中藥制劑的檢查2010

第三章

中藥制劑的檢查中藥制劑雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)檢查方法特殊雜質(zhì)檢查方法農(nóng)藥殘留量的檢查黃曲霉毒素的檢查第一節(jié)中藥制劑雜質(zhì)檢查一、雜質(zhì)的定義

一般是指無醫(yī)療作用且能影響制劑質(zhì)量的或?qū)θ梭w產(chǎn)生危害作用的物質(zhì)。

二、雜質(zhì)檢查的意義

為了確保中藥制劑的安全性，《中國藥典》2005年版對雜質(zhì)檢查做出重要修訂，收載了原子吸收分光光度法（AAS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICPMS）等先進(jìn)技術(shù)，對重金屬、砷鹽等有害物質(zhì)進(jìn)行檢測；增加了有機(jī)磷類農(nóng)藥、除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的檢查項目。二、雜質(zhì)來源中藥材原料中帶入生產(chǎn)制備過程中引入貯存過程中引起的中藥制劑自身理化性質(zhì)的改變?nèi)?、雜質(zhì)的分類中藥制劑的雜質(zhì)分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)兩類。

1.一般雜質(zhì)

指自然界中分布比較廣泛，普遍存在于藥材之中，易在中藥制劑的生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)。如泥沙（硅酸鹽）、重金屬、砷鹽、有機(jī)氯類農(nóng)藥、甲醇、酸、堿、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽等。它們的檢查方法均在《中國藥典》附錄中加以規(guī)定。2.特殊雜質(zhì)

指在制劑生產(chǎn)和貯存過程中，可能引入或產(chǎn)生的某種（類）特有雜質(zhì)，而非大多數(shù)制劑普遍存在的。這類雜質(zhì)被列入《中國藥典》中有關(guān)品種檢查項下。如，大黃流浸膏中的土大黃苷、阿膠中的揮發(fā)性堿性物質(zhì)和附子理中丸中的烏頭堿等。四、雜質(zhì)檢查的內(nèi)容1.質(zhì)量參數(shù)類型：

與質(zhì)量直接有關(guān)的專定檢查項目，如大黃中檢土大黃苷；川烏、草烏炮制后烏頭堿的限量；黃連素中檢棕櫚堿及藥根堿等；監(jiān)測偽品的摻入、藥物純度及安全性等。

------特殊雜質(zhì)檢查2.劑型的要求類型

不同劑型有不同的質(zhì)量要求，如固體制劑要求測水分；酊劑、酒劑要求測含醇量，總固體、相對密度、PH值等；片劑、膠囊要求測重量差異、崩解度，近代已發(fā)展要求測均勻度、溶出度，這是重量差異與崩解度的延伸。藥典附錄根據(jù)有關(guān)劑型分別要求檢查不同項目。

3.污染的控制類型

(1)異物污染可分為鈍性異物和有害異物兩類，前者如夾雜泥沙雜草、非藥用部位等；鈍性異物的存在主要是影響劑量的準(zhǔn)確及療效的顯現(xiàn)；有害異物的污染則可能造成嚴(yán)重質(zhì)量事故，如曾發(fā)現(xiàn)赤芍中雜有三分三，從而出現(xiàn)中毒事故。在檢查項下規(guī)定灰分，酸不溶性灰分及異性有機(jī)物等。

(2)昆蟲及微生物污染

自六十年代以來，國內(nèi)外對非滅菌藥物制劑(包括藥材與中成藥)的生物性污染都有一些考察，有些屬嚴(yán)重污染，據(jù)國外報道，在一份甘草中分離出黃曲霉菌的代謝產(chǎn)物黃曲霉毒素B1及B2；有些外用成藥中曾檢出破傷風(fēng)桿菌等。染螨與蟲霉情況，沖劑、蜜丸尤以糖漿染螨與發(fā)霉應(yīng)加強(qiáng)檢查，國內(nèi)中成藥衛(wèi)生學(xué)檢查已為常規(guī)要求。

(3)化學(xué)污染可能來自土壤、化肥、化學(xué)除草劑、農(nóng)藥、藥材熏蒸、殺蟲劑、水源等。中藥材污染有害金屬汞、鋁、鎘、鉻等國內(nèi)也有報道。有時因水質(zhì)欠佳，洗滌藥材后污染鉻、砷;用含砷量高的硫磺作熏蒸劑，使貝母、金銀花等含砷量高五、雜質(zhì)的限量檢查

在不影響療效和不產(chǎn)生毒副作用的前提下，允許制劑中的雜質(zhì)在一定限度范圍內(nèi)存在。因此，中國藥典規(guī)定的雜質(zhì)檢查均為限量檢查。六、雜質(zhì)限量

是指藥品中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾（%）或百萬分之幾（ppm）來表示。

雜質(zhì)限量公式：雜質(zhì)最大允許量樣品量雜質(zhì)限量％（ppm）=×100%（106)七、中藥制劑主要檢查的雜質(zhì)水分灰分重金屬砷鹽農(nóng)藥殘留黃曲霉毒素八、雜質(zhì)檢查方法（一）比較分析法（比色法）

即取一定量與被檢雜質(zhì)相同的純物質(zhì)或其他對照品配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液，與一定量供試品溶液，在相同實(shí)驗條件下，比較反應(yīng)結(jié)果（如顏色深淺），從而確定制劑中雜質(zhì)的含量是否超過規(guī)定的限度。重金屬、砷鹽、烏頭堿等雜質(zhì)檢查即采用該法。

由于樣品（S）中所含雜質(zhì)的含量是通過與雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較來確定的，雜質(zhì)的最大允許量也就是雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（V）與其濃度（C）的乘積，因此雜質(zhì)限量（L）可按下式計算：

阿膠砷鹽限量檢查

取本品2.0g，加氫氧化鈣1g，混合，加少量水，攪勻，干燥后先用小火熾灼使炭化，再在500～600℃熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸3ml與適量水使溶解成30mL，分取溶液10mL，加鹽酸4mL與水14mL,依法檢查（中國藥典2000版附錄ⅨF）。如果標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（1μgAs/ml）取用量為2ml，雜質(zhì)限量的計算如下：黃連上清丸中重金屬檢查

取本品5丸，切碎，過二號篩，取適量，稱定重量，照熾灼殘渣檢查法（中國藥典2000版附錄ⅨJ）熾灼至完全灰化，取殘留的殘渣，依法檢查（《中國藥典》2000版附錄ⅨE第二法），含重金屬不得過百萬分之二十五。如果標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（每1ml相當(dāng)于10μg的Pb）取用量為2ml，供試品取樣量為：S=V(mL)×C(g/mL)L=2×0.0000100.000025=0.8(g)（二）準(zhǔn)確測定法

采用重量法、儀器分析法等測定雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量，并與雜質(zhì)限量比較做出判斷。灰分（泥沙）、農(nóng)殘、鉛等有害元素、甲醇等雜質(zhì)的檢查均采用此法。（三）靈敏度測定法

該法不用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對比分析，而是在供試品溶液中加入檢測試劑，在一定條件下，觀察有無反應(yīng)發(fā)生，即以該反應(yīng)的靈敏度來控制雜質(zhì)限量。肉桂油中重金屬檢查取肉桂油10ml，加水10ml與鹽酸1滴，振搖后，通硫化氫氣使飽和，水層與油層均不得變色。

第二節(jié)一般雜質(zhì)檢查一、重金屬檢查（一）重金屬定義：在實(shí)驗條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)。

砷銅鉛汞

新加坡5150200.5

馬來西亞620100.5

香港1050

2005版藥典對西洋參、白芍、甘草、丹參、金銀花、黃芪等首次規(guī)定其含重金屬限量為：鉛(Pb)≤5.0mg/kg，鎘(Cd)≤0.3mg/kg，汞(Hg)≤0.2mg/kg，砷(As)

≤2.0mg/kg，銅(Cu)≤20.0mg/Kg。

（二）檢查意義

重金屬毒性較大，易積蓄，可導(dǎo)致機(jī)體嚴(yán)重中毒癥狀。為保證藥品的安全性，中國藥典加強(qiáng)了重金屬檢查力度，對某些中成藥尤其是含礦物類中藥的品種，規(guī)定了重金屬檢查項目。

中國藥典收載了四種重金屬檢查法，即第一法（硫代乙酰胺法）、第二法（熾灼法）、第三法（硫化鈉法）、第四法（微孔濾膜法）。第一法（硫代乙酰胺法）本法適用于供試品不需有機(jī)破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查。

1.測定原理硫代乙酰胺在弱酸條件下水解，產(chǎn)生硫化氫，可與供試品中重金屬離子生成有色的金屬硫化物的均勻混懸液，再與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色進(jìn)行對照比較，檢查藥品中重金屬是否超限。（三）檢查方法pH3.5CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SPb2++H2SPbS(棕黑)↓+2H+2.操作方法

取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml后，加水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml，制得對照品溶液。乙管中加入按各藥品項下規(guī)定的方法制成的供試品溶液25ml；再在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，比較兩管顏色深淺。3.主要注意事項（1）若供試品溶液有顏色，可用外消色法排除其干擾，即在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液，使之與乙管顏色一致。（2）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)在臨用前精密量取標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液稀釋配制，以防硝酸鉛水解而造成誤差，配制標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)使用不含鉛的玻璃儀器。4.結(jié)果判斷

乙管中顯出的顏色比甲管淺或接近，則重金屬限量檢查符合規(guī)定，若乙管中顯出的顏色比甲管深，則重金屬限量檢查不符合規(guī)定。圖甲管乙管甲管乙管第二法（熾灼法）

本法適用于供試品需有機(jī)破壞，在酸性溶液中顯色的重金屬限量檢查。大多數(shù)中成藥采用此法檢查重金屬。

1.測定原理：

供試品先經(jīng)高溫?zé)胱剖褂袡C(jī)物分解，重金屬被游離出來。再與硫代乙酰胺水解產(chǎn)生的硫化氫生成有色金屬硫化物的均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色進(jìn)行比較，從而判斷供試品中重金屬是否超限。2.操作方法（1）供試品溶液的制備

取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml，使恰好濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸氣除盡后，放冷，在500～600℃熾灼使完全灰化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，微熱溶解后，移置納氏比色管（乙管）中，加水稀釋成25ml，即得。

（2）對照品溶液的制備

取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管（甲管）中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，再用水稀釋成25ml，即得。

（3）檢查法

在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置白紙上，自上向下透視，乙管中顯出顏色與甲管比較，不得更深。3.注意事項（1）熾灼樣品還可采用熾灼殘渣檢查法（附錄ⅨJ）規(guī)定的方法。（2）灼燒樣品時，溫度必須控制在500～600℃。加入硫酸和硝酸可促使有機(jī)物完全分解,且加熱使二者揮盡，否則影響測定。（3）制備對照品溶液時，取配制供試品溶液的試劑，是指等量吸取配制供試品溶液時所用的硫酸、硝酸、鹽酸和氨試液等試劑。目的在于消除這些試劑可能夾帶的重金屬對測定的干擾。（4）其他注意事項見第一法（硫代乙酰胺法）4.結(jié)果判斷

乙管中顯出的顏色比甲管淺或接近，則重金屬限量檢查符合規(guī)定，若乙管中顯出的顏色比甲管深，則重金屬限量檢查不符合規(guī)定。第三法（硫化鈉法）

本法適用于能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）的藥品中的重金屬限量檢查。

1.測定原理：

在堿性條件下，某些重金屬的溶解度增大，滴加硫化鈉試液，可與重金屬離子生成有色硫化物的均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色進(jìn)行對比，檢查供試品中重金屬是否超限。

Pb2++Na2S→PbS↓+2Na+2.操作方法

取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中，加硫化鈉試液5滴，搖勻，與一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同樣處理后的顏色比較，不得更深。3.結(jié)果判斷乙管中顯出的顏色比甲管淺或接近，則重金屬限量檢查符合規(guī)定，若乙管中顯出的顏色比甲管深，則重金屬限量檢查不符合規(guī)定第四法（微孔濾膜法）本法適用于溶液顏色較深或重金屬限量較低的品種。1.測定原理：用微孔濾膜過濾，使重金屬硫化物沉淀富集成色斑，通過供試品斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的色澤比較，檢查供試品中重金屬是否超限。

2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的制備

精密量取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，置小燒杯中，用水或各藥品項下規(guī)定的溶劑稀釋成10ml，加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與硫代乙酰胺試液1.0ml，搖勻，放置10分種，用50ml注射器轉(zhuǎn)移至微孔濾膜裝置（濾器)中進(jìn)行壓濾(濾速約為每分鐘1ml)，濾畢，取下濾膜，放在濾紙上干燥，即得。A為濾器上蓋部分，入口處應(yīng)能與50ml注射器緊密連接；B為連接頭；C主墊圈（外徑10mm，內(nèi)徑6mm）；D為濾膜，直徑10mm，孔徑3.0μm，用前經(jīng)在水中浸泡24小時以上；E為尼龍墊網(wǎng)（孔徑不限），直徑10mm；F為濾器下部，出口處套上一合適橡皮管。（2）檢查法

取按各藥品項下規(guī)定方法制成的供試品溶液10ml，加入醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml與硫代乙酰胺試液1.0ml，搖勻，放置10分種，用50ml注射器轉(zhuǎn)移至濾器中進(jìn)行壓濾(濾速約為每分鐘1ml)，濾畢，取下濾膜，放在濾紙上干燥。將生成的供試品斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)鉛斑比較，不得更深。3.注意事項

（1）若供試溶液有顏色或渾濁，應(yīng)用濾膜進(jìn)行預(yù)濾，如濾膜上有污染，即換濾膜再濾，直至濾膜不再染色；然后取濾液10ml，按規(guī)定加入的醋酸鹽緩沖液和硫代乙酰胺試液反應(yīng)顯色，移至濾器中進(jìn)行壓濾，制成供試品斑點(diǎn)。（2）壓濾時，應(yīng)讓注射器內(nèi)管自然下降，產(chǎn)生的壓力比較均勻，使過濾速度達(dá)到每分鐘1ml左右；對于較黏稠的樣品溶液，可施加一均勻壓力使達(dá)到該速度，以保證色斑色調(diào)的均勻性。濾過時如濾器中存在氣泡則會影響色斑質(zhì)量，故在安裝輔助濾板、濾膜和墊圈時應(yīng)以水排除氣泡。4.結(jié)果判斷供試品斑點(diǎn)顏色比標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的顏色淺或接近，則重金屬檢查符合規(guī)定；供試品生斑點(diǎn)顏色比標(biāo)準(zhǔn)鉛斑的顏色深，則重金屬檢查不符合規(guī)定。（四）應(yīng)用實(shí)例

1.冰片中重金屬檢查

冰片大多為人工合成品，故又稱合成龍腦。在制備過程中可能引入重金屬，因此中國藥典規(guī)定采用第一法對其重金屬進(jìn)行檢查。

2.地奧心血康中重金屬檢查地奧心血康的原料藥為薯蕷科植物黃山藥、穿山龍薯蕷的根莖提取物，為淺黃色或淺棕黃色粉末。生產(chǎn)中可能引入重金屬，中國藥典規(guī)定采用第二法檢查重金屬。二、砷鹽檢查法（ArsenicTest）

（一）定義

砷鹽檢查法系指用于藥品中微量砷鹽（以As計算）的限量檢查方法。

（二）意義

中藥中殘存的三價砷鹽毒性極強(qiáng)，可引起嚴(yán)重的中毒癥，危害生命安全。故《中國藥典》對某些中藥制劑規(guī)定了砷鹽限量檢查項目，以保證用藥安全。如阿膠中砷鹽含量不得過3ppm，黃連上清丸中砷鹽含量不得過2ppm。（三）操作方法《中國藥典》收載了兩種砷鹽檢查法，即第一法（古蔡氏法）、第二法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法）?！鴺?biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備

稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20%氫氧化鈉溶液5ml溶解后，用適量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。臨用前，精密量取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀釋至刻度，搖勻，即得（每1ml相當(dāng)于1μg的As）。*第一法（古蔡氏法）

1.測定原理：本法系采用鋅和酸作用所產(chǎn)生的初生態(tài)氫與供試品中微量砷鹽（AsO33-）反應(yīng)生成揮發(fā)性砷化氫（AsH3），再與溴化汞試紙（HgBr2）作用生成黃色至棕色砷斑。比較供試品與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同一條件下所顯的砷斑的顏色深淺，從而檢查藥品中砷鹽是否超限。

AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2OAsH3+2HgBr2→2HBr

+AsH（HgBr）2（黃色）AsH3+3HgBr2→3HBr

+As（HgBr）3（棕色）2.古蔡氏法測砷裝置A.錐形瓶B.磨口塞（中有一孔）C.導(dǎo)氣管（裝入醋酸鉛棉花60mg）D.有機(jī)玻璃旋塞E.有機(jī)玻璃HgBr2試紙醋酸鉛棉60mg(裝管高度6-8cm)樣品標(biāo)準(zhǔn)砷溶液還原反應(yīng)(25-40℃)AsH3↑

砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷溶液樣品醋酸鉛棉花

溴化汞試紙

H2S↑

3.測定方法（1）供試品砷斑的制備

①樣品的有機(jī)破壞中成藥一般需先行有機(jī)破壞再測砷。破壞方法有堿破壞法、酸破壞法及直接炭化法等，以氫氧化鈣堿破壞法較為常用。取一定量的供試品，加入等量的無砷氫氧化鈣混勻后，加水濕潤，烘干，在小火上小心熾灼（注意不使內(nèi)容物濺出）至煙霧除盡，移入高溫爐中在500～600℃熾灼至灰化。同時作空白，留做標(biāo)準(zhǔn)砷斑用。②供試品砷斑的制備

將有機(jī)破壞所得灰分（殘渣）放冷，移入A瓶，按各品種項下規(guī)定，加入一定量鹽酸和水溶解，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，另鋅粒2g，立即將導(dǎo)氣管C密塞于A瓶上，并將A瓶置25～40℃水浴中，反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，即得。

（2）標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備

將上述空白灰分用鹽酸溶液(5ml鹽酸+21ml水)溶解并移入A瓶中，再精密加入標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，照供試品砷斑的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作，即得。4.結(jié)果判斷供試品砷斑顏色比標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色淺或接近，則砷鹽限量檢查符合規(guī)定；若供試品砷斑顏色比標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏色深，則砷鹽限量檢查不符合規(guī)定。5.主要注意事項（1）砷斑易退色，故供試品砷斑和標(biāo)準(zhǔn)砷斑應(yīng)平行制備，并迅速比色。（2）鋅粒大小影響反應(yīng)速度，其直徑以2mm左右（過一號篩）為宜。（3）氯化亞錫與碘化鉀的存在，可促使砷化氫生成反應(yīng)定量完成。（4）醋酸鉛棉花主要是吸收除去H2S等干擾性雜質(zhì)。應(yīng)按規(guī)定填充且不易填充得太緊。H2S+Pb（CH3COO）2PbS+2CH3COOH（5）溴化汞試紙宜用質(zhì)量較好、組織疏松的中速定量濾紙新鮮制備。

第二法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法Ag-DDC法）

本法可避免目測誤差，靈敏度高，顯色穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。1.測定原理利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與藥品中的微量亞砷酸鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，用Ag-DDC試液吸收，使Ag-DDC還原生成紅色膠態(tài)銀，與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的紅色膠態(tài)銀在510nm處測吸收度，進(jìn)行比較，以判定砷鹽的含量是否限量。反應(yīng)式

※既可做限量檢查，又可做含量測定。2.Ag-DDC法測砷裝置目視檢測分光光度計,λ=510Ag-DDC5ml3.測定方法

（1）標(biāo)準(zhǔn)砷對照液的制備：精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液5ml，置A瓶中，加鹽酸5ml與水21ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，在室溫放置10分鐘后，加鋅粒2g，立即將導(dǎo)氣管C與A瓶密塞，使生成的砷化氫氣體導(dǎo)入已精密加入5mlAg-DDC試液的D管中，并將A瓶置25～40℃水浴中反應(yīng)45分鐘，取出D管，添加氯仿至刻度，混勻，即得。（2）檢查法：取照各藥品項下規(guī)定方法制成的供試液，置A瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)砷對照液的制備，自“再加碘化鉀試液5ml”起，依法操作。將所得溶液與標(biāo)準(zhǔn)砷對照液同置白色背景上，從D管上方向下觀察、比較，所得溶液的顏色不得比標(biāo)準(zhǔn)砷對照液更深。必要時，可將所得溶液轉(zhuǎn)移至1cm吸收池中，用適宜的分光光度計或比色計在510nm波長處以Ag-DDC試液作空白，測定吸收度，與標(biāo)準(zhǔn)砷對照液按同法測得的吸收度比較，不得更大。4.注意事項（1）反應(yīng)的溫度和時間本法在25～40℃水浴中反應(yīng)45分鐘為宜。在此溫度下，有部分氯仿?lián)]發(fā)損失，故在比色前應(yīng)添加氯仿至5.00ml，搖勻后再進(jìn)行比色測定。二乙基二硫代氨基甲酸銀試液在配制后兩周內(nèi)穩(wěn)定，因該試液呈淺黃綠色，應(yīng)考慮背景補(bǔ)償，測吸收度時要用此試液作空白。（2）醋酸鉛棉花取脫脂棉，浸入醋酸鉛試液與水的等溶混合液中，濕透后，擠壓除去過多的溶液，并使疏松，在100℃以下溫度干燥后，置玻璃塞瓶中，在干燥處保存。5.應(yīng)用實(shí)例（1）黃連上清丸中的砷鹽檢查本品含有礦物藥石膏，故中國藥典規(guī)定用第一法（古蔡氏法）檢查砷鹽。（2）阿膠中砷鹽的檢查本品生產(chǎn)中使用明礬作沉淀劑，可能會引入重金屬，故中國藥典規(guī)定用第一法（古蔡法）或第二法（二乙基二硫代氨基甲酸銀法）檢查砷鹽。三、干燥失重

藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的重量，包括水分及其他揮發(fā)性成分。檢查方法常壓恒溫干燥（烘干法）受熱較穩(wěn)定的中藥制劑（一般105-110℃，2-4h）恒重：連續(xù)2次干燥后的重量差異不超過0.3mg干燥劑干燥受熱易分解或揮發(fā)的供試品硅膠，五氧化二磷，硫酸等干燥劑減壓干燥熔點(diǎn)低、受熱不穩(wěn)定及較難趕除水分的供試品（一般60-80℃）有關(guān)說明及注意事項通常取樣量約1g，顆?？刂圃?mm以下，平鋪在扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松無知不超過10mm供試品放入烘箱應(yīng)將瓶蓋取下，置稱量瓶旁，或瓶蓋半開進(jìn)行干燥，取出時應(yīng)將瓶蓋蓋好，置干燥器內(nèi)放冷至室溫再稱量干燥至恒重的第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行用減壓干燥器壓力應(yīng)控制在20mmHg以下，但不可過低，以免出現(xiàn)意外常用干燥劑為無水氯化鈣、變色硅膠或五氧化二磷，其中恒溫減壓干燥器中常用五氧化二磷。干燥劑應(yīng)保持有效狀態(tài)四、水分測定法（MoistureTest）

（一）定義

固體制劑中含水量的測定。

（二）意義

固體制劑中含水量的多少，對其理化性質(zhì)、穩(wěn)定性以及醫(yī)療作用等均有影響，是控制制劑質(zhì)量的一項重要指標(biāo)。

《中國藥典》收載了四種水分測定法，即第一法（烘干法）、第二法（甲苯法）、第三法（減壓干燥法）和第四法（氣相色譜法）。（三）測定方法

預(yù)處理測定時，一般先將制劑供試品破碎成直徑不超過3mm的顆?；蛩槠?。減壓干燥法測定時，需將供試品過二號篩。第一法（烘干法）本法適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品，例如板藍(lán)根顆粒、地奧心血康膠囊、二至丸等。

1.測定原理

供試品在100℃~105℃下連續(xù)干燥，揮盡其中的水分，根據(jù)減失的重量，即可計算出供試品中的含水量（%）。

2.操作方法

取供試品2~5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100℃~105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度下干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量。3.注意事項

干燥至恒重是指連續(xù)兩次干燥后的重量差異在0.3mg以下。4.計算

水分含量（%）=(m1-.m2)/ms×100%ml

為測試前供試品和稱量瓶重量，gm2

為干燥后供試品和稱量瓶重量，gms

為供試品重量，g5.結(jié)果判斷將計算結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)的含水量限度比較，若低于或等于限度則符合規(guī)定，若高于限度則不符合規(guī)定。

6.應(yīng)用實(shí)例板藍(lán)根顆粒(無糖型)的水分測定本品為不含揮發(fā)性成分的制劑,故選用第一法(烘干法)測定其水分含量。第二法（甲苯法）

本法適用于蜜丸類（大蜜丸、小蜜丸）制劑和含揮發(fā)性成分的藥品，例二陳丸、六味地黃丸等。本法消除了揮發(fā)性成分的干擾，準(zhǔn)確度較高。但樣品的消耗量大，且用過的樣品不能回收利用，不適合貴重藥材的水分測定。

1.測定原理

將供試品與甲苯（相對密度0.866）混合蒸餾，水分、揮發(fā)性成分可隨同甲苯一同餾出。水與甲苯不相混溶，收集于水分測定管下層，而揮發(fā)性成分溶于甲苯，并與其一同收集于水分測定管上層，水與揮發(fā)性成分完全分離。因為水的相對密度為1.000，故可直接測出（讀取）供試品水的重量（g），并計算出制劑中的含水量（%）。甲苯法裝置2.操作方法3.注意事項4.計算

水分含量（%）=mw/ms

100%mwB管中水的重量，gms供試品重量，g5.結(jié)果判斷甲苯法裝置第三法（減壓干燥法）

本法適用于含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。例如，麝香保心丸、靈寶護(hù)心丹等。且樣品消耗量少，用過的樣品可以回收再利用。

1.測定原理

在室溫減壓條件下，供試品所含水分被新鮮五氧化二磷（P2O5）干燥劑吸收，根據(jù)減失的重量，計算含水量（%）。

2.操作方法

取供試品2～4g，混合均勻，分取約0.5～1g，置已在供試品同樣條件下干燥并稱重的稱量瓶中，精密稱定(m1)，求出供試品重量(ms),打開瓶蓋，放入上述減壓干燥器中，減壓至2.67kPa(20mmHg)以下持續(xù)半小時，室溫放置24小時。在減壓干燥器出口連接新鮮無水氯化鈣干燥管，打開活塞，待內(nèi)外壓一致，關(guān)閉活塞，打開干燥器，蓋上瓶蓋，取出稱量瓶迅速精密稱定重量（m2），計算供試品中的含水量（%）。

減壓干燥器取直徑12cm左右的培養(yǎng)血，加入新鮮五氧化二磷干燥劑適量，使鋪成0.5～1cm的厚度，放入直徑30cm的減壓干燥器中。第四法（氣相色譜法）

本法簡便，快速、靈敏、準(zhǔn)確，且不受樣品中其它組分的干擾，不受環(huán)境濕度的影響。被廣泛用于各類中藥制劑水分的測定。

1.測試原理

首先利用氣相色譜高分辨性能，將樣品中的水分與其他組分完全分離，再以純化水作為對照品，采用外標(biāo)法分別測量純化水和供試品中水的峰面積（峰高），計算出樣品中的含水量。2.操作方法

（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗

用二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為載體,柱溫為140~150℃,熱導(dǎo)檢測器檢測。注入無水乙醇測定，應(yīng)符合下列要求：

①用水峰計算的理論板數(shù)應(yīng)大于1000；用乙醇峰計算的理論板數(shù)應(yīng)大于150。

②水和乙醇兩峰的分離度應(yīng)大于2。

③將無水乙醇進(jìn)樣5次，水峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不得大于5.0%。

（2）對照溶液的制備取純化水(外標(biāo)物)約0.2g,精密稱定,置25ml量瓶中,加無水乙醇（稀釋溶劑）至刻度,搖勻,即得.

（3）供試品溶液的制備取供試品適量(含水量約0.2g),剪碎或研細(xì),精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入無水乙醇（提取溶劑）50ml,混勻,超聲處理20分鐘,放置12小時,再超聲處理20分鐘,待澄清后傾取上清液,即得。

（4）測定法取無水乙醇、對照溶液及供試品溶液各1~5μl注入氣相色譜儀，計算，即得。3.注意事項無水乙醇含水量約0.3%，對照溶液與供試品溶液的配制需用同一批號的無水乙醇,其中的含水量應(yīng)扣除（圖4-2）。含水量的計算采用外標(biāo)法。但無水乙醇作為溶劑，其含水量扣除方法如下：對照溶液中實(shí)際加入水的峰面積

=標(biāo)準(zhǔn)溶液中總水峰面積－K×對照溶液中乙醇峰面積供試品中水的峰面積

=供試品溶液中總水峰面積－K×供試品溶液中乙醇峰面積

K=無水乙醇中水峰面積/無水乙醇中乙醇峰面積圖4-2水峰中應(yīng)扣除的含水量（陰影部分）A.無水乙醇色譜圖B.標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖C.供試品溶液色譜圖1.水峰2.乙醇峰

4.記錄與計算1）記錄供試品稱定重量和純化水稱定重量。2）分別記錄無水乙醇、對照溶液、供試品溶液中的水和乙醇的峰面積。3）根據(jù)注意事項下的規(guī)定，分別計算對照溶液中實(shí)際加入的水的峰面積和供試品中水的峰面積。4）供試品中水分含量按下式計算

含水量（%）=

×100%

式中Cr為對照品（純化水）的濃度（g/ml）

Ax為供試品中水的峰面積

Ar為對照品（純化水）的峰面積

Vr為對照品的溶液體積（50.0ml）

W為供試品的重量(g)5.結(jié)果判斷

應(yīng)用實(shí)例麝香保心丸含水量測定精密稱定本品細(xì)粉2.505g,照上述操作方法中供試液制備項下，自“置具塞錐形瓶中”起,依法制備供試品溶液。取無水乙醇,對照溶液及供試品溶液,各1μl注入氣相色譜儀，繪制相關(guān)的色譜圖。已知Ax／Ar＝0.4889,Cr=0.0082g/ml.求算供試品水分含量(%)并判斷其是否符合規(guī)定(≤9.0%)。將已知數(shù)值代入含水量計算公式計算,即得。含水量(%)=×100%=8.0%五、熾灼殘渣檢查法(硫酸灰分,EP)

700℃－800℃+硫酸※取樣量由熾灼殘渣限量決定,一般1~2g※緩慢灼燒※將殘渣留作重金屬檢查時,500℃－600℃有機(jī)物→炭化，分解非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)→硫酸鹽六、灰分檢查法（AshTest）

（一）意義

灰分檢查主要是控制藥材和中藥制劑中泥沙等雜質(zhì)的含量，對于保證藥品品質(zhì)和潔凈度有著重要意義。1.總灰分

樣品經(jīng)高溫?zé)胱疲茐姆纸夂?，剩下的非揮發(fā)性灰燼。較純凈的藥材或制劑，其總灰分主要為生理灰分即藥品本身所含的各種鹽類（例如夏枯草中的鉀鹽，大黃、甘草、紅花中的草酸鈣等，故生理灰分不屬于雜質(zhì)。），以及少量允許存在的外來無機(jī)雜質(zhì)（泥沙等）。在生理灰分相對穩(wěn)定的前提下，藥品具有一定的總灰分含量限度。如果總灰分含量超限，則說明藥品含有過多的泥沙（主含硅酸鹽）等外來雜質(zhì)。

（二）灰分檢查包括總灰分檢查和酸不溶性灰分檢查。2.酸不溶性灰分

系指總灰分加鹽酸處理后，得到的不溶于鹽酸的灰分。由于草酸鈣等生理灰分可溶于稀鹽酸，而泥沙（主要為硅酸鹽）等外來無機(jī)雜質(zhì)難溶于稀鹽酸，因此，對于那些生理灰分含量差異較大，特別是在組織中含草酸鈣較多的中藥（例如大黃），酸不溶性灰分能更準(zhǔn)確反映其中泥砂等雜質(zhì)的摻雜程度。（三）總灰分測定法1.測定原理：

供試品在500～600℃高溫?zé)胱疲蛊渲杏袡C(jī)物全部氧化分解成二氧化碳、水等逸出，而無機(jī)成分生成灰分殘渣，根據(jù)殘渣重量，即可計算出供試品中的總灰分的含量。2.操作方法

供試品粉碎，過二號篩，混合均勻，取供試品2～5g（如需測定酸不溶性灰分，可取供試品3～5g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g）緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量（%）。3.注意事項①測定前，坩堝應(yīng)洗凈，干燥至恒重（連續(xù)兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下）。供試品熾灼后也要至恒重。②取供試品2~3g（3~5g），可用托盤天平（感量0.1g）；稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g），應(yīng)使用分析天平（感量0.001g）。③移動坩堝應(yīng)使用坩堝鉗，不得徒手操作；稱量操作應(yīng)準(zhǔn)確無誤，否則影響測定結(jié)果。④對馬福爐的使用要嚴(yán)格按操作規(guī)程操作。⑤如供試品不易灰化，可將坩堝放冷，加熱水或10%硝酸銨溶液2ml，使殘渣濕潤，然后置水浴上蒸干，殘渣照前法熾灼，至坩堝內(nèi)容物完全灰化。⑥熾灼操作時，實(shí)驗人員不得離去，并注意防止供試品燃燒或引起其它事故。4.計算總灰分含量（%）=M1/M×100%M為熾灼前供試品的重量，gM1

為熾灼后供試品的重量，g5.結(jié)果判斷將計算結(jié)果與藥品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，低于或等于限度的，總灰分符合規(guī)定；高于限度的，則不符合規(guī)定。（四）酸不溶性灰分測定法1.測定原理

供試品在500～600℃高溫?zé)胱?，使其中有機(jī)物完全氧化分解逸出，往殘留灰分中加入稀鹽酸，溶解其中的草酸鈣等生理灰分，濾去酸水，得到難溶性殘渣（酸不溶性灰分），根據(jù)殘渣重量，即可計算出供試品中酸不