別精密量取1、2、3、4、5mL置50mL量瓶中,加pH=1.2的鹽酸稀釋至刻度,搖勻,0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,按紫外-可見(jiàn)分光光度法(中國(guó)藥典2010年版二部附錄ⅣA),以相應(yīng)溶劑為空白,于293nm處測(cè)定吸光度,以濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸。得回歸方程為y=2.669x+0.0164,r2.2.3法定介質(zhì)中穩(wěn)定性的測(cè)定取瑞替加濱標(biāo)準(zhǔn)溶液,37℃下,分別放置0、2、4、6、8、12h;測(cè)定吸光度。結(jié)果表明,瑞替加濱在37℃下放置12h穩(wěn)定,其吸光度的RSD<2.0%,瑞替加濱穩(wěn)定性良好。2.2.4漂浮性能的測(cè)試漂浮制劑的體外漂浮性能測(cè)定法最簡(jiǎn)單、最直觀的試驗(yàn)方法是將漂浮制劑置于人工胃液中與普通制劑進(jìn)行對(duì)照,或在進(jìn)行釋放度試驗(yàn)時(shí)實(shí)時(shí)觀察制劑的漂浮情況。將制成的片劑成品置于(37±0.5)℃的人工胃液中,觀測(cè)片劑起漂時(shí)間以及持續(xù)漂浮時(shí)間。在釋放度測(cè)定時(shí),觀察并記錄起漂時(shí)間及持續(xù)漂浮時(shí)間。胃內(nèi)漂浮制劑要求起漂時(shí)間<5min,持續(xù)漂浮時(shí)間>8h。2.3不同藥物的使用配方對(duì)瑞替加濱胃漂浮片緩釋片釋放的影響2.3.1制備工藝的考察目前主要的壓片工藝有2種:粉末直接壓片、濕法制粒壓片,有資料顯示胃滯留片的制備工藝以粉末直接壓片為宜,因?yàn)橛H水凝膠制得的溶液作為黏合劑進(jìn)行濕法制粒不利于片劑的水化漂浮;課題組分別以2種不同壓片工藝制備漂浮緩釋片,漂浮性能均能符合要求,但在粉末直接壓片的過(guò)程中,粉末的流動(dòng)性極差,同時(shí)還有黏沖的現(xiàn)象,故選擇濕法制粒。2.3.3HPMC用量的篩選在相同處方中改變HPMC的用量制得的胃漂浮片緩釋曲線見(jiàn)圖2,結(jié)果表明HPMC的用量對(duì)瑞替加濱胃漂浮片的釋放和漂浮性能有顯著影響,骨架材料的用量越大,其阻滯釋放的效果越明顯,同時(shí)其起漂時(shí)間越短,持續(xù)漂浮時(shí)間越長(zhǎng),因此將HPMCK15m的用量作為一個(gè)重要影響因素來(lái)考察。2.3.4乳糖用量篩選在相同的處方中加入不同量的乳糖作為制孔劑來(lái)調(diào)節(jié)緩釋片的釋放,但是對(duì)藥物的漂浮性能幾乎無(wú)影響,結(jié)果見(jiàn)圖3。各曲線間的f2.3.5微晶纖維素用量篩選在相同的處方中加入不同量的微晶纖維素作為填充劑,其釋放曲線見(jiàn)圖4,結(jié)果表明不同微晶纖維素含量的緩釋片釋放幾乎無(wú)差異,同時(shí)對(duì)藥物的漂浮性能幾乎無(wú)影響,因此不將微晶纖維素的用量作為影響藥物釋放的一個(gè)因素。2.3.6碳酸氫鈉用量的篩選在相同的處方中改變碳酸氫鈉的含量,所制備的漂浮片的釋放曲線見(jiàn)圖5,結(jié)果表明碳酸氫鈉的含量越小,瑞替加濱胃漂浮緩釋片的緩釋效果越好。另一方面,碳酸氫鈉遇胃酸可產(chǎn)生CO2.3.7硬脂酸鎂用量的篩選在相同的處方中改變硬脂酸鎂的比例,來(lái)考察所壓制片劑的外觀、顆粒的休止角、卡爾系數(shù);但同時(shí)硬脂酸鎂作為疏水性的輔料,可使片劑表面具有一定的疏水性而使藥物的釋放速率明顯減慢,故仍需考察不同硬脂酸鎂用量對(duì)藥物釋放的影響,結(jié)果見(jiàn)圖6和表1。結(jié)果表明不同的硬脂酸鎂用量對(duì)緩釋片的釋放、漂浮性能及顆粒的流動(dòng)性幾乎無(wú)影響,故不將硬脂酸鎂的用量作為影響藥物釋放的重要因素。2.4數(shù)據(jù)的分析與處理2.4.1正交試驗(yàn)因素水平的確定通過(guò)單因素考察,初步確定了正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的因素及水平范圍。將HPMCK15m、乳糖、碳酸氫鈉按各自處方中的用量分為3個(gè)水平。將選定的因素按L2.4.2數(shù)據(jù)的分析與處理本文參照中國(guó)藥典2010版二部附錄ⅪⅩD緩釋制劑指導(dǎo)原則的規(guī)定,以2、6、12h的累計(jì)釋放度為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用綜合分析法由表3直觀分析可知,各因素對(duì)藥物的釋放的影響因素順序?yàn)?B>A>C;A因素、B因素最佳水平均為3;C因素最佳處方為1和2,由于碳酸氫鈉作為助漂劑,易黏沖,特別在濕度環(huán)境大的情況下,壓制的片劑外觀相對(duì)較差,故選擇1水平。從藥物漂浮性能來(lái)看,9個(gè)處方的起漂時(shí)間均<5min,持續(xù)漂浮時(shí)間均>8h,故不把漂浮性能作為最主要因素來(lái)篩選處方,把藥物的釋放作為最主要的因素來(lái)考察;因此最佳處方為A2.5對(duì)片劑硬度的研究胃漂浮緩釋片中制備工藝的壓力大小應(yīng)得當(dāng),片劑既需要有適宜的硬度,又要使壓成的藥片內(nèi)部保持適當(dāng)?shù)目障?以便保持密度盡量<1g·cm2.6不同規(guī)格中提取的片重固定片的釋放結(jié)果藥物從親水凝膠骨架片中溶出的主要機(jī)制為擴(kuò)散和溶蝕,所以片劑的表面積大小會(huì)對(duì)藥物的釋放有一定的影響,故設(shè)計(jì)3個(gè)直徑(8、10、12mm)來(lái)進(jìn)行考察;所得釋放結(jié)果見(jiàn)圖9;結(jié)果顯示對(duì)于處方組成及片重固定的片劑而言,表面積越小則藥物的釋放越緩慢,且片劑的壓力越大,藥物的起漂時(shí)間越慢;直徑12mm的片劑起漂時(shí)間僅為1.5min左右,而直徑8mm的片劑起漂時(shí)間達(dá)到了8min左右。綜合胃漂浮緩釋片的起漂時(shí)間要求,故選擇12mm的直徑較為適宜。2.7處方與工藝重現(xiàn)性考察按照“2.4”項(xiàng)下確定的最優(yōu)處方與工藝連續(xù)制備3批瑞替加濱胃漂浮緩釋片,按照釋放度測(cè)定法分別測(cè)定3批樣品的體外釋放度,考察處方與工藝的重現(xiàn)性,結(jié)果見(jiàn)圖10和表5,瑞替加濱胃漂浮片的處方與工藝重現(xiàn)性良好。2.8與普通片的比較選取自制的批號(hào)為20131212的瑞替加濱胃漂浮緩釋片與葛蘭素史克公司原研開(kāi)發(fā)的普通瑞替加濱片(規(guī)格:300mg,薄膜包衣速釋片)進(jìn)行“2.2.5”項(xiàng)下釋放的比較,結(jié)果見(jiàn)圖11,表明普通片劑在20min左右即釋放出100%,自制的瑞替加濱胃漂浮緩釋片體外持續(xù)釋放時(shí)間達(dá)到12h。2.9濱胃漂浮片體外釋藥曲線擬合分別用零級(jí)、一級(jí)和Higuchi方程對(duì)最優(yōu)處方制備的瑞替加濱胃漂浮緩釋片體外釋藥曲線進(jìn)行擬合,用相關(guān)系數(shù)r判斷其擬合度,結(jié)果見(jiàn)表6。由擬合結(jié)果可以看出,以Higuchi方程擬合的相關(guān)系數(shù)最大,可見(jiàn)本制劑體外釋放呈Higuchi擴(kuò)散特征。3與hpmc規(guī)格的關(guān)系本文測(cè)定瑞替加濱胃漂浮片釋放度時(shí)采用槳法,而國(guó)內(nèi)大多數(shù)文獻(xiàn)在測(cè)定胃漂浮緩釋片時(shí)采用的是籃法,具體原因?yàn)镠PMC遇水有很強(qiáng)的黏附作用,采用籃法時(shí),片劑漂浮并黏附在不銹鋼的轉(zhuǎn)籃頂部,阻礙了藥物的釋放,為了更好地模擬該制劑在體內(nèi)的漂浮情況,本研究采用槳法進(jìn)行測(cè)定。有文獻(xiàn)報(bào)道瑞替加濱在堿性條件下容易降解,稱(chēng)取處方量的碳酸氫鈉溶解于溶出介質(zhì)中,溶液的pH沒(méi)有變化,在碳酸氫鈉加入前后pH值都為0.94,系統(tǒng)遠(yuǎn)沒(méi)有達(dá)到堿性環(huán)境,可以忽略處方量碳酸氫鈉對(duì)溶出介質(zhì)酸堿度的影響,其未影響瑞替加濱的穩(wěn)定性。試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)片劑的硬度對(duì)藥物的漂浮性能有重要的影響,當(dāng)片劑硬度>5kg時(shí),雖然片劑的表面光潔,但是在釋放介質(zhì)中5min內(nèi)很難起漂,而片劑的硬度在3~4kg時(shí),瑞替加濱胃漂浮片具有良好的外觀、漂浮性能和釋放性能。試驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)片劑的形狀、直徑均影響藥物的釋放,可能是不同形狀和直徑的片劑遇水形成的凝膠層厚度不同,從而使藥物透過(guò)凝膠層的速度受到影響。2.3.2HPMC規(guī)格的影響選擇3種規(guī)格的HPMCK4m、K15m、K100m,分別按“2.1”項(xiàng)下方法制備得瑞替加濱胃內(nèi)漂浮型緩釋片,繪制釋放曲線,比較不同規(guī)格的HPMC對(duì)藥物釋放及漂浮性能的影響。不同規(guī)格的HPMC的漂