柔毛淫羊藿對(duì)去卵巢小鼠骨密度及生物力學(xué)指標(biāo)的影響

柔毛淫羊藿對(duì)去卵巢小鼠骨密度及生物力學(xué)指標(biāo)的影響【摘要】目的觀(guān)察柔毛淫羊藿對(duì)去卵巢小鼠骨密度及生物力學(xué)指標(biāo)的影響。方法切除雌性小鼠雙側(cè)卵巢制備骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型，隨機(jī)分為模型組、己烯雌酚組及柔毛淫羊藿高、中、低劑量組，另設(shè)對(duì)照組。各組給予相應(yīng)藥物，60天后測(cè)定小鼠全身及脊柱骨密度、骨最大載荷及骨撓度。結(jié)果與模型組比較，柔毛淫羊藿高、中、低劑量組動(dòng)物的全身及脊柱骨密度明顯升高；柔毛淫羊藿高、中、低劑量組動(dòng)物的骨最大載荷和骨撓度明顯升高。結(jié)論柔毛淫羊藿能明顯改善去卵巢小鼠的骨質(zhì)疏松癥狀。

【關(guān)鍵詞】柔毛淫羊藿去卵巢小鼠骨質(zhì)疏松骨密度骨最大載荷骨撓度

【Abstract】Objective:ToinvestigatetheeffectsofEpimediumpubescensMaximonbonemineraldensity(BMD)andbonebiomechanicalpropertiesinovariectomizedmice.Methods:Madetheosteoporticmodelbycuttingofftwosideofovary,thefemalemicewererandomlydividedintomodelgroup,diethylstilbestrolgroupandhigh,middle,lowdoseofEpimediumpubescensMaximgroups,setupthecontrolgroupinaddition.Themiceweregivencorrespondingmedicine,60dayslater,tomeasureBMDofgeneralandvertebralcolumn，maximumloadandflexibilityofbone.Results:Comparetomodelgroup,BMDofgeneralandvertebralcolumn，maximumloadandflexibilityofboneriseobviouslyinanimalofhigh,middle,lowdoseofEpimediumpubescensMaximgroups.Conclusion:EpimediumpubescensMaximcanimproveobviouslythesymptomofosteoporticmice.

【Keywords】EpimediumpubescensMaximOvariectomizedMiceOsteoporticBMDMaximumloadofboneFlexibilityofbone

淫羊藿具有溫腎壯陽(yáng)、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕的功效,其復(fù)方制劑被廣泛用于骨質(zhì)疏松癥的治療。四川、貴州地處我國(guó)西南部，是我國(guó)淫羊藿藥材的主產(chǎn)區(qū)。然而淫羊藿品種繁多，不管是《神農(nóng)本草經(jīng)》所載的淫羊藿，或是中醫(yī)臨床應(yīng)用的淫羊藿，還是藥效報(bào)道的淫羊藿均為數(shù)種淫羊藿屬植物的統(tǒng)稱(chēng)，尚未見(jiàn)有具體某一淫羊藿藥材的藥理作用研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)骨質(zhì)疏松小鼠模型觀(guān)察了柔毛淫羊藿對(duì)其骨密度以及骨生物力學(xué)的影響，以期對(duì)柔毛淫羊藿的藥用價(jià)值進(jìn)行評(píng)估，為其進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)利用提供參考。

1材料和方法

實(shí)驗(yàn)材料柔毛淫羊藿：棕褐色浸膏干粉，1克相當(dāng)于克生藥，實(shí)驗(yàn)時(shí)蒸餾水配制成所需濃度的混懸液；己烯雌酚：合肥久聯(lián)制藥有限公司，批號(hào)：20060518；昆明種雌性小鼠，體重18－22g，由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK(黔)2002-0001；骨密度儀：美國(guó)通用電氣有限公司；骨撓度檢測(cè)儀：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院設(shè)備科。

實(shí)驗(yàn)方法

模型制作將小鼠予戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，俯位固定，無(wú)菌操作，背部脊柱兩側(cè)作切口，分別找到左右側(cè)輸卵管，摘除其末端的卵巢，保留子宮。其中14只小鼠作假手術(shù)組，只切除卵巢旁等體積大脂肪組織?？p合切口前給予青霉素預(yù)防感染，術(shù)后小鼠回籠飼養(yǎng)，自由飲食。

分組及用藥術(shù)后次日，除假手術(shù)組外其余小鼠隨機(jī)分為5組：模型組、己烯雌酚組、柔毛淫羊藿高劑量組、柔毛淫羊藿中劑量組、柔毛淫羊藿低劑量組。加上假手術(shù)組共6組動(dòng)物。小鼠均灌胃給藥，每天1次，連續(xù)60天。每周根據(jù)小鼠體重調(diào)整2次藥量。

觀(guān)測(cè)指標(biāo)

骨密度測(cè)定末次給藥后1h，小鼠以戊巴比妥鈉ig麻醉，用骨密度儀測(cè)小鼠骨密度。

骨生物力學(xué)測(cè)定骨密度測(cè)定完成后，處死小鼠，分別取左股骨，置于骨質(zhì)撓度測(cè)試儀上對(duì)其施壓，以股骨斷裂時(shí)所承受的最大載荷和最大撓度為判斷其機(jī)械強(qiáng)度的指標(biāo)。

數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，各組間兩兩比較采用LSD法。

2結(jié)果

柔毛淫羊藿對(duì)骨質(zhì)疏松小鼠骨密度的影響與假手術(shù)組比較，模型組動(dòng)物的脊柱骨密度和全身骨密度明顯降低；與模型組比較，柔高、中、低組動(dòng)物脊柱骨密度明顯升高；與模型組比較，柔高、中、低組動(dòng)物的全身骨密度明顯升高。

與假手術(shù)組比較△，△△；與模型組比較*，**，下同。

柔毛淫羊藿對(duì)骨質(zhì)疏松小鼠骨生物力學(xué)的影響與假手術(shù)組比較，模型組動(dòng)物的骨最大載荷和骨撓度明顯降低；與模型組比較，柔高、中、低組動(dòng)物的骨最大載荷明顯升高；與模型組比較，柔高、中、低組動(dòng)物的骨撓度明顯升高。

3討論

摘除卵巢的動(dòng)物是目前公認(rèn)的模仿人類(lèi)骨質(zhì)疏松癥的模型，Wronski等研究發(fā)現(xiàn)，成年動(dòng)物卵巢切除后，由于雌激素缺乏使骨改建呈高轉(zhuǎn)換型，骨吸收和骨形成均增高，但骨吸收大于骨形成，骨形成相對(duì)減少，骨改建呈負(fù)平衡。動(dòng)物卵巢切除后引致的骨丟失與人類(lèi)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥有相似之處。本文選用小鼠作模型復(fù)制對(duì)象，去卵巢后小鼠模型組骨密度測(cè)量值顯著下降，與假手術(shù)組比較具有顯著意義，表明骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型復(fù)制成功。

骨密度是骨礦代謝中量化骨量的重要指標(biāo)，是研究骨質(zhì)疏松和評(píng)價(jià)藥效的重要檢測(cè)手段。本實(shí)驗(yàn)中，柔毛淫羊藿給藥60天，可見(jiàn)動(dòng)物骨密度均明顯升高。此作用可能系柔毛淫羊藿抑制了破骨細(xì)胞的骨吸收，降低了去卵巢動(dòng)物的高骨轉(zhuǎn)換率，防止骨量的快速丟失，增加骨量而使骨密度增加。

骨最大載荷和骨撓度是反映骨結(jié)構(gòu)力學(xué)的指標(biāo)。去卵巢動(dòng)物因骨結(jié)構(gòu)發(fā)生異常變化，導(dǎo)致骨結(jié)構(gòu)力學(xué)的強(qiáng)度下降。本實(shí)驗(yàn)中，柔毛淫羊藿給藥60天，可見(jiàn)動(dòng)物的骨最大載荷和骨撓度均升高。表明柔毛淫羊藿能增強(qiáng)動(dòng)物的骨韌性，降低脆性，改善了去卵巢動(dòng)物的骨結(jié)構(gòu)力學(xué)強(qiáng)度。

有學(xué)者認(rèn)為