超微貽貝殼粉對(duì)l-乳酸鈣大鼠生長(zhǎng)的影響

超微貽貝殼粉對(duì)l-乳酸鈣大鼠生長(zhǎng)的影響

鈣是人體骨骼組織的主要組成部分。鈣不僅影響兒童的正常發(fā)育，而且影響著老年人及骨骼松弛、骨質(zhì)增生、結(jié)腸癌和高血壓等疾病。目前,市場(chǎng)上銷售的主要以碳酸鈣的補(bǔ)充劑為主,且多以畜骨及蛋殼為原料,由于近年陸生動(dòng)物生長(zhǎng)環(huán)境的惡化(如瘋牛病、禽流感等)以及飼料安全性和殘留問題,故人們把選取優(yōu)質(zhì)鈣源的目光轉(zhuǎn)向了海洋。貽貝(mussel)又名殼菜,其加工過程中產(chǎn)生的大量貽貝殼,通常被廢棄,造成了環(huán)境污染和資源浪費(fèi)。貽貝殼中含有大量的鈣質(zhì),主要成分為碳酸鈣(占95%以上)。此外,還含有Zn,Mg,P,Si,Fe,K等人體必需的微量元素。本課題組首次對(duì)貽貝殼采用氣流粉碎工藝,發(fā)現(xiàn)經(jīng)超微粉碎后的貽貝殼粉具有良好的分散性、吸附性、溶解性和化學(xué)活性,易被動(dòng)物吸收和利用,可被開發(fā)成為理想的補(bǔ)鈣劑。1材料和方法1.1實(shí)驗(yàn)材料1.1.1厚殼貽貝產(chǎn)4.貽貝由浙江省嵊泗貽貝無公害養(yǎng)殖基地提供,由本校生物系趙盛龍教授鑒定為厚殼貽貝MytiluscoruscusGould。取殼,洗凈烘干后進(jìn)行粗粉碎及細(xì)粉碎,然后用氣流粉碎機(jī)粉碎(其中ф2μm占80%以上),常溫下保存?zhèn)溆谩?.1.2低鈣飼料的準(zhǔn)備由玉米32%,小麥30%,豆粕15%,植物蛋白粉20%,鹽10%和色拉油20%配制而成。1.1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出生21d斷乳大鼠,♀♂各半,由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物生產(chǎn)合格證號(hào):SCXK(浙)2003-0001。1.1.4elisa法檢測(cè)鈣、磷試劑盒由美國Beckmen公司提供;堿性磷酸酶測(cè)定(Elisa法)試劑盒購自美國MetraBiosystemsInc.公司;其他試劑均為國產(chǎn)分析純。1.1.5l-16c型、dl-5型速質(zhì)機(jī)AO型臺(tái)式微型氣流粉碎機(jī);AnkeTGL-16C型離心機(jī);DL-5型低速大容量離心機(jī);日立7020型全自動(dòng)生化分析儀;SpectraAA220系列原子吸收儀。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1采用貝殼粉礦礦質(zhì)分析參照GB7887-1987原子吸收儀測(cè)定。1.2.2實(shí)驗(yàn)飼料及鈣的用量和用量斷乳SD大鼠,50只,體重60g左右,適應(yīng)性喂養(yǎng)4d,然后喂10d的基礎(chǔ)低鈣飼料作為空耗期。空耗期后,按體重隨機(jī)將大鼠分成5組,每組10只,♀♂各半。Ⅰ組(對(duì)照組):飼喂基礎(chǔ)低鈣飼料(含鈣量為1.5mg·g-1);Ⅱ組:基礎(chǔ)低鈣飼料+低劑量市售L-乳酸鈣(含鈣量11mg·g-1);Ⅲ組:基礎(chǔ)低鈣飼料+高劑量市售L-乳酸鈣(含鈣量23.6mg·g-1);Ⅳ組:基礎(chǔ)低鈣飼料+低劑量貽貝殼粉(含鈣量11.1mg·g-1);Ⅴ組:基礎(chǔ)低鈣飼料+高劑量貽貝殼粉(含鈣量23.4mg·g-1)。大鼠單籠喂養(yǎng),自由進(jìn)食和飲用去離子水,實(shí)驗(yàn)期4w,于實(shí)驗(yàn)最后3d進(jìn)行代謝實(shí)驗(yàn),測(cè)定飼料鈣、糞鈣,計(jì)算鈣的吸收率。實(shí)驗(yàn)結(jié)束處死大鼠,收集血清,測(cè)定鈣、磷含量,同時(shí)快速分離各組織器官,測(cè)定其鈣含量。1.3觀察指標(biāo)和方法1.3.1鈣的含量分布體重、身長(zhǎng),糞鈣,血清鈣、血清磷、堿性磷酸酶活性及紅細(xì)胞中鈣含量,骨骼、骨骼肌、心臟、腎、肝組織中鈣含量。攝入總鈣量=總飼料量×飼料含鈣量鈣吸收率(%)=(攝入總鈣量-糞鈣)/攝入總鈣量×1001.3.2大鼠的終身長(zhǎng)度和體重測(cè)試用游標(biāo)卡尺測(cè)大鼠終身長(zhǎng);用動(dòng)物天平稱大鼠終體重。1.3.3鈣含量測(cè)定用原子吸收法測(cè)飼料、大鼠糞鈣、血及組織器官中的鈣含量。1.3.4血清生化指數(shù)的檢測(cè)按試劑盒說明操作,用全自動(dòng)生化分析儀分別測(cè)定血清鈣、磷含量及堿性磷酸酶活性。1.4統(tǒng)計(jì)處理結(jié)果以均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±s)表示,采用SPSS10.0國際通用軟件包,對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1鐵、鋅等多礦質(zhì)元素從表1可以看出,超微粉碎的貽貝殼粉體中,鈣含量約占35.00%,另外還含有豐富的鐵、鋅等多種礦質(zhì)元素,多數(shù)為生物體生長(zhǎng)發(fā)育所必需;而砷、汞、鉻等有害元素含量遠(yuǎn)低于國家標(biāo)準(zhǔn),食用較安全。2.2實(shí)驗(yàn)中的大鼠生長(zhǎng)表2結(jié)果顯示,補(bǔ)鈣組大鼠的終身長(zhǎng)和體重顯著高于對(duì)照組,超微貽貝殼粉組大鼠生長(zhǎng)狀況良好,與市售L-乳酸鈣組基本相當(dāng)。2.3貝殼粉對(duì)大鼠鈣吸收的影響從表3可以看出,補(bǔ)鈣組的鈣吸收率均極顯著高于對(duì)照組,超微貽貝殼粉具有良好的鈣吸收率,與市售L-乳酸鈣相仿。2.4對(duì)大鼠血清堿性磷酸酶活性的影響檢測(cè)結(jié)果如表4所示,補(bǔ)鈣組大鼠的血清含鈣量、含磷量均極顯著高于對(duì)照組,貽貝殼粉組與L-乳酸鈣組比較,差異不明顯。通常,血清堿性磷酸酶的活性正常值在100U/L以內(nèi),從表4可以看出,補(bǔ)鈣組大鼠的堿性磷酸酶活性都維持在正常水平,且極顯著低于對(duì)照組;而貽貝殼粉組與L-乳酸鈣組無顯著區(qū)別。說明超微貽貝殼粉可以明顯、高效地增加血清鈣,并能使堿性磷酸酶活性保持在一個(gè)正常水平。2.5貝殼粉對(duì)大鼠心肌和骨葬肌骨骼中鈣含量的影響從表5中可見,補(bǔ)鈣組大鼠的心肌鈣和骨骼肌鈣均極顯著高于對(duì)照組,貽貝殼粉組的鈣含量與L-乳酸鈣組相比較,差異不顯著。2.6不同成分胞中鈣含量的比較由表6可知,補(bǔ)鈣組大鼠的肝、腎組織及骨骼、血細(xì)胞中的鈣含量極顯著高于對(duì)照組,貽貝殼粉補(bǔ)鈣組中肝、腎組織骨骼及血細(xì)胞中鈣含量與L-乳酸鈣組比較,差異不明顯。3不同超微粉碎的貽貝殼粉本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,超微貽貝殼粉組的作用效果與L-乳酸鈣組基本相仿,各項(xiàng)指標(biāo)均極顯著優(yōu)于基礎(chǔ)低鈣飼料組,說明超微貽貝殼粉是一種良好的鈣補(bǔ)充劑。本研究所用超微粉碎的貽貝殼粉鈣含量較高,經(jīng)超微粉碎后其粒徑在2μm左右,比表面積達(dá)到了3m2/cm3,孔隙率變大,大大提高了其溶解性、吸收率和生物利用率;作為鈣源的貽貝殼原料來源于無公害海水養(yǎng)殖基地,重