細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作

細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作你知道細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作呢?很多研究人員都在使用血球計(jì)數(shù)器，使用起來不方便，而自動(dòng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀使用方便，時(shí)間短，那么你知道細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作嗎?一起來看看。文章目錄一、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作二、如何選購細(xì)胞計(jì)數(shù)儀三、使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的注意事項(xiàng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作1、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀怎么操作將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上。輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞均勻分布;吸出少許細(xì)胞懸液滴在細(xì)胞入口,使細(xì)胞懸液充滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間,靜置1-2山皿,使細(xì)胞沉降;注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細(xì)胞懸液進(jìn)入旁邊的槽中。在顯微鏡下對(duì)A/B/C/D四個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),壓在大格四周邊線上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)壓在2條邊線上的細(xì)胞（如右側(cè)和下方）;若鏡下有2個(gè)細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),則應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算;若細(xì)胞團(tuán)數(shù)量較多,占細(xì)胞總量的10%左右,則說明細(xì)胞分散不好會(huì)導(dǎo)致計(jì)算不準(zhǔn)確,需要重新制備細(xì)胞懸液。按公式計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量:細(xì)胞數(shù)/mL=四個(gè)大格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)X104/4?（每一個(gè)大格的體積為長1mmX寬1mmX高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000mm3,因此計(jì)算時(shí)需X104）。2、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的原理電阻抗檢測原理血細(xì)胞是相對(duì)不良導(dǎo)體,當(dāng)血細(xì)胞懸浮電解質(zhì)中,將小孔管插入細(xì)胞懸液,使其管內(nèi)充滿稀釋液,當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過小孔時(shí),瞬間引起電壓變化出現(xiàn)一個(gè)脈沖信號(hào),細(xì)胞體積越大,引起脈沖越大,產(chǎn)生脈沖振幅越高。流式細(xì)胞術(shù)加光學(xué)檢測原理利用流式細(xì)胞術(shù)使單個(gè)細(xì)胞隨著流體動(dòng)力聚集的鞘流液在通過激光照射的檢測區(qū)時(shí),使光束發(fā)生折射、衍射和散射,散射光光檢測器接受后產(chǎn)生脈沖,脈沖大小與被照細(xì)胞的大小成正比,脈沖的數(shù)量代表了被照細(xì)胞的數(shù)量。3、白細(xì)胞分類原理白細(xì)胞三分類原理:根據(jù)電阻抗法原理,不同體積的白細(xì)胞通過小孔時(shí)產(chǎn)生的脈沖大小有明顯差異,儀器根據(jù)脈沖的大小將白細(xì)胞進(jìn)行分群。標(biāo)本中加入溶血?jiǎng)?將紅細(xì)胞溶解,儀器將從白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中測量得到的大于35fl電子脈沖的數(shù)量作為白細(xì)胞計(jì)數(shù)。同時(shí)根據(jù)脈沖的大小將血內(nèi)白細(xì)胞分為三群:小細(xì)胞群（35?90fl,主要為淋巴細(xì)胞）、中間細(xì)胞群（91?160fl，包括單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞及幼稚細(xì)胞等）和大細(xì)胞群（161?450fl,以中性粒細(xì)胞為主）。

其特點(diǎn)是檢測速度快,操作簡便,可大大提高工作效率。此類儀器可用于常規(guī)檢查標(biāo)本白細(xì)胞分類的篩選,對(duì)儀器檢測出的陽性標(biāo)本應(yīng)該進(jìn)一步做顯微鏡檢查。如有懷疑血液病的病人,即便儀器沒提示異常,也應(yīng)作血涂片,顯微鏡檢查。如何選購細(xì)胞計(jì)數(shù)儀1、要考慮細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的性價(jià)比:如果您的目的只是代替手工計(jì)數(shù),節(jié)省操作者的時(shí)間,操作簡便,完全沒有必要花幾十萬買一臺(tái)僅能進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的儀器,花大錢辦小事。2、要考慮細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的穩(wěn)定性和重復(fù)性:如果您對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性要求高,那儀器的高性能和穩(wěn)定性是首要考慮因素,儀器的硬件以及配套軟件的穩(wěn)定都要考慮,不能一味的追求低價(jià)格。3、要考慮根據(jù)細(xì)胞類型選擇適合的型號(hào):如果您的樣本是原代細(xì)胞,背景復(fù)雜,紅細(xì)胞和血小板污染嚴(yán)重,你又希望快速精確計(jì)數(shù)有核細(xì)胞且進(jìn)行精確細(xì)胞活力分析,計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和重現(xiàn)性。4、要考慮實(shí)驗(yàn)室多功能檢測需求:如果細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析只是實(shí)驗(yàn)室的部分需求,而實(shí)驗(yàn)室還要進(jìn)行凋亡、細(xì)胞周期、GFP等功能檢測,且實(shí)驗(yàn)室也無配套的儀器,那為實(shí)驗(yàn)室裝備一款多功能的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀是您的最佳之選。

使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的注意事項(xiàng)1、務(wù)必使分散成單個(gè)細(xì)胞,取樣計(jì)數(shù)前,充分混勻細(xì)胞懸液。2、顯微鏡下計(jì)數(shù)時(shí),遇到2個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算。如果細(xì)胞團(tuán)＞10%,說明細(xì)胞分散不充分。3、如果計(jì)數(shù)時(shí)細(xì)胞密度較大,數(shù)起來較麻煩也不容易計(jì)準(zhǔn),所以如果感覺細(xì)胞數(shù)量較多時(shí),可以從細(xì)胞懸液中吸取10至100u1,用少量PBS稀釋后再作計(jì)數(shù)。4、注意蓋玻片下不要有氣泡,