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尿蛋白檢測試劑盒(麗春紅比色法)簡介:在尿液樣本中加入蛋白沉淀劑和麗春紅S,離心,蛋白質(zhì)-染料復合物被沉淀下來,將沉淀物加入堿性溶液溶解后,分光光度法檢測處吸光度,計算蛋白含量。Leagene尿蛋白檢測試劑盒(麗春紅比色法)主要用于定量檢測尿液中蛋白含量,較雙縮脲法靈敏,對白蛋白的敏感性比球蛋白要高。組成:編號名稱TC0421100TStorage試劑(A):磺基水楊酸溶液100mlRT避光試劑(B):麗春紅S試劑(10x)3mlRT避光試劑(C):Alkalinebuffer200mlRT試劑(D):蛋白標準20mgRT使用說明書1份自備材料:1、 蒸餾水2、 離心管3、 比色杯4、 分光光度計操作步驟(僅供參考):1、 取適量麗春紅S試劑(10x),加入蒸餾水,稀釋至1乂,室溫可保存3~4個月。2、 取1ml蛋白標準配制液加入到蛋白標準(BSA)(20mg)中,充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白標準溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標準溶液應(yīng)-20OC保存。3、 取適量蛋白標準,稀釋至濃度分別為200、400、600、800、1000、1200、1600她/ml或所需濃度。各取上述稀釋度的蛋白標準,與待測樣本操作相同,用比色,制成標準曲線。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取20mg/ml蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解BSA稀釋液。稀釋后的蛋白標準也應(yīng)-20C長期保存。4、 定性實驗:取新鮮尿液轉(zhuǎn)移入小試管。滴加磺基水楊酸溶液3~4滴,形成界面。立即觀察,如有渾濁,提示尿液中含有蛋白質(zhì),渾濁深淺表示含量多少。
I\1Six!-*-!S以半定量白濃度調(diào)里?陰性(-)不顯渾濁測得的蛋整樣本用可疑(士)輕微渾濁,隱約可見,含蛋白量約為0.05~0.2g/L(+)明顯渾濁,無顆粒出現(xiàn),含蛋白量約為0.3g/L(2+)稀薄乳樣渾濁,出現(xiàn)顆粒,,含蛋白量約為1g/L(3+)乳濁,有絮片狀沉淀,含蛋白量約為3g/L(4+)絮片狀沉淀,含蛋白量>5g/L蛋白濃度樣本用量<1g/L100pl1-3g/L50pl(測得值x2)<1g/L10Ml(測得值x10)5、取小試管,按上述要求量加入待測樣本,再加入1乂麗春紅S試劑,混勻。6、離心,將上清緩緩倒出后,置于濾紙上數(shù)分鐘,并用小濾紙條吸附管壁上多余的試劑(注意勿觸及管低沉淀)。7、 加入Alkalinebuffer至沉淀中,混合使沉淀溶解。8、 測定波長處的吸光值,如無,之間的波長也可。9、 根據(jù)標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。參考區(qū)間:46.5±18.1mg/L注意*項:1、 蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白標準配制液后,即獲得蛋白標準原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標準原液-20°C長期保存。2、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致,有可能導致測定不準確。3、 待測蛋白含量<0.1g/L時,可用標本加麗春紅S試劑(10x),混勻,余下操作同上。4、 本法較為靈敏,較比濁法誤差小,膽紅素<mg/L時對
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