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PAGEPAGE5高二生物電子題庫專題5課題3知能過關(guān)演練新人教版選修1[學(xué)生用書P53~P54]1.以下關(guān)于凝膠色譜法的原理及操作不正確的選項是()A.是利用凝膠把分子大小不同的物質(zhì)別離開的一種方法B.在洗脫過程中,大分子不能進入凝膠內(nèi)部而最先流出,而小分子可以進入凝膠內(nèi)部而流速緩慢,以致最后流出C.凝膠內(nèi)部有很微細的多孔網(wǎng)狀構(gòu)造,其孔隙大小與被別離的物質(zhì)分子的大小無相應(yīng)關(guān)系D.一般情況下,凝膠對要別離的物質(zhì)沒有吸附作用,因此所有要別離的物質(zhì)都應(yīng)該被洗脫出來解析:選C。凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量大小別離蛋白質(zhì)的有效方法,凝膠是由多糖類化合物構(gòu)成的,其內(nèi)部有很微細的多孔網(wǎng)狀構(gòu)造,小分子蛋白質(zhì)可以進入凝膠內(nèi)部,路程較長,移動速度慢,而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進入凝膠內(nèi)部,路程較短,移動速度快,因此在洗脫過程中別離。選用不同種凝膠,其網(wǎng)狀構(gòu)造不同,孔隙大小不同,可別離的分子大小不同,二者是相關(guān)的,故C項不正確。2.關(guān)于電泳的說法不正確的選項是()A.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程B.帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動C.蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少D.用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳,蛋白質(zhì)的電泳遷移率完全取決于分子的大小解析:選C。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶凈電荷的多少以及分子的大小等因素,SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物,SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差異,使電泳遷移率完全取決于分子的大小。3.(宿州高二檢測)以下操作正確的選項是()A.別離紅細胞時采用低速長時間離心B.紅細胞釋放出血紅蛋白只需要參加蒸餾水就可C.別離血紅蛋白溶液是低速短時間離心D.透析時要用20mmol/L的磷酸緩沖液,透析12h解析:選D。別離紅細胞時,采用低速短時間離心,如500r/min離心2min;別離血紅蛋白溶液時,離心時間較長,如2000r/min離心10min。釋放血紅蛋白時,參加蒸餾水和40%體積的甲苯;透析時用物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液,以除去相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。4.有關(guān)緩沖溶液的說法不正確的選項是()A.緩沖溶液能夠抵抗外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH根本不變B.緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成C.調(diào)節(jié)緩沖劑的使用比例就可以制得在不同pH范圍內(nèi)使用的緩沖液D.生物體內(nèi)進展的各種生物化學(xué)反響都是在一定的pH下進展解析:選A。緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的使用比例就可以制得在不同pH范圍內(nèi)使用的緩沖液。在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵抗外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH根本不變,超過一定范圍,緩沖溶液就起不到這樣的作用了。5.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖,以下有關(guān)蛋白質(zhì)別離的表達正確的選項是()A.假設(shè)將樣品以2000r/min的速度離心10min,分子戊在沉淀中,那么丙也一定在沉淀中B.假設(shè)用凝膠色譜法別離樣品中的蛋白質(zhì),那么分子甲移動速度最快C.將樣品裝入透析袋中透析12h,假設(shè)分子丙保存在袋內(nèi),那么乙也一定保存在袋內(nèi)D.假設(shè)用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳別離樣品中的蛋白質(zhì)分子,那么分子甲和分子丁形成的電泳帶相距最遠解析:選A。分子丙的相對分子質(zhì)量大于戊,所以,在離心時戊存在于沉淀中,丙也一定在沉淀中,A項正確。用凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)時,甲相對分子質(zhì)量最小,容易進入凝膠內(nèi)部,那么移動速度最慢,B項錯誤。分子丙的相對分子質(zhì)量大于乙,那么丙保存在袋內(nèi),乙可能在袋外,C項錯誤。SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳的遷移速度完全取決于分子的大小,因此,分子甲與丙形成的電泳帶相距最遠,D項錯誤。6.(邵陽高二檢測)如圖表示血紅蛋白提取和別離的局部實驗裝置,請據(jù)圖答復(fù)以下問題。(1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細胞的主要組成成分,它在紅細胞中的作用表達了蛋白質(zhì)具有________功能。(2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,那么A是________;乙裝置中,C溶液的作用是________。(3)甲裝置用于________,目的是____________。用乙裝置別離蛋白質(zhì)的方法叫____________,是根據(jù)____________別離蛋白質(zhì)的有效方法。(4)用乙裝置別離血紅蛋白時,待____________時,用試管收集流出液,每5mL收集一管,連續(xù)收集。解析:用透析法(如圖甲)對血紅蛋白進展粗別離,將血紅蛋白溶液裝入透析袋中,可以除去樣品中分子較小的雜質(zhì)。血紅蛋白的純化采用凝膠色譜法(如圖乙),血紅蛋白相對分子質(zhì)量較大,無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路徑較短,移動速度較快,可以收集到紅色的蛋白質(zhì)。答案:(1)運輸(2)磷酸緩沖溶液洗脫血紅蛋白(3)透析(粗別離)去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)凝膠色譜法相對分子質(zhì)量的大小(4)紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱的底端(緊扣教材,思考感悟)你能從凝膠色譜的別離原理分析出為什么凝膠的裝填要嚴密、均勻嗎?(教材P70)答案:凝膠實際上是一些微小的多孔球體,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子不能進入凝膠顆粒內(nèi)部,只能分布在顆粒之間,通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)分子比擬容易進入凝膠內(nèi)的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。因此,樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流出,相對分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出,從而使各種相對分子質(zhì)量不同的分子得以別離。如果凝膠裝填得不夠嚴密、均勻,就會在色譜柱內(nèi)形成無效的空隙,使本該進入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過,攪亂洗脫液的流動次序,影響別離的效果。1.凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)的原理依據(jù)是()A.根據(jù)蛋白質(zhì)分子與凝膠的親和力的大小B.根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小C.根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷的多少D.根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的大小解析:選B。凝膠色譜法所用的凝膠實際上是一些微小多孔的球體,在小球內(nèi)部有許多貫穿的通道,相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢;相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子因此得以別離。2.用凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)的實驗中,相對分子質(zhì)量不同的兩種蛋白質(zhì)在凝膠中的行進過程,可表示為圖中哪一個()解析:選B。如下圖,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)容易通過凝膠間隙,先被洗脫出來;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部,后被洗脫出來。3.關(guān)于血紅蛋白分子組成的表達正確的選項是()A.兩個α-肽鏈、兩個β-肽鏈、一個亞鐵血紅素基團B.一個α-肽鏈、三個β-肽鏈、四個亞鐵血紅素基團C.兩個α-肽鏈、兩個β-肽鏈、四個亞鐵血紅素基團D.兩個α-肽鏈、兩個β-肽鏈、兩個亞鐵血紅素基團解析:選C。血紅蛋白又稱血色素,是紅細胞的主要組成成分。血紅蛋白由四條肽鏈組成,它包括兩個α-肽鏈、兩個β-肽鏈。其中每條肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅素基團,因此共有四個亞鐵血紅素基團。4.蛋白質(zhì)提取和別離分為哪幾步()A.樣品處理、凝膠色譜操作、SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳B.樣品處理、凝膠色譜操作、純化C.樣品處理、粗別離、純化、純度鑒定D.樣品處理、純化、粗別離、純度鑒定解析:選C。A中凝膠色譜操作及SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳為實驗操作過程中的技術(shù)。5.SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳中決定蛋白質(zhì)或多肽移動速度的主要因素是()A.蛋白質(zhì)分子所帶的電荷B.蛋白質(zhì)分子的形狀C.蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量D.緩沖溶液的pH解析:選C。在樣品和凝膠中參加復(fù)原劑和SDS后,分子被解聚成單條肽鏈,解聚后的氨基酸側(cè)鏈和SDS結(jié)合成蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物,SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量,這樣就消除了不同分子間的電荷差異和構(gòu)造差異,從而到達僅根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的不同來別離蛋白質(zhì)的目的。6.高溫滅菌和酒精滅菌分別利用蛋白質(zhì)的何種作用,作用結(jié)果是什么被破壞所致()A.變性、變性;空間構(gòu)造B.分解、變性;化學(xué)構(gòu)造C.變性、變性;平面構(gòu)造D.分解、分解;空間構(gòu)造解析:選A。蛋白質(zhì)的變性是個不可逆轉(zhuǎn)的過程,高溫(熱)和酒精(化學(xué)物質(zhì))都會使蛋白質(zhì)發(fā)生變性,破壞其空間構(gòu)造,起到滅菌的作用。7.(邵陽高二檢測)將攪拌好的混合液離心來別離血紅蛋白溶液時,第2層是()A.甲苯層 B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質(zhì)的沉淀層 D.其他雜質(zhì)的沉淀物解析:選C。血紅蛋白溶液經(jīng)過離心后,試管中的液體分為4層:第1層為無色透明的甲苯層;第2層為白色薄層固體,即脂溶性物質(zhì)的沉淀層;第3層為紅色透明的液體,即血紅蛋白的水溶液;第4層為其他雜質(zhì)的暗紅色沉淀物。8.在裝填色譜柱時,不得有氣泡存在的原因是()A.氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低別離效果B.氣泡阻礙蛋白質(zhì)的運動C.氣泡能與蛋白質(zhì)發(fā)生化學(xué)反響D.氣泡會在裝填凝膠的時候使凝膠不嚴密解析:選A。凝膠是一些微小的多孔球體,小球內(nèi)部有許多貫穿的通道,如果凝膠裝填得不夠嚴密、均勻,就會在色譜柱內(nèi)形成一些空隙,使本該進入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過,攪亂了洗脫液的流動次序,從而影響別離效果。9.蛋白質(zhì)的別離與純化是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)。以下有關(guān)表達不正確的選項是()A.根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜的特性,可將樣品中各種不同的蛋白質(zhì)別離B.根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小等,可通過電泳別離蛋白質(zhì)C.根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小,可通過凝膠色譜法別離蛋白質(zhì)D.根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,可通過離心沉降法別離蛋白質(zhì)解析:選A。蛋白質(zhì)分子是生物大分子,都不能通過半透膜,因此不能利用半透膜別離蛋白質(zhì);蛋白質(zhì)分子所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小可以使蛋白質(zhì)分子在電場中獲得不同的遷移速度,因此可以利用電泳法別離蛋白質(zhì);蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小不同,通過凝膠柱的時間不同,可通過凝膠色譜法別離蛋白質(zhì);蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同,具有不同的離心力,可通過離心沉降法別離蛋白質(zhì)。10.在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是()A.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì),需要酸進展中和C.防止血紅蛋白被氧氣氧化D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),以維持其構(gòu)造和功能解析:選D。在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵抗外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH根本不變,從而有利于血紅蛋白的別離。11.紅細胞含有大量血紅蛋白,紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2和CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進展實驗,來提取和別離血紅蛋白。請答復(fù)以下有關(guān)問題:(1)血紅蛋白的提取和別離一般可分為四步:________、粗別離、純化和________。(2)實驗前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先參加檸檬酸鈉,取血回來,馬上進展離心,收集血紅蛋白溶液。①參加檸檬酸鈉的目的是________________________________________________________________________。②以上所述的過程即是樣品處理,它包括紅細胞的洗滌、______________、______________。(3)收集的血紅蛋白溶液要進展粗別離,其方法是__________________________________________________________________________________________。(4)然后通過____________將樣品進一步純化,最后經(jīng)________進展純度鑒定。樣品純化的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)電泳利用了待別離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及________、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速率,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的別離。解析:此題主要考察血紅蛋白的提取和別離方法。蛋白質(zhì)的提取和別離一般可分為四步:樣品處理、粗別離、純化和純度鑒定。樣品處理包括紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放和別離血紅蛋白溶液;將得到的血紅蛋白溶液放入磷酸緩沖液中進展透析,除去小分子的雜質(zhì),即樣品的粗別離;通過凝膠色譜法進一步純化蛋白質(zhì);利用電泳法對其進展純度鑒定。答案:(1)樣品處理純度鑒定(2)①防止血液凝固②血紅蛋白的釋放別離血紅蛋白溶液(3)透析(4)凝膠色譜法SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去(5)分子本身的大小12.凝膠色譜技術(shù)是一種快速而又簡單的別離技術(shù),由于設(shè)備簡單、操作方便,不需要有機溶劑,對高分子物質(zhì)有很高的別離效果,目前已經(jīng)被生物化學(xué)、分子生物學(xué)、生物工程學(xué)、分子免疫學(xué)以及醫(yī)學(xué)等有關(guān)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,不但應(yīng)用于科學(xué)實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖答復(fù)以下問題:(1)a、b均為蛋白質(zhì)分子,其中先從層析柱中洗脫出來的是__________,原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)自己制作凝膠色譜柱時,在色譜柱底部d位置相當于多孔板的構(gòu)造可由__________________________替代。(3)裝填凝膠色譜柱時,色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,原因是_________

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