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文檔簡介
生物制藥工藝學(xué)期末考試卷含答案一、填空題(每空0.5分,共30分)1.酶轉(zhuǎn)化法與直接發(fā)酵法生產(chǎn)氨基酸的反應(yīng)本質(zhì)相同,均屬酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)。但兩者相比,酶轉(zhuǎn)化法所需設(shè)備及工藝簡單,產(chǎn)物
濃度
高,
轉(zhuǎn)化率
高,生產(chǎn)周期
短
,副產(chǎn)物
少,酶的利用率也高。2.多肽的化學(xué)合成有液相合成和固相合成,常用的氨基保護(hù)基有
芐氧羰基
、叔丁氧羰基(BOC)
和
9-芴甲氧羰基(Fmoc)
。其中Fmoc
最常用。3.到目前為止,多糖的構(gòu)效關(guān)系方面的研究還是很不完善的,但可以確定多糖的活性與其
高級結(jié)構(gòu)
、
分支度及其側(cè)鏈
、
分子量
、及
多糖中的取代基
等密切相關(guān)。4、溶質(zhì)通過色譜柱時造成的峰加寬效應(yīng)包括分子擴散
、渦流擴散
、
流動相中傳質(zhì)阻力
、
固定相中傳質(zhì)阻力。5、寫出下列離子交換劑類型:732
強酸型陽離子交換樹脂
,724
弱酸型陽離子交換樹脂
,717
強堿型陰離子交換樹脂
,CM-C
陽離子交換纖維素
,DEAE-C
陰離子交換纖維素
,PBE94
陰離子交換劑
。6、常用的吸附劑有
活性炭
,
硅膠
和
大孔吸附樹脂
等。7、過飽和溶液的形成方法有蒸發(fā)法、溫度誘導(dǎo)法、鹽析結(jié)晶法、有機溶劑結(jié)晶法、等電點法、微量擴散法、化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶、共沸蒸餾結(jié)晶(八選七)。8、根據(jù)色譜機理,色譜柱分為:反相色譜、正相色譜、離子交換色譜、凝膠過濾色譜(或親和色譜)
。10、透析的方法有:旋轉(zhuǎn)透析器,平面透析器,
連續(xù)透析器,淺流透析器。11、常用的制備型離心機轉(zhuǎn)子有
角度
轉(zhuǎn)子,
水平
轉(zhuǎn)子,
區(qū)帶
轉(zhuǎn)子,
垂直
轉(zhuǎn)子。12、克服濃差極化現(xiàn)象的措施有
攪拌
,
震動,
錯流,
切流。13、供體
,
受體
和
載體
是重組DNA技術(shù)的三大基本元件14、寫出下列英文縮寫的中文名稱:IFN
干擾素
;IL-2
白介素-2
;TNF
腫瘤壞死因子
。15、青霉素屬于
β-內(nèi)酰胺
類抗生素,它的性質(zhì)很不穩(wěn)定,用溶劑萃取法分離時整個提煉過程應(yīng)在
低溫
,
快速
,
準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值下
進(jìn)行。16、四環(huán)類抗生素是一類以四并苯(萘并萘)為母核的一族抗生素;鏈霉素是氨基糖苷
類抗生素;紅霉素是分子內(nèi)含有
14
元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。二、名詞解釋(每小題3分,共24分)1、基因藥物:
核酸類藥物,以遺傳物質(zhì)DNA、RNA為治療物質(zhì)基礎(chǔ)的藥物(1分),如核酸疫苗、反義藥物。(1分)與基因工程類藥物不同,基因工程藥物化學(xué)組成上主要是蛋白質(zhì)或多肽,但基因藥物組成上主要為核酸(1分)。2、2、尼柯爾斯基方程式:式中m1、m2、C1、C2分別為樹脂上和平衡溶液中A1、A2兩種離子的濃度。Z1、Z2分別為兩種離子的價電數(shù)。K值為“交換常數(shù)”。該方程式表達(dá)了離子交換平衡時,兩種離子與交換劑吸附強弱的數(shù)量關(guān)系。當(dāng)K>1時表示樹脂對A1離子的吸附力大于A2離子,反之亦然。(1分)3、分級分離:將分子量相差不大的大分子物質(zhì)加以分離,如分離血清球蛋白與白蛋白(2.5分),分級分離應(yīng)盡量使待分離各物質(zhì)的K值相差大些,并使分子量分布不在凝膠分離范圍的一側(cè)(0.5分)。4、干涉RNA(RNAi)RNAinterference:是指在生物體細(xì)胞內(nèi),dsRNA(1分)引起同源mRNA的特異性降解(1分),因而抑制相應(yīng)基因表達(dá)的過程。是一種在生物體內(nèi)普遍存在的轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默,也是抵御外在感染的重要保護(hù)機制。(1分)5、速度區(qū)帶離心法:
又叫速率區(qū)帶離心法或分級區(qū)帶離心法。離心操作時將樣品液置于連接或不連接線性或非線性密度梯度液上(如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等)(1分),控制離心時間,使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)分成一系列區(qū)帶,達(dá)到彼此分離的目的。(2分)本法適用于分離顆粒大小不同而密度相近或相同的組分,如DNA與RNA混合物,核蛋白體亞單位及線粒體、溶酶體及過氧化酶體等。6、滲透壓沖擊法:
細(xì)胞破碎的一種方法(1分)。先把細(xì)胞放在高滲溶液中,由于滲透壓的作用,細(xì)胞內(nèi)的水分便向外滲出,細(xì)胞發(fā)生收縮,當(dāng)達(dá)到平衡后,將介質(zhì)快速稀釋或?qū)⒓?xì)胞轉(zhuǎn)入水或緩沖液中,由于滲透壓發(fā)生突然變化,胞外的水分迅速滲入胞內(nèi),使細(xì)胞快速膨脹而破裂,使產(chǎn)物釋放到溶液中(2分)。7、氣泡壓力法:
是測定濾膜最大孔徑的簡易方法(1分)。氣體排除微孔濾膜孔隙中的液體并在膜表面形成氣泡時,須克服液體的表面張力,孔徑與氣體壓力有一定的關(guān)系,采用此原理測定濾膜孔徑的方法稱氣泡壓力法。(2分)8、DNA疫苗:
屬于基因藥物中的一種,指使用能夠表達(dá)抗原的基因本身即核酸制成的疫苗(2分)?;蛞呙邕M(jìn)入人體后,在人體細(xì)胞環(huán)境中表達(dá)出蛋白質(zhì)抗原,持續(xù)刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫反應(yīng),達(dá)到預(yù)防疾病的目的。(1分)三、單項選擇題(每小題1分,共20分)1.利用產(chǎn)氨短桿菌發(fā)酵法生產(chǎn)肌苷酸,第一步是用誘變育種的方法篩選缺乏哪種酶的腺嘌呤缺陷型菌株,并在發(fā)酵培養(yǎng)基中提供亞適量的腺嘌呤。(
A
)A.SAMP合成酶
B.SAMP裂解酶C.PRPP轉(zhuǎn)酰胺酶D.IMP脫氫酶2、蛋白質(zhì)類物質(zhì)的分離純化往往是多步驟的,其前期處理手段多采用下列哪類的方法。(
B
)A.分辨率高
B.負(fù)載量大
C.操作簡便D.價廉3、用大網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì),一般用下列哪種溶液洗(
D
)A.水B.高鹽C.低pH
D.高pH4、凝膠層析中,有時溶質(zhì)的Kd>1,其原因是(
B
)A.凝膠排斥
B.凝膠吸附
C.柱床過長D.流速過低5、在酸性條件下用下列哪種樹脂吸附氨基酸有較大的交換容量(
C
)A.羥型陰B.氯型陰
C.氫型陽
D.鈉型陽6、親和層析的洗脫過程中,在流動相中加入配基的洗脫方法稱作(C)A.陰性洗脫B.劇烈洗脫
C.競爭洗脫
D.非競爭洗脫7、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時,蛋白質(zhì)溶解度(
C
)A.增大B.減小
C.先增大,后減小
D.先減小,后增大8、鹽析法與有機溶劑沉淀法比較,其優(yōu)點是(
B
)A.分辨率高
B.變性作用小
C.雜質(zhì)易除D.沉淀易分離9、“類似物容易吸附類似物”的原則,一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)(B
)A.極性溶劑
B.非極性溶劑
C.水D.溶劑10、能夠除去發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的方法是(
C
)A.過濾B.萃取
C.離子交換
D.蒸餾11、下列哪種方法是由于細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成導(dǎo)致細(xì)胞破碎的(
C)A.真空干燥B.酶解法
C.凍融法
D.滲透壓法12、紅霉素在pH9.8時的分配系數(shù)(醋酸丁酯/水)為44.5,若用等體積的醋酸酯進(jìn)行單級萃取,則理論收率為(
A
)A.97.8%
B.99.32%C.96.5%D.95.9%13、在高效液相色譜中,下列哪種檢測器不適合于在梯度洗脫時使用.(
D
)A.紫外檢測器B.熒光檢測器C.蒸發(fā)光散射檢測器
D.示差折光檢測器14、某抗生素以醋酸丁酯為流動相進(jìn)行pH紙層析,酸性條件下比移值大,堿性條下比移值小,則該抗生素為(
B)A.弱堿性
B.弱酸性
C.強堿性D.強酸性15、環(huán)孢菌素A是微生物產(chǎn)生的(D)A.HMG-CoA還原酶抑制劑B.β-內(nèi)酰胺酶抑制劑C.氨基糖苷類抗生
D.免疫抑制劑16、選用110樹脂分離純化鏈霉素,交換時pH應(yīng)為(C)A.2~4B.4~6
C.6~8
D.12~1417、紅霉素以游離分子形式存在時,可用吸附法分離,吸附時發(fā)酵液的pH應(yīng)調(diào)節(jié)(A)A.大于
7B.小于7C.等于7D.2~1218、從四環(huán)素發(fā)酵液中去除鐵離子,可用(
B
)A.草酸酸化
B.加黃血鹽
C.加硫酸鋅D.氨水堿化19、用大腸桿菌作宿主表達(dá)重組DNA藥物,缺點是(
C
)A.蛋白質(zhì)表達(dá)量低B.生長慢C.產(chǎn)物無糖基修飾D.難以獲得工程菌20、下列藥物哪些是重組DNA藥物(
B
)A.蛋白質(zhì)工程藥物
B.基因藥物
C.天然生物藥物D.半合成生物藥物四、論述題(共26分)答案:A:去血紅蛋白(1分)B:乙醇(1分)C:氯仿(1分)D:丙酮(1分E:熱變性(1分)F:60-70°C(1分)G洗脫(1分)3、試述雙水相萃取及其影響因素。(6分)雙水相萃取技術(shù)(two-aqueousphaseextraction),又稱水溶液兩相分配技術(shù),它利用不同的高分子溶液相互混合可產(chǎn)生兩相或多相系統(tǒng),靜置平衡后,分成互不相溶的兩個水相,利用物質(zhì)在互不相溶的兩水相間分配系數(shù)的差異來進(jìn)行萃取的方法,稱為雙水相萃取法。(3分)影響因素:成相高聚物濃度-界面張力、成相高聚物的相對分子質(zhì)量、電化學(xué)分配、疏水反應(yīng)、pH值、溫度。(3分)4、基因治療中常用的病毒與非病毒載體各有哪些?(7分)病毒載體是指用具有感染性的病毒作為哺乳動物核苷酸的傳遞系統(tǒng)
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