植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建與基本操作（植物組織培養(yǎng)課件）

項(xiàng)目一認(rèn)識組培室與儀器設(shè)備任務(wù)提出（認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室）任務(wù)分析（相關(guān)知識點(diǎn)）任務(wù)實(shí)施反饋與評價(jià)任務(wù)任務(wù)一認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

任務(wù)一認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

滅菌室

緩沖室馴化室培養(yǎng)室無菌操作室準(zhǔn)備室實(shí)驗(yàn)室組成任務(wù)分析（相關(guān)知識點(diǎn)）任務(wù)一認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

水槽天平冰箱儀器藥品柜工作臺培養(yǎng)瓶架烘箱準(zhǔn)備室

無菌操作室緩沖室超凈工作臺超凈工作臺培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架注：為推拉門空調(diào)工作臺馴化室培養(yǎng)室高壓滅菌鍋任務(wù)一認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

成立、劃分課程興趣小組或根據(jù)班級具體情況進(jìn)行合理分組

工作前準(zhǔn)備以小組為單位，根據(jù)任務(wù)單，聯(lián)系相關(guān)的知識點(diǎn)繪制出一幅比較合理的植物組織培養(yǎng)室的平面圖工作實(shí)施任務(wù)實(shí)施認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

根據(jù)要求完成任務(wù)，提交工作總結(jié)報(bào)告（以植物組織培養(yǎng)室的平面圖為主）1老師對各組的任務(wù)完成情況進(jìn)行點(diǎn)評，最后對此任務(wù)完成情況依據(jù)工作考核標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。

2反饋與評價(jià)組培室設(shè)計(jì)基本原則任務(wù)提出（植物組織培養(yǎng)室設(shè)計(jì)）任務(wù)分析（相關(guān)知識點(diǎn)）任務(wù)實(shí)施反饋與評價(jià)任務(wù)任務(wù)組培室的設(shè)計(jì)基本原則

任務(wù)組培室的設(shè)計(jì)基本原則

組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室布局的總體要求：便于隔離便于操作便于滅菌便于觀察任務(wù)組培室的設(shè)計(jì)基本原則

實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)原則：保證無菌操作，達(dá)到工作方便，防止污染。實(shí)驗(yàn)室的大小應(yīng)取決于工作的目的和規(guī)模按組織培養(yǎng)流程來設(shè)計(jì)，避免某些環(huán)節(jié)倒排，引起日后工作混亂利用一定的設(shè)備、器材和特殊的實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，達(dá)到嚴(yán)格無菌的條件任務(wù)組培室的設(shè)計(jì)基本原則

實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行組培研究的主要場所，應(yīng)能滿足清洗、培養(yǎng)基制備、儲(chǔ)藏、無菌操作、培養(yǎng)、鑒定等多方面的工作。任務(wù)一認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

成立、劃分課程興趣小組或根據(jù)班級具體情況進(jìn)行合理分組

工作前準(zhǔn)備以小組為單位，根據(jù)任務(wù)單，聯(lián)系相關(guān)的知識點(diǎn)繪制出一幅比較合理的植物組織培養(yǎng)室的平面圖工作實(shí)施任務(wù)實(shí)施認(rèn)識植物組織培養(yǎng)室

根據(jù)要求完成任務(wù)，提交工作總結(jié)報(bào)告（以植物組織培養(yǎng)室的平面圖為主）1老師對各組的任務(wù)完成情況進(jìn)行點(diǎn)評，最后對此任務(wù)完成情況依據(jù)工作考核標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。

2反饋與評價(jià)項(xiàng)目一認(rèn)識組培室與儀器設(shè)備任務(wù)分析（相關(guān)知識點(diǎn)）反饋與評價(jià)拓展訓(xùn)練任務(wù)任務(wù)實(shí)施任務(wù)提出（掌握相關(guān)儀器設(shè)備的使用）任務(wù)二植物組織培養(yǎng)室相關(guān)儀器設(shè)備的使用滅菌設(shè)備1234接種設(shè)備

培養(yǎng)設(shè)備

馴化設(shè)備任務(wù)二植物組織培養(yǎng)室相關(guān)儀器設(shè)備的使用5其他輔助設(shè)備

任務(wù)分析（相關(guān)知識點(diǎn)）用于培養(yǎng)基、蒸餾水和接種器械的滅菌消毒1.滅菌設(shè)備：高壓蒸氣滅菌鍋工作原理在密閉的蒸鍋內(nèi)，0．1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸氣溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。檢查滅菌鍋內(nèi)是否有水，而且水剛好淹住加熱器待壓力上升到0.05MPa時(shí)，打開放氣閥，放出冷空氣待壓力表指針歸零后，再關(guān)閉放氣閥待壓力降至零時(shí)，打開放氣閥，取出滅菌材料壓力表上升達(dá)0.1-0.15Mpa時(shí)，維持20min后，斷電放入滅菌材料，對稱擰緊滅菌鍋上的螺絲，關(guān)閉放氣閥通電1.滅菌設(shè)備：高壓蒸氣滅菌鍋使用方法1.滅菌設(shè)備：高壓蒸氣滅菌鍋對高壓滅菌后不變質(zhì)的物品，如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具，可以延長滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時(shí)間，既要保壓徹底，又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低，不能隨意延長時(shí)間對于一些布制品，如實(shí)驗(yàn)服、口罩等也可用高壓滅菌。洗凈晾干后用耐高壓塑料袋裝好，高壓滅菌20-30min高壓滅菌前后的培養(yǎng)基，其pH值下降0.2-0.3單位。因此，調(diào)PH值時(shí)，可適當(dāng)調(diào)高0.2－0.3個(gè)單位注意事項(xiàng)用于培養(yǎng)材料的消毒及接種使用前，將超凈工作臺上面的排風(fēng)和殺菌按鈕開啟；滅菌15min后，關(guān)閉殺菌按鈕，打開照明按鈕，即可在上面進(jìn)行操作2.接種設(shè)備：無菌超凈工作臺2.接種設(shè)備：無菌超凈工作臺

電爐推車酒精燈封口膜

接種工具滅菌器培養(yǎng)瓶

主要用于接種后材料的培養(yǎng)3.培養(yǎng)設(shè)備①帶日光燈的培養(yǎng)架可用于原生質(zhì)體和酶制劑的保溫，也可用于組織培養(yǎng)材料的保存及暗培養(yǎng)3.培養(yǎng)設(shè)備②恒溫箱（培養(yǎng)箱）在液體培養(yǎng)基中，可改善培養(yǎng)基中的培養(yǎng)材料的通氣狀況。如從疏松的愈傷組織中獲得單個(gè)細(xì)胞。但注意要設(shè)定適合的溫度及轉(zhuǎn)速。3.培養(yǎng)設(shè)備③搖床與轉(zhuǎn)床4.馴化設(shè)備溫室和防蟲網(wǎng)室5.其它輔助設(shè)備①培養(yǎng)基灌裝機(jī)及洗瓶機(jī)使培養(yǎng)室的濕度保持在定的范圍之內(nèi)用于接種室和培養(yǎng)室溫度的控制5.其它輔助設(shè)備③除濕機(jī)②空調(diào)機(jī)用于干燥洗凈后的玻璃器皿，還可用80℃的溫度烘干組織培養(yǎng)植物材料以測定干物質(zhì)。用于在常溫下易變性或失效的試劑和母液的儲(chǔ)藏，細(xì)胞組織和試驗(yàn)材料的冷凍保藏，以及某些材料的預(yù)處理5.其它輔助設(shè)備④烘箱⑤冰箱5.其它輔助設(shè)備實(shí)驗(yàn)室必備的儀器⑥純水機(jī)與蒸餾水發(fā)生器5.其它輔助設(shè)備天平包括分析天平，電子天平，藥物天平等，用于制備母液時(shí)培養(yǎng)基組成成分的稱取。如一些需要量少的激素和維生素類物質(zhì)，天平的精確度要到0.0001g，這就要求精確度更高的分析天平⑦天平5.其它輔助設(shè)備顯微鏡包括解剖鏡，生物顯微鏡，倒置顯微鏡等。如莖尖的分離則需要解借助解剖鏡⑧顯微鏡5.其它輔助設(shè)備用于校正培養(yǎng)基和酶制劑的PH⑨酸度計(jì)任務(wù)二植物組織培養(yǎng)室相關(guān)儀器設(shè)備的使用任務(wù)實(shí)施陳列與展示組培室內(nèi)常見儀器設(shè)備

工作前準(zhǔn)備電子分析天平的使用、高壓滅菌鍋的使用、超凈工作臺的使用工作實(shí)施任務(wù)二植物組織培養(yǎng)室相關(guān)儀器設(shè)備的使用反饋與評價(jià)根據(jù)要求完成任務(wù)，掌握電子分析天平、高壓滅菌鍋、超凈工作臺的使用1