免疫室定量項(xiàng)目方法性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)操作程序

免疫室定量項(xiàng)目方法性能驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的對(duì)免疫室檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行性能驗(yàn)證，以保證所采用的相關(guān)試劑盒的分析性能能滿足臨床檢測(cè)的要求和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。范圍適應(yīng)于免疫室開(kāi)展的所有檢測(cè)項(xiàng)目。操作程序驗(yàn)證前準(zhǔn)備儀器設(shè)備的準(zhǔn)備：根據(jù)免疫室儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)程序,驗(yàn)證前，實(shí)驗(yàn)人員或請(qǐng)儀器廠家工程師對(duì)驗(yàn)證過(guò)程中需要用到的儀器設(shè)備進(jìn)行全面的維護(hù)保養(yǎng)，以確保所涉及的儀器設(shè)備在最佳運(yùn)行狀態(tài)。試劑的準(zhǔn)備試劑盒的準(zhǔn)備：驗(yàn)證前，確保足夠用于驗(yàn)證的同批號(hào)試劑盒，如可能，可以再適當(dāng)準(zhǔn)備一些另一批號(hào)的試劑。室內(nèi)質(zhì)控品的準(zhǔn)備：按照《免疫室定量項(xiàng)目室內(nèi)質(zhì)控管理程序》規(guī)定的室內(nèi)質(zhì)控品購(gòu)買和制備方法進(jìn)行準(zhǔn)備。免疫室定量項(xiàng)目的驗(yàn)證方法擬驗(yàn)證參數(shù)的確定根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)或行業(yè)內(nèi)（如CLIA′88）要求制定擬驗(yàn)證的性能參數(shù)。免疫室定量項(xiàng)目需要驗(yàn)證的參數(shù)包括：精密度（批內(nèi)、批間精密度）、正確度、線性范圍、臨床可報(bào)告范圍、生物參考區(qū)間、干擾、不同方法和儀器間的比對(duì)等。要求檢測(cè)過(guò)程中采取質(zhì)量控制措施，盡可能保證檢測(cè)系統(tǒng)處于一個(gè)穩(wěn)定狀態(tài)。批內(nèi)精密度實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來(lái)源：濃度分別處于正常和病理水平的混合的新鮮臨床標(biāo)本。步驟：按照臨床標(biāo)本相同的檢測(cè)方法，同批次內(nèi)檢測(cè)相同的20份混合的新鮮臨床標(biāo)本。記錄結(jié)果并計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和批內(nèi)變異系數(shù)CV（%）：表1：批內(nèi)精密度檢測(cè)結(jié)果記錄項(xiàng)目：檢測(cè)序號(hào)檢測(cè)結(jié)果檢測(cè)序號(hào)檢測(cè)結(jié)果1112123134145156167178189191020均值：標(biāo)準(zhǔn)差：批內(nèi)變異系數(shù)CV（%）驗(yàn)證結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)的批內(nèi)變異系數(shù)CV(%)≤1/4CLIA’88允許總誤差或生物學(xué)變異批間精密度實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來(lái)源：濃度分別處于正常和病理水平的室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本。步驟：按照臨床標(biāo)本相同的檢測(cè)方法，將室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本連續(xù)檢測(cè)20天。記錄結(jié)果，計(jì)算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和批間精密度CV（%）：表2：批間精密度檢測(cè)結(jié)果記錄表項(xiàng)目：批次檢測(cè)結(jié)果批次檢測(cè)結(jié)果1112123134145156167178189191020均值：標(biāo)準(zhǔn)差：批間變異系數(shù)CV（%）：驗(yàn)證結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)的批內(nèi)變異系數(shù)CV(%)≤1/3CLIA’88或生物學(xué)變異允許總誤差正確度驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)免疫室對(duì)參加衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評(píng)涵蓋的項(xiàng)目進(jìn)行正確度驗(yàn)證，以衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評(píng)結(jié)果為依據(jù)，成績(jī)?cè)?0%以上者即為驗(yàn)證通過(guò)。對(duì)未參加衛(wèi)生部臨檢中心室間質(zhì)評(píng)涵蓋的項(xiàng)目進(jìn)行正確度驗(yàn)證時(shí)，與其他實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對(duì)(比對(duì)實(shí)驗(yàn)室參加過(guò)該檢測(cè)項(xiàng)目的室間質(zhì)評(píng)，成績(jī)滿意)，驗(yàn)證符合率。線性范圍驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來(lái)源：采用本實(shí)驗(yàn)室或其他實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)標(biāo)本獲得的高值及低值標(biāo)本進(jìn)行。不同濃度樣本制備：取高值和低值樣本各一份，按如下配比:標(biāo)本1：低濃度樣本；標(biāo)本2：三份低濃度樣本與一份高濃樣標(biāo)本混勻；標(biāo)本3：二份低濃度樣本與二份高濃樣標(biāo)本混勻；標(biāo)本4：一份低濃度樣本與三份高濃樣標(biāo)本混勻；標(biāo)本5：高濃度樣本。檢測(cè)時(shí),按標(biāo)本1,2,3,4,5,5,4,3,2,1排列，每個(gè)標(biāo)本測(cè)量2次,記錄濃度。以理論濃度為縱坐標(biāo)（Y），實(shí)測(cè)濃度為橫坐標(biāo)(X)。由統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算出r2和回歸方程式Y(jié)=aX+b。表3：線性驗(yàn)證結(jié)果記錄表項(xiàng)目：標(biāo)本編號(hào)第一次檢測(cè)結(jié)果第二次檢測(cè)結(jié)果平均結(jié)果理論結(jié)果12345回歸方程：ar2驗(yàn)證結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)r2≥0.95,a在0.97-1.03范圍內(nèi)，則判斷為線性范圍驗(yàn)證通過(guò)。生物參考區(qū)間驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)選擇年齡、性別等均勻分布,符合建立生物參考區(qū)間的健康體檢者血清標(biāo)本20份，對(duì)不同項(xiàng)目的參考范圍進(jìn)行驗(yàn)證。表4：生物參考區(qū)間結(jié)果記錄表項(xiàng)目：標(biāo)本號(hào)檢測(cè)結(jié)果標(biāo)本號(hào)檢測(cè)結(jié)果1112123134145156167178189191020驗(yàn)證結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)小于或等于1份標(biāo)本結(jié)果超出生物參考區(qū)間,即為驗(yàn)證通過(guò)。臨床可報(bào)告范圍驗(yàn)證：本室臨床可報(bào)告范圍定義為：實(shí)驗(yàn)室能夠給臨床發(fā)出報(bào)告的最大檢測(cè)范圍。通常是在線性范圍高值的基礎(chǔ)上外延至最大稀釋度倍數(shù)對(duì)應(yīng)的值。標(biāo)本來(lái)源：含本項(xiàng)目濃度接近線性范圍上限的臨床新鮮標(biāo)本。驗(yàn)證方案：進(jìn)行最大稀釋度實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，以生理鹽水或蒸餾水為稀釋介質(zhì)，每個(gè)稀釋濃度檢測(cè)兩次取平均值與理論值進(jìn)行比較。表5：臨床可報(bào)告范圍記錄表項(xiàng)目：稀釋比例（原液：生理鹽水或蒸餾水）預(yù)期值檢測(cè)值1檢測(cè)值2檢測(cè)值均值判斷指標(biāo)：RR=檢測(cè)均值/預(yù)期值*100%判斷標(biāo)準(zhǔn)：80%<R<120%結(jié)論參考文獻(xiàn)1.葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜，主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第三版，南京:東南大學(xué)出版社,2006.2.王治國(guó)主編.臨