電位滴定法測定藥品含量能力驗證計劃的實施

電位滴定法測定藥品含量能力驗證計劃的實施

區(qū)位滴注法是測定藥物含量的首選方法之一。這是一種基于電極在定罪過程中改變電極電位的電氣分析。影響電位滴定法檢測結(jié)果的因素很多,如電極的選擇、滴定液的標(biāo)定、實驗溫度的控制等。為評價各實驗室采用電位滴定法的技術(shù)水平和能力,促進各實驗室提高檢測技術(shù)和加強管理,根據(jù)中國合格評定國家認可委員會(ChinaNationalAccreditationServiceforConformityAssessment,CNAS)2008年度能力驗證計劃工作的安排,由本所負責(zé)實施了電位滴定法測定藥品含量能力驗證計劃(編號T0382)。參加該計劃的實驗室共有75家,均報告了檢測結(jié)果,現(xiàn)將結(jié)果進行統(tǒng)計處理,對可疑或不滿意的檢測結(jié)果進行技術(shù)分析,尋找原因,采取措施,以保證日常檢驗結(jié)果的準確、可靠。1號表1:號根據(jù)參加實驗室提供的信息,匯總了各實驗室所用的儀器的品牌、型號以及電極型號,見表1。本次能力驗證計劃的樣品由本所制備和發(fā)放,采用“分割水平”設(shè)計,A樣是未添加輔料的酮康唑(1)原料,B樣是添加約5%(w/w)輔料的1原料,樣品在發(fā)放前已進行了均勻性和穩(wěn)定性檢驗,均符合能力驗證樣品的要求。2方法和結(jié)果2.1實驗室檢測結(jié)果的描述照中國藥典2005年版二部“中1含量測定項下方法測定。本次能力驗證計劃采用穩(wěn)健(Robust)統(tǒng)計技術(shù)處理檢測結(jié)果,分別計算實驗室間Z比分數(shù)(ZB)和實驗室內(nèi)Z比分數(shù)(ZW),以Z比分數(shù)衡量一個實驗室的檢測結(jié)果在一組結(jié)果中的相對離散程度。若∣Z∣≤2,結(jié)果滿意;若2<∣Z∣<3,結(jié)果可疑;若∣Z∣≥3,為不滿意結(jié)果或離群值。2.2統(tǒng)計結(jié)果參加本次能力驗證計劃的實驗室共75家,其中有5家的結(jié)果可疑,7家的結(jié)果為不滿意,各占總數(shù)的6.7%和9.3%。2.3實驗室能力評估能力驗證計劃的結(jié)果通常還使用Z比分數(shù)序列圖表示,該圖不但能幫助組織者解釋結(jié)果,對于參加者也非常有用,特別對那些帶有離群值的參加者,能夠看到所提交的結(jié)果與其他實驗室結(jié)果的差異,從而對實驗室能力進行評估。2.4實驗室的系統(tǒng)偏差Youden雙樣品圖能顯著地表示出實驗室的系統(tǒng)偏差。該圖對結(jié)果的雙變量分析有約95%置信概率橢圓的特性,并用虛線來標(biāo)明每個樣品的中位值。3技術(shù)分析和技術(shù)建議根據(jù)各參加實驗室反饋的信息,從總體上對離群數(shù)據(jù)進行有限的技術(shù)分析。3.1液體限制的影響推薦的1含量測定方法是非水電位滴定法。該法所用的高氯酸滴定液(0.1mol/L)對實驗結(jié)果有重要影響。3.1.1高氯酸滴定液的制備高氯酸滴定液的標(biāo)定結(jié)果直接影響1含量測定結(jié)果的準確性。從原始記錄上看,大部分實驗室所用的高氯酸滴定液(0.1mol/L)均按照中國藥典附錄方法制備,并詳細說明了制備和標(biāo)化的過程。但有些實驗室只提供了高氯酸滴定液(0.1mol/L)的校正因子,來源、制備及標(biāo)化過程不明。3.1.2mol/l的濃度校正因子滴定液的濃度直接關(guān)系到消耗的滴定液體積。高氯酸滴定液(0.1mol/L)的濃度校正因子應(yīng)在0.95～1.05之間。有些實驗室沒有嚴格按照這個要求執(zhí)行,甚至有實驗室使用的滴定液濃度校正因子低于0.9或高于1.2,很可能會對滴定結(jié)果產(chǎn)生較大的誤差。3.1.3高氯酸滴定液的標(biāo)定高氯酸滴定液濃度受溫度變化影響較大。中國藥典2005年版二部附錄規(guī)定,若滴定供試品和標(biāo)定高氯酸滴定液時的溫差超過10℃,則應(yīng)重新標(biāo)定。若未超過10℃,可按公式校正。有些實驗室未注意這些溫度差別,可能會導(dǎo)致不滿意結(jié)果。3.2測量電位及免疫電極的選擇電位滴定法是依靠電位儀測得電極電位的急劇變化來指示滴定終點的,所以試驗中采用的電位儀及所附的電極對結(jié)果有著決定性的影響。若是自動電位滴定,滴定參數(shù)的設(shè)置也相當(dāng)重要。參加此次能力驗證項目的實驗室,大部分采用進口的全自動電位滴定儀。但有些實驗室對儀器性能和電極的適用性沒有深入了解,造成結(jié)果不滿意。具體分析如下:3.2.1固定增量滴定法自動電位滴定儀參數(shù)的設(shè)置一般涉及3個方面:滴定模式、滴定增量及滴定終點的判斷標(biāo)準。滴定模式有動態(tài)滴定法和固定增量滴定法。動態(tài)滴定法是計算機軟件根據(jù)滴定過程中電極電位的變化,動態(tài)地調(diào)節(jié)滴定增量和滴定速度;固定增量滴定法是在整個滴定過程中以固定的滴定增量和滴定速度進行的。對于可估計終點的滴定,如本次能力驗證,應(yīng)采用固定增量滴定法以期得到更準確的數(shù)據(jù)。此時滴定增量及滴定速度的選擇應(yīng)依據(jù)待測供試品酸堿反應(yīng)的速度來決定。具體參數(shù)應(yīng)在正式試驗前進行預(yù)試驗研究,可能有些實驗室沒有做這方面工作,導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差。3.2.2多電極系統(tǒng)試驗參加本次能力驗證的實驗室采用的電極系統(tǒng)有三種:復(fù)合電極系統(tǒng)、單體指示電極+參比電極系統(tǒng)、單體指示電極+參比電極+輔助電極系統(tǒng)?？傮w來說,多電極系統(tǒng)抗干擾能力要強于復(fù)合電極系統(tǒng)。本次能力驗證采用分割水平的樣品,其中1份樣品中加入了少量惰性成分,所以采用多電極系統(tǒng)結(jié)果可能更準確。另外,還應(yīng)注意電極適用性。如梅特勒自動電位滴定儀在進行非水電位滴定時,應(yīng)采用以飽和氯化鋰/乙醇溶液作為電極液的DG-113SC電極,但有些實驗室采用了使用飽和氯化鉀溶液作為電極液的DG-115SC電極,該電極在非水電位滴定時易產(chǎn)生較大的液接電位,導(dǎo)致試驗結(jié)果不滿意。3.2.3滴定管體積測量自動電位滴定儀中用來定量的滴定管體積是否經(jīng)過校準,也會直接影響測定結(jié)果的準確性。3.3空氣環(huán)境因素的影響滴定增量、滴定速度會影響實驗結(jié)果,應(yīng)在正式試驗前進行預(yù)試驗。同時,由于手動電位滴定所需時間較長,供試品溶液會吸收空氣中的水和二氧化碳,應(yīng)考慮相關(guān)環(huán)境因素的影響。滴定管的體積是否經(jīng)過校準,直接影響到測定結(jié)果的準確性。3.4干燥失重和含量測定本次發(fā)放的樣品是以氣相頂空進樣小瓶壓蓋密閉分裝,打開后,可能有引濕性,如果沒有立即同時稱樣進行干燥失重和含量測定,也會導(dǎo)致誤差。中國藥典規(guī)定含量測定的稱樣量是0.2g,大多數(shù)實驗室按照標(biāo)準稱量,也有少數(shù)實驗室僅稱取80mg,稱樣量減少會引起較大稱量誤差,同時消耗滴定液體積減少,也可能增大誤差。3.5高氯酸滴定液的測量果,根據(jù)獲得的信息對這7家實驗室進一步進行原因分析,作者認為可能的主要因素為:(1)未注意滴定液濃度的準確性。本實驗中使用的高氯酸滴定液的濃度受溫度影響大,其配制與標(biāo)定要求較高,幾家實驗室提供的原始記錄中均無高氯酸滴定液的具體配制、標(biāo)定記錄,標(biāo)定與樣品測定不是同一天,溫度存在差異,也沒有考慮公式校正等,會對測定結(jié)果產(chǎn)生較大影響。(2)未選擇適用的電極。實驗室是否選擇了適用的電極系統(tǒng)會直接影響滴定終點的判斷。本實驗為非水電位滴定,部分實驗室選擇了以飽和氯化鉀溶液為電極液的參比電極,導(dǎo)致不滿意結(jié)果。4能力驗證過程由CNAS組織、本所負責(zé)實施的本次電位滴定法測定藥品含量能力驗證共有75家實驗室參加,其中有70家是各地方藥品檢驗所,其余5家為社會實驗室。本次能力驗證嚴格按照CNAS能力