馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁課件

馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁1馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁課件2水培法與霧培法水培法與霧培法3馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁課件4馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁課件5一、馬鈴薯的脫毒與快繁（一）莖尖培養(yǎng)與脫毒1.莖尖培養(yǎng)脫毒程序（1）取材：芽長到15cm時(shí)，將頂端切下6-8cm，去掉下面2片葉，在切口處涂上生根生長調(diào)節(jié)劑后，把切條植入一口徑為10cm、內(nèi)裝消毒營養(yǎng)土的花盆中，后用玻璃燒杯罩上，保持10d。一、馬鈴薯的脫毒與快繁6馬鈴薯的脫毒試管苗馬鈴薯的脫毒試管苗7

再將其轉(zhuǎn)入生長箱中，每天光照16h，光照強(qiáng)度3000-4000lx。2周后去掉頂芽，以促進(jìn)腋芽的生長。當(dāng)腋芽長到1-2cm時(shí)，折下腋生枝，用于消毒、接種。

再將其轉(zhuǎn)入生長箱中，每天光照16h，光照強(qiáng)度3008（2）消毒：水洗干凈，無菌條件下先用70%的酒精浸組織15-20s，再用2%次氯酸鈉溶液浸泡4-5min，然后用無菌水沖洗3次。（2）消毒：9（3）接種：把芽置于解剖鏡下，左手用一把鑷子將芽按住，右手用解剖針將葉片和葉原基剝掉，當(dāng)形似一個(gè)閃亮半圓球的頂端分生組織充分暴露出來后，用鋒利的長頸刀片將分生組織切下來，上面可帶/也可不帶葉原基，再用刀片將其接種到培養(yǎng)基上。（3）接種：10（4）培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基（提高NH4+、K+濃度，利于莖尖成活）。加入調(diào)節(jié)物質(zhì)6-BA0.5mg/L，NAA0.1-1.0mg/L。培養(yǎng)條件：溫度25±2℃，光照16h/d當(dāng)新梢長至2-3cm時(shí)，轉(zhuǎn)至生根培養(yǎng)基（MS培養(yǎng)基中加入0.3mg/L的NAA）

（4）培養(yǎng)基：11（5）病毒鑒定（指示植物法）：馬鈴薯的病毒指示植物：莧科的千日紅、藜科的杖藜、茄科的洋酸漿、毛曼佗羅等。從被檢植株上取下葉片，置于等容積的緩沖液（0.1mol/L的磷酸鈉）中，研成勻漿。在指示植物的葉片上撒少許600號(hào)的金剛砂。

（5）病毒鑒定（指示植物法）：12然后將被檢植物的葉汁液涂于其上，并稍加摩擦，以使指示植物葉表面細(xì)胞受到侵染，但又不要損傷葉片。約5min后，用水輕輕洗去接種葉片上的殘余汁液。一周后如果表現(xiàn)病毒病癥狀，則說明被檢再生植物脫毒失敗。

然后將被檢植物的葉汁液涂于其上，并稍加摩擦，以使指示13馬鈴薯的脫毒培養(yǎng)快繁課件142、影響脫毒效果的因素（1）外植體大?。?.2-0.3mm，帶1-2個(gè)原基為好（2）莖尖所處部位：塊莖臍部休眠芽的生長點(diǎn)、塊莖頂部的粗壯芽、植株主莖的生長點(diǎn)（3）病毒種類及復(fù)合感染（脫毒更困難）PSTV（條紋病毒）、PVS（S病毒）、PVX（X病毒）、PVM（M病毒）、PAMV（叢矮病毒）、PVY（Y病毒）、PVA（A病毒）、PVRV（卷葉病毒）

2、影響脫毒效果的因素153、無毒材料的保存將無毒原種種在溫室或防蟲罩內(nèi)滅過菌的土壤里，以防蚜蟲傳毒或機(jī)械傳毒大規(guī)模繁殖時(shí)，種植在田間隔離區(qū)內(nèi)春播早留種和夏播留種經(jīng)過莖尖脫毒處理的無病毒植株，再通過離體培養(yǎng)進(jìn)行繁殖與保存3、無毒材料的保存16（二）微型薯生產(chǎn)技術(shù)1、試管生產(chǎn)（1）單莖節(jié)擴(kuò)大繁殖：由無性繁殖的試管苗中獲得莖切段（每個(gè)莖段帶1-2個(gè)葉片或腋芽），每個(gè)三角瓶里接4-5個(gè)莖段，進(jìn)行培養(yǎng)。（二）微型薯生產(chǎn)技術(shù)17（1）單莖節(jié)擴(kuò)大繁殖：培養(yǎng)條件：22℃，16h補(bǔ)充光照1000lx常用培養(yǎng)基：MS+3%蔗糖+瓊脂；MS+2%蔗糖；MS+CCC50mg/L+6-BA6.0mol/L+0.8%瓊脂，或MS+50-100mol/L香豆素；MS+3%蔗糖+4%甘露醇+0.8%瓊脂。當(dāng)小植株4-5cm時(shí)，進(jìn)行第二步培養(yǎng)。（1）單莖節(jié)擴(kuò)大繁殖：18（2）微型薯誘導(dǎo)：要求：有一定量的植物生長物質(zhì)，暗培養(yǎng)培養(yǎng)基：MS+50-100mg/L香豆素的液體或固體培養(yǎng)基（2）微型薯誘導(dǎo)：192、微型薯溫室多層架盤工廠化生產(chǎn)4-6層架進(jìn)行培養(yǎng)，育苗盤規(guī)格60cm×25cm×4-6cm，育苗基質(zhì)為蛭石或馬糞。三角瓶繁殖的脫毒苗以單莖節(jié)或雙莖節(jié)扦插，在人工調(diào)控的溫度、光照下，經(jīng)過60-90d即可收獲。2、微型薯溫室多層架盤工廠化生產(chǎn)20微型薯微型薯21直接定植試管苗和剪尖扦插法 直223、底畦栽植脫毒苗生產(chǎn)小薯或微型薯備畦：長方形，深33cm、寬1.2m，挖出的土堆放在距畦33cm處的東西兩邊和北端，鋪施30-50kg廄肥/m2，深翻20cm，翻勻耙平、澆足底水，以備來年春季栽苗。3、底畦栽植脫毒苗生產(chǎn)小薯或微型薯23土壤消毒及栽苗：播種前半月，畦內(nèi)噴800倍樂果滅蚜，封蓋塑料膜，播種時(shí)可揭膜移栽，南北向，行距40cm，株距10-15cm雙株，密度40-60株/m2。土壤消毒及栽苗：播種前半月，畦內(nèi)噴800倍樂果滅蚜，封蓋塑料24將地膜重新覆蓋或?qū)⒖淄练鈬?yán)，在畦上搭架，封蓋另一層塑料拱棚薄膜，栽后20d除去地膜培土，將架上的地膜換成45-50目的防蟲紗網(wǎng)，上面再蓋薄膜，氣溫升到10度左右，除去膜，留紗網(wǎng)到收獲。需水時(shí)從上面噴或自一端開口進(jìn)行溝灌。將地膜重新覆蓋或?qū)⒖淄练鈬?yán)，在畦上搭架，封蓋另一層塑料拱棚薄254、微型種薯的擴(kuò)大繁殖采用試管、溫室、底畦生產(chǎn)的微型薯原原種，可進(jìn)一步通過塑料大棚或大田在春秋兩季擴(kuò)大繁殖，以提供足夠大田使用的優(yōu)良種薯。4、微