種子活力測(cè)定綜合性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃

綜合性實(shí)驗(yàn)—《主要農(nóng)作物種子活力測(cè)定》實(shí)驗(yàn)計(jì)劃實(shí)驗(yàn)安排與分工表實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)時(shí)間主要參加者備注幼苗評(píng)定試驗(yàn)5月19—24日低溫發(fā)芽試驗(yàn)5月19—24日加速老化試驗(yàn)5月19—23日電導(dǎo)率測(cè)定5月20日四唑定量法測(cè)定5月22日實(shí)驗(yàn)具體內(nèi)容實(shí)驗(yàn)一幼苗評(píng)定試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理通過(guò)測(cè)定種子的發(fā)芽速度和幼苗生長(zhǎng)勢(shì)來(lái)判斷種子活力，一般情況下活力高的種子發(fā)芽快且生長(zhǎng)健壯，種子發(fā)芽后將種子分為發(fā)芽和未發(fā)芽?jī)深?，在將幼苗分成三?jí)：一級(jí)健壯幼苗：胚芽健壯，深綠色，初生根健壯或初生根少但有大量次生根；為高活力種子。二級(jí)健壯幼苗：胚芽短或細(xì)長(zhǎng)，初生根少或細(xì)弱；為低活力但具有發(fā)芽力的種子。三級(jí)不正常幼苗：根或芽殘缺或根芽破裂，苗色褪綠。二、實(shí)驗(yàn)材料

種子材料：豌豆試劑：細(xì)沙水儀器：恒溫培養(yǎng)箱發(fā)芽盒鑷子操作步驟5月19日上午8:30，取4份試樣，每份50粒，種子置于沙床中，深度3cm，于20℃、相對(duì)濕度95%—98%、光照12h、光照度12000xl的條件下培養(yǎng)6d，5月24日上午8:30取出幼苗進(jìn)行評(píng)定。注意事項(xiàng)1、及時(shí)觀察種子的發(fā)芽狀況，適時(shí)補(bǔ)充水。2、取出幼苗鑒定時(shí)動(dòng)作要輕緩，注意保留幼苗的根。實(shí)驗(yàn)二低溫發(fā)芽試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理棉花早春播種常遇低溫，會(huì)引起胚根損傷，下胚軸生長(zhǎng)速率降低，棉花發(fā)芽的最低溫度一般為15℃，實(shí)驗(yàn)采用18℃低溫模擬田間低溫條件，高活力種子能抵抗低溫條件而生長(zhǎng)。最后，檢查幼苗生長(zhǎng)狀況，苗高（根尖至子葉著生點(diǎn)的距離）達(dá)4cm以上的即為高活力種子。二、實(shí)驗(yàn)材料

種子材料：脫絨棉籽試劑：濾紙細(xì)沙儀器：發(fā)芽盒黑暗培養(yǎng)箱鑷子三、操作步驟5月19日上午8:30，取脫絨棉籽4份，每份50粒，將棉籽均勻置于沙床中，深度3cm，于18℃黑暗條件下發(fā)芽6d，5月24日上午8:30檢查幼苗生長(zhǎng)狀況，按照標(biāo)準(zhǔn)計(jì)數(shù)。四、注意事項(xiàng)及時(shí)觀察種子的發(fā)芽狀況，適時(shí)補(bǔ)充水。計(jì)數(shù)時(shí)不要弄斷幼苗，測(cè)量長(zhǎng)度時(shí)選好測(cè)量工具。實(shí)驗(yàn)三加速老化試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理種子在高溫（40~45℃）和高濕（約95%相對(duì)濕度）條件下能快速劣變，高活力種子能忍受逆境條件處理，劣變較慢，形成正常發(fā)芽的幼苗；而低活力種子劣變較快，長(zhǎng)成較多不正常幼苗或者完全死亡。統(tǒng)計(jì)正常發(fā)芽的幼苗、不正常幼苗和死亡種子數(shù)即可判斷種子活力高低。實(shí)驗(yàn)材料種子材料：小麥試劑：濾紙水儀器：恒溫培養(yǎng)箱鑷子操作步驟5月19日上午8:30，取小麥種子4份，每份50粒，將小麥種子均勻分布于紙床中，卷好后置于高溫（40~45℃）和高濕（約95%相對(duì)濕度）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5—7d，分別于5月23日上午8:30和5月25日上午8:30統(tǒng)計(jì)正常發(fā)芽的幼苗、不正常幼苗和死亡種子數(shù)。注意事項(xiàng)注意加水的量，保證在發(fā)芽過(guò)程中水分量充足。統(tǒng)計(jì)幼苗數(shù)時(shí)，注意分清幼苗所屬的類別。實(shí)驗(yàn)四電導(dǎo)率測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理種子吸脹初期，細(xì)胞膜重建和修復(fù)能力影響電解質(zhì)的滲出程度，高活力種子膜完整性修復(fù)速度快，能最大程度修復(fù)任何損傷，滲出物少，而低活力種子修復(fù)能力弱，滲出物多。所以高活力種子浸泡液的電導(dǎo)率低于低活力種子。電導(dǎo)率與田間成苗成負(fù)相關(guān)。二、實(shí)驗(yàn)材料種子材料：豌豆種子試劑：熱水去離子水塑料薄膜儀器：80mm燒杯電導(dǎo)儀恒溫水浴鍋分析天平操作步驟5月20日上午8:30，取50粒種子稱重（精確至2位小數(shù)），2個(gè)重復(fù)。取直徑80mm左右的燒杯3個(gè)，用熱水和去離子水洗凈。將種子放入燒杯中，加入250ml去離子水，水溫為20℃，另一燒杯內(nèi)加去離子水作對(duì)照，燒杯須用薄膜蓋蓋好，以減少水分蒸發(fā)和被灰塵污染。將所有燒杯置于20℃恒溫水浴鍋中放置24小時(shí)，5月21日上午8:30在恒溫水浴鍋中用電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡液和對(duì)照的電導(dǎo)率。將各重復(fù)樣品的電導(dǎo)率減去對(duì)照電導(dǎo)率然后求平均，然后查看種子生物學(xué)教材174頁(yè)表7—5確定種子活力大小。注意事項(xiàng)電導(dǎo)率受許多因素的影響，如種子大小及完整性、種子水分、浸泡的溫度及時(shí)間、容器的大小、溶液體積等影響，所以應(yīng)嚴(yán)格按操作步驟進(jìn)行試驗(yàn)。測(cè)定最好使用去離子水，也可用蒸餾水代替，水溫應(yīng)為20℃。所有電導(dǎo)率都應(yīng)在20℃條件下測(cè)定，因?yàn)槲⑿〉臏囟茸兓瘯?huì)電導(dǎo)率發(fā)生很大差異。實(shí)驗(yàn)五四唑定量法測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理1、種子經(jīng)TTC染色后，用丙酮或乙醇將紅色的三苯基甲（TTCH）提取出來(lái)，然后用分光光度計(jì)測(cè)定提取液的光密度值，或從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出TTCH含量（ug/ml），以定量計(jì)算脫氫酶的活性，光密度值高或TTCH含量高表明種子活力強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)材料種子材料：小麥種子試劑：Na2S2O4TTC溶液蒸餾水丙酮儀器：微量注射器（移液槍）分光光度計(jì)恒溫水浴鍋具塞試管3支三、操作步驟1、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作取5ml容量瓶5個(gè)，加入極少量Na2S2O4，再用微量注射器分別加入0.1%TTC溶液25、50、75、100、150ul，并加水定容，搖勻，配置成5、10、15、20、30ug/ml的TTCH標(biāo)準(zhǔn)溶液，在分光光度計(jì)上于490nm處分別測(cè)定其光密度，并以光密度為橫坐標(biāo)，TTCH濃度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2、將待測(cè)種子浸泡至充分吸脹，除去種皮，剝出整粒種子，每個(gè)樣品數(shù)可數(shù)取相同粒數(shù)，3次重復(fù)。將樣品放進(jìn)具塞試管中，加入10ml0.1%TTC溶液，于38℃左右的恒溫水浴中黑暗下染色1-3小時(shí)，然后將樣品全部倒入研缽，加少許石英砂及丙酮，充分研磨，將研磨液全部倒入容量瓶中，用丙酮沖洗研缽2-3次，并倒入容量瓶，定容并搖勻。然后用分光光度計(jì)