小鼠心梗模型制備及其心功能檢測(cè)

小鼠心梗模型的制備及其心功能檢測(cè)動(dòng)物擁有生存，享有生命，免受痛苦權(quán)利動(dòng)物權(quán)利醫(yī)學(xué)研究中試驗(yàn)動(dòng)物的倫理原則

—“3R”原則降低（Reduction）替代（Replacement）優(yōu)化（Refinement）

降低動(dòng)物試驗(yàn)中的應(yīng)激原因建造自然舒適的環(huán)境有規(guī)避的安全場(chǎng)合（設(shè)置黑洞）試驗(yàn)中的動(dòng)物愛惜清潔與玩耍熟悉動(dòng)物的生物學(xué)特征、進(jìn)行正確的試驗(yàn)操作，降低動(dòng)物痛苦正確的抓取與固定，讓動(dòng)物舒適、有安全感簡(jiǎn)介在心血管疾病研究中，心肌梗死動(dòng)物模型的建立對(duì)于研究冠心病、心力衰竭等疾病的病理生理變化、心電生理變化、評(píng)價(jià)多種治療措施以及預(yù)防冠心病的發(fā)生發(fā)展具有重大價(jià)值。今日，與大家一起討論小鼠心肌梗死模型的制備及其心功能的檢測(cè)。

對(duì)動(dòng)物模型的要求怎樣建立具有穩(wěn)定性高，反復(fù)性好的心肌梗死模型對(duì)于心肌梗死的基礎(chǔ)研究有著主要的應(yīng)用價(jià)值。

大動(dòng)物：其解剖構(gòu)造、心臟血管分布和心臟/體重比等方面與人的心臟很相同。試驗(yàn)周期長(zhǎng)、成本高、操作難度大。小動(dòng)物：繁殖快易喂養(yǎng)、試驗(yàn)周期短，成本低小鼠生命力相對(duì)弱，手術(shù)耐受性差，術(shù)后評(píng)估效果相對(duì)難。選擇小鼠作為心梗模型能夠大大降低成本，縮短試驗(yàn)周期，有利于試驗(yàn)的反復(fù)性和數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性，對(duì)于研究人類心肌梗死的發(fā)生，發(fā)展及轉(zhuǎn)歸具有主要價(jià)值。心梗模型制備一、器械準(zhǔn)備1.麻醉機(jī)2.呼吸儀3.顯微鏡4.保溫墊5.潔凈手術(shù)臺(tái)6.顯微手術(shù)器械二、小鼠準(zhǔn)備小鼠年齡：﹥6w體重：﹥18g三、術(shù)前準(zhǔn)備器械消毒動(dòng)物麻醉

異氟醚

當(dāng)小鼠對(duì)痛覺沒有反應(yīng)時(shí)，可將潤(rùn)滑劑涂抹在小鼠的雙眼上以免干燥，脫去頸部、胸部的體毛。手術(shù)環(huán)節(jié)用75%酒精或溫水清洗掉體毛，然后用75%酒精消毒手術(shù)視野。將小鼠固定在暖墊上，然后用粘膠固定四肢。用粗線牽拉上齒固定。切開頸部皮膚，分離皮下組織和肌肉，露出氣管。牽拉舌頭，利用PEtubing(20號(hào))進(jìn)行氣管插管，插好后連接好呼吸機(jī)。

麻醉機(jī)調(diào)整Isofluran：2

氧流量：2呼吸機(jī)調(diào)整呼吸頻率(RespiratoryRate)：30to350μl

輸出量(strokevolume)：0-130ul開胸沿著胸骨左緣自下而上切開皮膚約1.5cm，剪開或者分立胸大肌，暴露第四肋間，切開肋間約1.0cm,用微型拉鉤（retractor）分離肋骨，暴露心臟。用彎鉗提起心包膜，用有齒鑷子輕輕的撕裂開心包膜，暴露出心臟，找到左心耳，擬定前降支。結(jié)扎用8.0線結(jié)扎左前降支后，退出分離器，用6號(hào)線縫合肌肉層，4號(hào)線縫合皮膚。停止麻醉，脫離呼吸機(jī)，一旦確信小鼠有自主呼吸，就能夠拔管。隨即可皮下注射無菌生理鹽水0.5ml。將小鼠放置在暖水袋上保持約1小時(shí)后放回動(dòng)物房。驗(yàn)證成果：最直接的是心電圖1)Staining:Evan’sBluedyeandTTCafterMIorI/R.2)Calculatetheareaatrisk.JitkaA.I.

Viragetal.JJournalofVisualizedExperiments20231-5Crosssection:Evansbluedye(Blue),TTCstainingofmetabolicallyviabletissue(red).Necrotic

areas

donotstain(pale)

A.K.M.TarikuzZamanetal.JExpBiolMed(Maywood)2023234:246超聲心動(dòng)圖PV-Loop心梗模型的心功能檢測(cè)超聲心動(dòng)圖是應(yīng)用超聲波回聲探查心臟和大血管以獲取有關(guān)信息的一組無創(chuàng)性檢驗(yàn)措施。涉及M型超聲、二維超聲、彩色多普勒血流顯像等。LV

performance:CO,ml/m:cardiacoutputEF,%:ejectionfraction

HR,bpm:heartrateFS,%:fractionalshortening

SV,ul:strokevolumeLVAW,mm:leftventricularanteriorwallVolume,systole,ulLVPW,mm:leftventricularposterwallVolume,distole,ulLVID,mm:leftventricularinteriordiameterPapillarymuscleasthemarkerMarker:Papillary,Aorticartery,Leftatrium例子血液動(dòng)力學(xué)檢測(cè)（P-VLoop）壓力-容積環(huán)技術(shù):提供隨心室隨時(shí)間而變化的壓力容積輸出的模擬信號(hào).在穩(wěn)定的時(shí)期血液動(dòng)力學(xué)和壓力容積環(huán)會(huì)被統(tǒng)計(jì)下來.它能更明確的檢測(cè)出左室功能，不依賴左室的負(fù)荷狀態(tài).P-VLoop