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分解纖維素的微生物的分離1本節(jié)課標(biāo):1.簡述纖維素酶的種類及作用。2.學(xué)習(xí)從土壤中分離出分解纖維素的微生物的方法。3.談?wù)撨@類微生物的應(yīng)用價值。2纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì),是天然有機(jī)高分子化合物:自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物是棉花,含量達(dá)92%~95%,亞麻達(dá)80%,此外木材、作物秸稈也富含纖維素。許多商品纖維素都是由天然纖維素制得:如水溶性的羧甲基纖維素鈉(CMC---Na);不溶于水的微晶纖維素等食品添加劑。①纖維素含量一、基礎(chǔ)知識1、纖維素34纖維素:
葡萄糖②基本單位③簡式(C6H10O5)n④應(yīng)用纖維素可用于紡織工業(yè),可造紙5⑤思考:纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì),植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸,但卻不會在地球上大量的積累,為什么?40~60%能被土壤中的某些微生物分解利用,這是因為它們能夠產(chǎn)生纖維素酶2、纖維素酶水解纖維素生成纖維二糖和葡萄糖的一類酶的總稱①定義②組分6纖維素酶不是單一酶,是復(fù)合酶,包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶。C1酶:(外切酶)從糖鏈的末端開始切掉兩個葡萄糖分子,產(chǎn)生纖維二糖。葡萄糖苷酶:將纖維二糖分解為葡萄糖CX酶:(內(nèi)切酶)作用于糖鏈的內(nèi)部使之?dāng)嗔殉商擎溒巍?A、人能不能對纖維素消化吸收?為什么?答:不能,因為人體不能合成纖維素酶。人以淀粉為主要的能量來源。③思考:B、食物中的纖維素有什么作用?答:食物中的膳食纖維可刺激胃腸蠕動和分泌消化液,有助于食物的消化和排泄。8C、反芻動物能利用纖維素嗎?為什么?答:能,在反芻動物的瘤胃中生活著大量可以分解纖維素的微生物,能產(chǎn)生大量的纖維素酶9方法:濾紙崩潰法3、纖維素酶活性的測定實驗:1011A、①②③④⑤B、②③⑤C、②③④⑤D、③⑤C下列生物能分解纖維素的是()①人②兔③牛④蘑菇⑤纖維桿菌12二、纖維素分解菌的篩選2、篩選原理:1、篩選方法:剛果紅染色法剛果紅(CR)是一種染料,它可以與象纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)3、篩選過程:13通過產(chǎn)生的透明圈來篩選纖維素分解菌加入剛果紅紅色復(fù)合物紅色復(fù)合物無法形成出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈纖維素被分解纖維素14154、纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基①纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基16答:液體培養(yǎng)基,因培養(yǎng)基中無凝固劑,利用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)以增加纖維素分解菌的濃度B、培養(yǎng)基具有選擇作用的原因答:能夠產(chǎn)生纖維素酶的微生物才能分解纖維素作為碳源和能源,并大量繁殖;不能分解纖維素的微生物由于缺乏碳源受到抑制而不能正常生長繁殖,因此培養(yǎng)基具有選擇作用A、物理性質(zhì)上看選擇培養(yǎng)基的類型及原因思考:17C、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用?答:用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與其對照D、為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?答:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速的繁殖。而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到濃縮的作用。18②纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基19三、實驗設(shè)計1、實驗流程20①分布環(huán)境(1)土壤取樣:富含纖維素的環(huán)境中2、操作步
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