潔凈區(qū)(室)沉降菌測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

干凈區(qū)〔室〕沉降菌測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程干凈區(qū)〔室〕沉降菌測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程14頁干凈區(qū)〔室〕沉降菌測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程起草人起草日期頒發(fā)人發(fā)放部門審核人審核日期生效日期藥檢室批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期修訂日期文件編號(hào)文件名稱一、目的：建立一個(gè)干凈區(qū)文件編號(hào)文件名稱二、范圍：干凈室和干凈區(qū)，無菌室或局部空氣凈化區(qū)域〔包括干凈工作臺(tái)〕的沉降菌的測(cè)試和環(huán)境的驗(yàn)證。三、責(zé)任：藥檢員、藥檢室負(fù)責(zé)人?；钗⑸飻?shù)，并以此來評(píng)定干凈室〔區(qū)〕的干凈度。儀器儀器包括：a〕培育皿；b〕培育基：大豆酪蛋白瓊脂培育基；c〕恒溫培育箱；d〕高壓蒸汽滅菌器。培育皿一般承受φ90mm×15mm規(guī)格的培育皿。培育基按培育基要求加水，加熱溶化后，分裝，滅菌，冷卻至約60℃，在無菌操作要求下傾注約20mL至無菌平皿〔φ90mml))中。加蓋后在室溫放至凝固。制備好的培育基平皿宜在2℃~8℃保存，一般以一周為宜或按廠商供給的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。恒溫培育箱必需定期對(duì)恒溫培育箱進(jìn)展校驗(yàn)。測(cè)試步驟測(cè)試前培育基外表必需嚴(yán)格消毒。將已制備好的培育皿按采樣點(diǎn)布置圖逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)翻開培育皿蓋，使培育基外表暴露在空氣中。靜態(tài)測(cè)試時(shí)，培育皿暴露時(shí)間為30min以上；動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，培育皿暴露時(shí)間為不大于4h。全部采樣完畢后，將培育皿倒置于恒溫培育箱中培育。承受大豆酪蛋白瓊脂培育基〔TSA〕配制的培育皿經(jīng)采樣后，在30℃~35℃培育箱中培育，時(shí)間2d。每批培育基應(yīng)有比照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培育根本身是否污染。可每批選定3只培育皿作比照培育。菌落計(jì)數(shù)用肉眼對(duì)培育皿上全部的菌落直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5~10倍放大鏡檢查，有否遺漏。2222個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。留意事項(xiàng)測(cè)試用具要作滅菌處理，以確保測(cè)試的牢靠性、正確性。實(shí)行一切措施防止人為對(duì)樣本的污染。對(duì)培育基、培育條件及其他參數(shù)作具體的記錄。由于細(xì)菌種類繁多，差異甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培育皿反面或正面認(rèn)真觀看，不要漏計(jì)培育皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須留意細(xì)菌菌落與培育基沉淀物的區(qū)分，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。采樣前應(yīng)認(rèn)真檢查每個(gè)培育皿的質(zhì)量，如覺察變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。測(cè)試時(shí)間在空態(tài)或靜態(tài)測(cè)試時(shí)，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)整系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開頭，或在生20min自凈后開頭。在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須記錄生產(chǎn)開頭的時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。沉降菌菌落數(shù)計(jì)算采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置mm2干凈度級(jí)別注：對(duì)于100級(jí)的單向流干凈室〔區(qū)，包括100級(jí)干凈工作臺(tái)benc，面積指的是送風(fēng)口外表積；對(duì)于10000級(jí)以上的非單向流干凈室〔區(qū)，面積指的是房間面積。10010000100000300000<102~3222≥10~<204222≥20~<408222≥40~<10016422≥100~<200401033≥200~<400802066≥400~<1000160401313≥1000~<20234001003232≥20238002006363采樣點(diǎn)的位置〕工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地0.8m~1.5m左右〔略高于工作面b〕可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。c〕2兩點(diǎn)承受左右擺布，三點(diǎn)承受左中右擺布。采樣次數(shù)每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。采樣留意事項(xiàng)對(duì)于單向流干凈室〔區(qū)〕或送風(fēng)口，采樣器采樣口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流干凈室〔區(qū)，采樣口向上。布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動(dòng)。應(yīng)實(shí)行一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。培育皿在用于檢測(cè)時(shí)，為避開培育皿運(yùn)輸或搬動(dòng)過程造成的影響，宜同時(shí)進(jìn)展比照試驗(yàn)，每次或每個(gè)區(qū)域取1箱內(nèi)培育，結(jié)果應(yīng)無菌落生長(zhǎng)。記錄測(cè)試報(bào)告應(yīng)包含以下內(nèi)容：a〕測(cè)試者的名稱和地址，測(cè)試日期；b〕測(cè)試依據(jù)；c〕被測(cè)干凈室〔區(qū)〕的名稱；d〕測(cè)試結(jié)果；包括全部統(tǒng)計(jì)計(jì)算資料。結(jié)果計(jì)算用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培育皿的菌落數(shù)。每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)的計(jì)算，公式為：=M1+M2……M〕/式中：M—平均菌落數(shù)；M1—1號(hào)培育皿菌落數(shù)；M2—2號(hào)培育皿菌落數(shù)；Mn—n號(hào)培育菌落數(shù)；n—培育皿總數(shù)。結(jié)果評(píng)定每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)必需低于所選定評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)中的界限。在靜態(tài)測(cè)試時(shí)，假設(shè)某測(cè)點(diǎn)的沉降菌平均菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則應(yīng)重采樣兩次，兩次測(cè)試結(jié)果均合格才能判為符合。干凈室〔區(qū)〕沉降菌技術(shù)要求干凈度級(jí)別干凈度級(jí)別沉降菌/皿，0.5h100≤110000