分子診斷學(xué)：蛋白質(zhì)組學(xué)

第五章蛋白質(zhì)組學(xué)選擇題目前研究蛋白質(zhì)間相互作用最常采用的方法是_______。A質(zhì)譜分析B二維凝膠電泳C酵母雙雜交技術(shù)DDNaseI足紋分析目前進(jìn)行蛋白質(zhì)分離最有效的方法是_______。A質(zhì)譜分析B二維凝膠電泳C酵母雙雜交技術(shù)DDNaseI足紋分析3．二維凝膠電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)的_______來進(jìn)行分離的。A分子量和分子構(gòu)像B分子量和電荷C電荷和分子構(gòu)像D分子量4．質(zhì)譜分析技術(shù)主要是用來檢測蛋白質(zhì)的_______。A分子量B分子組成C分子構(gòu)像D分子大小5．下列技術(shù)中，不能用來檢測溶液中蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)是_______。A核磁共振B圓二色譜法C氫同位素交換法D小角中子衍射法6．DNaseⅠ足紋分析技術(shù)中，DNaseⅠ水解的是DNA分子中的_______。A氫鍵B磷酸二酯鍵C疏水鍵D肽鍵7．蛋白質(zhì)之間相互作用的形式主要包括_______。A分子和亞基的聚合B分子識別C分子自我裝配D多酶復(fù)合體E分子雜交名詞解釋蛋白質(zhì)組蛋白質(zhì)組學(xué)二維凝膠電泳質(zhì)譜技術(shù)凝膠滯后實驗問答題1．蛋白質(zhì)組學(xué)的研究特點有哪些？2．蛋白質(zhì)組學(xué)的研究內(nèi)容有哪些？3．目前在蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中主要采用了哪些技術(shù)？4．等電聚焦凝膠電泳的原理是什么？5．簡述酵母雙雜交系統(tǒng)的優(yōu)缺點。答案：選擇題：C、B、B、A、D、B、ABCDE名詞解釋：蛋白質(zhì)組是指特定細(xì)胞、組織乃至機(jī)體作為一個生命單元中所擁有蛋白質(zhì)的集合，即生命體中攜帶的基因信息在某一時段所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)是指對在特定的時間和環(huán)境下所表達(dá)的群體蛋白質(zhì)研究的一門學(xué)問。主要在蛋白質(zhì)水平上探索蛋白質(zhì)的表達(dá)模式、作用模式、功能機(jī)制、調(diào)節(jié)控制以及蛋白質(zhì)群體內(nèi)的相互作用。是在生物體或其細(xì)胞的整體蛋白質(zhì)水平上進(jìn)行的，并從一個機(jī)體或一個細(xì)胞的蛋白質(zhì)整體活動來揭示生命的規(guī)律。二維凝膠電泳是目前蛋白質(zhì)組研究中最有效的分離技術(shù)。它由兩向電泳組成，第一向以蛋白質(zhì)電荷差異為基礎(chǔ)進(jìn)行分離的等電聚焦凝膠電泳，第二向是以蛋白質(zhì)分子量差異為基礎(chǔ)的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。質(zhì)譜技術(shù)是樣品分子離子化后，根據(jù)不同離子間的質(zhì)量、電荷比值(質(zhì)荷比，m/z)差異來確定分子量的技術(shù)。凝膠滯后實驗是近年來發(fā)展起來的用聚丙烯酰胺凝膠電泳直接分析核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合的簡單、快速、敏感方法。通過蛋白質(zhì)與末端標(biāo)記的核酸探針特異性結(jié)合，電泳時這種復(fù)合物較無蛋白結(jié)合的探針在凝膠中的泳動速度要慢，即表現(xiàn)為相對滯后。問答題：=1\*Arabic1．=1\*GB3①整體性=2\*GB3②揭示生命的動態(tài)性過程=3\*GB3③體現(xiàn)生命現(xiàn)象的復(fù)雜性=2\*Arabic2．蛋白質(zhì)組學(xué)的研究包括兩個方面：一是針對蛋白質(zhì)表達(dá)模式的研究，一是在蛋白質(zhì)功能模式方面的深入分析。=3\*Arabic3．=1\*GB3①蛋白質(zhì)的分離技術(shù)：二維凝膠電泳=2\*GB3②蛋白質(zhì)的鑒定技術(shù)主要包括：質(zhì)譜技術(shù)、Edman降解分析技術(shù)、蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)分析技術(shù)=3\*GB3③蛋白質(zhì)與核酸間相互作用的研究技術(shù)：凝膠滯后實驗、DNaseⅠ足紋分析、核酸一蛋白質(zhì)雜交實驗=4\*GB3④蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間相互作用的研究技術(shù)：酵母雙雜交技術(shù)=4\*Arabic4．依據(jù)蛋白質(zhì)分子的凈電荷或等電點進(jìn)行分離的技術(shù)。在等電聚焦過程中，電場所采用的載體兩性電解質(zhì)含有脂肪族多氨基多羧酸，可在電場中形成正極為酸性，負(fù)極為堿性的連續(xù)pH梯度，蛋白質(zhì)分子在一個載體兩性電解質(zhì)(ampholyte)形成的連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)遷移到其等電點位置時，凈電荷為零，在電場中不再移動，因此可將各種不同等電點性質(zhì)的蛋白質(zhì)分離開來=5\*Arabic5．酵母雙雜交系統(tǒng)所具有的優(yōu)點：①蛋白質(zhì)作為被研究的對象不用被純化；②檢測在活細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，可以在一定程度上反映體內(nèi)（細(xì)胞內(nèi)）的真實情況；③由于這一系統(tǒng)可以反映基因表達(dá)產(chǎn)物的累積效應(yīng)，因而可檢測存在于蛋白質(zhì)之間微弱或短暫的相互作用；④采用不同組織、器官、細(xì)胞類型和分化時期材料構(gòu)建cDNA文庫，可用于分析多種不同功能的蛋白。局限性：①雙雜交系統(tǒng)分析蛋白間的相互作用定位于細(xì)胞核內(nèi)，而許多蛋白間的相互作用依賴于翻譯后加工如糖基化、二硫鍵形成等，這些反應(yīng)在核內(nèi)無法進(jìn)行。②由于某些蛋白本身具有激活轉(zhuǎn)錄功