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文檔簡(jiǎn)介
一.填空(每空0.5分,共15分)1.為加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室規(guī)范化管理,衛(wèi)生部于公布《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室管理措施》,北京市衛(wèi)生局為做好試驗(yàn)室立案工作,于公布了《北京市醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室技術(shù)審核暫行規(guī)定》。()2.北京市衛(wèi)生局及各區(qū)縣衛(wèi)生局負(fù)責(zé)所轄行政區(qū)域內(nèi)地方醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室的立案和監(jiān)督管理工作。其中立案的技術(shù)審核工作流程重要包括:申報(bào)、資料審核、現(xiàn)場(chǎng)驗(yàn)收、整改、告知試驗(yàn)室資料審核成果。醫(yī)療機(jī)構(gòu)的醫(yī)學(xué)檢查科應(yīng)當(dāng)設(shè)有臨床細(xì)胞分子遺傳學(xué)專(zhuān)業(yè)診斷科目。立案的臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室參與醫(yī)療機(jī)構(gòu)的年度校驗(yàn)。()3.臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)的分析中質(zhì)量保證關(guān)鍵內(nèi)容包括:室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)。其中前者監(jiān)測(cè)和控制的是試驗(yàn)室測(cè)定的反復(fù)性,而后者則通過(guò)對(duì)不一樣的試驗(yàn)室測(cè)定成果的比對(duì)而評(píng)價(jià)試驗(yàn)室測(cè)定的精確度。()4.DNA雙螺旋構(gòu)造的特點(diǎn)是:螺旋中的兩條鏈為反向平行,其中一條鏈的方向?yàn)?’-3’,另一條鏈的方向?yàn)?’-5’。()5.核酸包括兩種類(lèi)型:脫氧核糖核酸和核糖核酸,兩者的重要區(qū)別為:前者由ATCG四種堿基構(gòu)成,而后者由AUCG四種堿基構(gòu)成。()6.根據(jù)遺傳中心法則,遺傳信息的流動(dòng)方向?yàn)镈NARNA蛋白質(zhì)。()7.一般臨床基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室一般包括下面四個(gè)分區(qū):試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。()8.提純的核酸樣品可根據(jù)OD260波長(zhǎng)的光吸取值算出其含量,通過(guò)計(jì)算260/280的比值計(jì)算出其純度。()9.臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)室檢測(cè)用的試劑應(yīng)當(dāng)經(jīng)國(guó)家藥監(jiān)局同意。()10.cfDNA的和中文名稱(chēng)是細(xì)胞游離DNA,ctDNA的中文名稱(chēng)是循環(huán)腫瘤DNA。()11.在PCR前,為保護(hù)操作者和樣本,手工處理樣本應(yīng)當(dāng)在樣本制備區(qū)的生物安全柜中進(jìn)行,并使用帶濾芯的移液吸頭進(jìn)行樣本操作。()12.醫(yī)療廢物垃圾袋結(jié)扎采用“鵝口頸”套扎結(jié)扎形式。()13.銳器盒容積到達(dá)總體積的3/4時(shí)需要更換。()14.核酸檢測(cè)中,全血樣本采集一般使用EDTA或枸櫞酸鹽抗凝,不使用肝素抗凝。()15.熒光定量PCR使用的Taqman探針兩端標(biāo)識(shí)有匯報(bào)熒光R5’基團(tuán)和熒光粹滅Q3’基團(tuán)。()16.新冠病毒核酸檢測(cè)應(yīng)當(dāng)在生物安全Ⅱ級(jí)試驗(yàn)室開(kāi)展,同步采用生物安全Ⅲ級(jí)試驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)。()17.PCR的基本反應(yīng)過(guò)程包括變性、退火、延伸。()18.DNA/RNA的紫外吸取在260nm附近有最大吸取值。()19.核酸的基本構(gòu)造單位是:核苷酸,其構(gòu)成包括堿基、核糖或脫氧核糖和磷酸。()二.是非題(在你認(rèn)為對(duì)的的句子背面打√,錯(cuò)誤的背面打×,每題1分,共15分)DNA雙鏈中,堿基A-T之間以三個(gè)氫鍵相連,G-C以?xún)蓚€(gè)氫鍵相連。(×)()與細(xì)胞學(xué)初篩相比較,HPV核酸檢測(cè)初篩具有更高的敏感性。(√)()使用有防“污染”作用的尿苷糖基酶(UNG)的PCR試劑盒,該酶可以降解具有UTP的擴(kuò)增產(chǎn)物。(√)()DNA變性是指在物理或化學(xué)原因的作用下,導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂,而核酸分子中的所有共價(jià)鍵同步也受影響。(×)()自制室內(nèi)質(zhì)控品時(shí),應(yīng)對(duì)質(zhì)控品的均勻性和穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)。(√)()定量PCR與定性PCR測(cè)定原理的最重要的區(qū)別點(diǎn)在于前者的測(cè)定點(diǎn)在PCR的指數(shù)擴(kuò)增期,而后者多為擴(kuò)增平臺(tái)期。(×)()處理PCR標(biāo)本時(shí),在沒(méi)有生物安全柜的狀況下,可用超凈臺(tái)操作。(×)()臨床檢查中的系統(tǒng)誤差一般體現(xiàn)為質(zhì)控物測(cè)定成果的SD增大。(×)()擴(kuò)增管沒(méi)有蓋好會(huì)導(dǎo)致PCR反應(yīng)液熱蒸發(fā),直接影響成果,但不會(huì)成為一種污染源。(×)()核酸是極性化合物,溶于水,不溶于乙醇等有機(jī)溶劑。(√)()核酸的解鏈溫度(Tm)與G+C含量有關(guān),G+C含量愈大,Tm愈低。(×)()無(wú)法參與室間質(zhì)量評(píng)價(jià)計(jì)劃時(shí),可以用室內(nèi)質(zhì)控替代。(×)()一般進(jìn)行HCV-RNA檢測(cè)時(shí)宜采用EDTA抗凝血,不適宜采用肝素抗凝。(√)()以次氯酸為重要成分的清潔劑在配制后可以長(zhǎng)期使用。(×)()質(zhì)量管理體系的要素包括質(zhì)量方針、質(zhì)量目的和質(zhì)量指標(biāo)。(√)()核酸的復(fù)制是由3’-5’方向進(jìn)行。5---3(×)()核酸的解鏈溫度(Tm)與G+C含量有關(guān),G+C含量愈大,Tm愈高。(√)()標(biāo)本差錯(cuò)率和試驗(yàn)室布局的合理性均為試驗(yàn)室質(zhì)量體系監(jiān)控指標(biāo)。(√)()試驗(yàn)室質(zhì)量體系文獻(xiàn)無(wú)統(tǒng)一格式,無(wú)原則文獻(xiàn),應(yīng)切合實(shí)際,怎么做怎么寫(xiě)。(×)()有原則文獻(xiàn)進(jìn)行新冠病毒核酸檢測(cè)時(shí),采集鼻咽拭子標(biāo)本可使用棉簽。(×)()植絨拭子在常規(guī)應(yīng)用前,可由制造商對(duì)試驗(yàn)室未加修改而使用的已確認(rèn)的檢查程序進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證。(×)()DNA在中性或弱堿性溶液中易水解,但在酸性溶液中較穩(wěn)定,RNA在堿性溶液中穩(wěn)定。(×)()答案:在酸性溶液中,DNA、RNA易水解,在中性或弱堿性溶液中較穩(wěn)定,DNA在堿中變性,但不水解,RNA水解。DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂。(√)()DNA微溶于水,可溶于有機(jī)溶劑。(×)()溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有機(jī)溶劑三.單項(xiàng)選擇題(請(qǐng)將所選答案填寫(xiě)在題后的括號(hào)中,每題1分,共25分)1.PCR技術(shù)的發(fā)明人是:(C)()A.WatsonJ.D.;B.CrickF.H.C.;C.KaryMullis;D.RosalindFranklin.2.二級(jí)生物安全柜能對(duì)如下哪些進(jìn)行防護(hù):(D)()A.人員B.試驗(yàn)品C.環(huán)境D.以上都是3.在生物界尚無(wú)充足證據(jù)的信息流動(dòng)過(guò)程的是(A)()A.蛋白質(zhì)→RNAB.RNA→DNAC.DNA→DNAD.DNA→RNA4.核酸提取純化中,RNase潛在污染源是:(D)()A.試驗(yàn)室環(huán)境;B.試驗(yàn)用品如吸頭、離心管等;C.試驗(yàn)人員的手;D.以上都是5.生物安全水平的級(jí)別共分為幾種等級(jí)(D)()A.1個(gè)B.2個(gè)C.3個(gè)D.4個(gè)6.有有關(guān)熒光定量PCR措施,下述哪一條是錯(cuò)誤的?(A)()A.在擴(kuò)增的指數(shù)期定量;B.采用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)措施均可;C.可采用Taqman探針;D.在擴(kuò)增的終點(diǎn)測(cè)定定量7.在選擇開(kāi)展臨床檢查項(xiàng)目時(shí),應(yīng)首先考慮:(B)()A.臨床有效性和分析有效性;B.檢測(cè)精密度和檢測(cè)精確度;C.臨床有效性和檢測(cè)精密度;D.分析有效性和檢測(cè)精確度8如下哪項(xiàng)有助于DNA的保留:(A)()A.加入EDTA螯合鈣離子,清除核酸酶的活性;B.加入少許DNase;C.溶于pH3.0溶液;D.加入少許RNase9.試驗(yàn)室的清潔工作應(yīng)在如下?tīng)顩r下進(jìn)行:(A)()A.每次試驗(yàn)后B.文獻(xiàn)規(guī)定清潔時(shí)間C.試驗(yàn)室發(fā)生污染時(shí)D.以上都是10.熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)程中,基線漂移的也許原因有:(D)()A.蒸發(fā);B.探針?biāo)釩.相鄰熒光通道干擾D.以上都是11.將基因擴(kuò)增檢查試驗(yàn)室的產(chǎn)物分析區(qū)設(shè)置為負(fù)壓狀態(tài),目的是:(B)()A.防止有生物傳染危險(xiǎn)的樣本逸出;B.防止擴(kuò)增產(chǎn)物從該區(qū)逸出;C.防止該區(qū)灰塵的逸出;D.為了生物安全的目的12.常用RNase克制劑是(B)()A.乙醇;B.DEPC;C.異丙醇;D.精胺13.真核生物染色體DNA重要如下列哪種形式存在(D)()A.環(huán)狀單鏈分子B.線性單鏈分子C.環(huán)狀雙鏈分子D.線性雙鏈分子14.TaqMan探針采用的是(A)()A.熒光標(biāo)識(shí)的探針B.生物素標(biāo)識(shí)的探針C.同位素標(biāo)識(shí)的探針D.SYBRGreen熒光染料15.最大量程為200ul的微量移液器,顯示讀數(shù)為020,實(shí)際的吸液容量值為:(C)()A.0.2ulB.2ulC.20ulD.200ul16.有關(guān)核小體的錯(cuò)誤論述是:(D)()A.核小體是染色體的基本單位B.DNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體C.DNA和組蛋白H1構(gòu)成核小體連接區(qū)D.RNA和組蛋白共同構(gòu)成核小體17.基因突變的實(shí)質(zhì)是:(A)()A.染色體上的DNA序列變化了B.染色體上的DNA變成了RNAC.染色體上的DNA變成了蛋白質(zhì)D.染色體上的DNA高級(jí)構(gòu)造發(fā)生了局部變化18.假如一種PCR反應(yīng)體系中加入模板200個(gè),通過(guò)30個(gè)循環(huán)后擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量將到達(dá)(C)()A.200×30×2B.200×30C.200×230D.200×30219.Sanger測(cè)序體系與PCR反應(yīng)體系的重要區(qū)別是前者具有:(B)()A.模板B.ddNTPC.DNA聚合酶D.引物Sanger測(cè)序體系與PCR相似點(diǎn):都是基于堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,在DNA聚合酶作用下的聚合反應(yīng)。不一樣點(diǎn):1反應(yīng)過(guò)成不一樣:PCR是引物對(duì)擴(kuò)增,測(cè)序則是單引物擴(kuò)增。2反應(yīng)成分不一樣:PCR是需要4種脫氧堿基,測(cè)序則有ddNTP20.分子雜交試驗(yàn)不能用于:(C)()A.單鏈DNA分子之間的雜交B.單鏈DNA與RNA分子之間的雜交C.抗原與抗體分子之間的結(jié)合D.雙鏈DNA與RNA分子之間的雜交21.在Sanger基因測(cè)序技術(shù)中所使用的酶是:(A)()A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.DNA連接酶D.DNA拓?fù)涿?2.雙鏈DNA中的堿基對(duì)有:(D)()A.A-UB.G-TC.C-AD.T-A23.下列四個(gè)DNA片段中具有回文構(gòu)造的是(D)()A.GAAGAAB.TGGAAAC.GAAAAGD.GAATTC24.核酸分子中儲(chǔ)存遺傳信息的關(guān)鍵部分是:(D)()A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.DNA25.核酸檢測(cè)探針的標(biāo)志性特性是:(A)()A.一小段已知序列的單鏈核酸;B.一小段未知序列的單鏈核酸;C.一小段已知序列的雙鏈核酸;D.有同位素或非同位素標(biāo)識(shí)物。作為探針的核酸序列至少必須具有如下兩個(gè)條件:①應(yīng)是單鏈,若為雙鏈,必須先行變性處理。②應(yīng)帶有輕易被檢測(cè)的標(biāo)識(shí)。它可以包括整個(gè)基因,也可以?xún)H僅是基因的一部分;可以是DNA自身,也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來(lái)的RNA。26.核酸分離純化的目的是:(D)()A.除去PCR克制物B.增長(zhǎng)靶核酸濃度,使之到達(dá)PCR測(cè)定范圍C.增長(zhǎng)樣本均一性,保證測(cè)定精密度和反復(fù)性D.以上都是27.mRNA約占總RNA的百分?jǐn)?shù)為:(A)()A.5%B.10%C.15%D.20%28.分子檢測(cè)對(duì)標(biāo)本采集容器的規(guī)定是:(E)()A.密閉B.一次性C.無(wú)DNase和RNaseD.無(wú)菌E.以上均是29.有關(guān)基因擴(kuò)增檢測(cè)試驗(yàn)室分區(qū),如下說(shuō)法不對(duì)的的是:(D)()A.外周血游離DNA標(biāo)本制備可與細(xì)胞/組織標(biāo)本制備區(qū)共用;B.須注意試驗(yàn)室空氣流向;C.試驗(yàn)室應(yīng)有充足的通風(fēng)換氣;D.緩沖間不是必需的;E.傳遞窗不是必需的30.“無(wú)基因”或“無(wú)核酸”概念是指:(E)()A.在基因擴(kuò)增檢測(cè)操作時(shí),要注意防止由于擴(kuò)增產(chǎn)物污染所致檢測(cè)假陽(yáng)性;B.在基因擴(kuò)增檢測(cè)操作時(shí),要注意防止由于標(biāo)本間交叉污染所致檢測(cè)假陽(yáng)性;C.每次檢測(cè)后試驗(yàn)室內(nèi)的充足通風(fēng)及清潔;D.試驗(yàn)室各區(qū)物品的專(zhuān)用;E.以上均是31.商品試劑的性能驗(yàn)證的合格判斷原則是:(D)()A.衛(wèi)生行業(yè)原則;B.國(guó)際原則;C.滿(mǎn)足臨床疾病的診斷規(guī)定;D.試劑盒闡明書(shū)上所宣稱(chēng)的檢測(cè)性能E.以上均是32.L-J指控圖的失控規(guī)則制定的根據(jù)是:(B)()A.各試驗(yàn)室根據(jù)自身的狀況詳細(xì)確定;B.記錄學(xué)的“小概率事件”原理;C.超過(guò)均值±3SD;D.超過(guò)均值±2SD;E.陰性質(zhì)控品檢測(cè)為陽(yáng)性33.下列哪一種病毒遺傳物質(zhì)為RNA(D)()A.乙肝病毒B.人乳頭瘤病毒C.巨細(xì)胞病毒D.新型冠狀病毒COVID-1934.如下在PCR反應(yīng)中,對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性起決定性作用的是:(B)()A.模板B.引物C.dNTPD.鎂離子35.有有關(guān)熒光定量PCR措施,下述哪一條是錯(cuò)誤的?(A)()A.在指數(shù)擴(kuò)增初期定量;B.在擴(kuò)增的終點(diǎn)定量;C.可采用Taqman探針;D.采用內(nèi)標(biāo)和外標(biāo)措施均可36.在選擇開(kāi)展臨床檢查項(xiàng)目時(shí),應(yīng)首先考慮:(B)()A.臨床預(yù)期用途;B.檢測(cè)精密度和檢測(cè)精確度;C.檢測(cè)精密度;D.檢測(cè)精確度37.一種PCR反應(yīng)體系中起始模板量為500,通過(guò)30個(gè)循環(huán)后擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量將到達(dá)(C)()A.500×30×2B.5002×30C.500×230D.500×30238.對(duì)COVID-19疑似患者采樣,需要(C)級(jí)生物安全個(gè)人防護(hù)裝備()A.ⅠB.ⅡC.ⅢD.Ⅳ39.手衛(wèi)生分為(D)步()A.4B.5C.6D.740.除(A)外均可有效滅活新型冠狀病毒()A.氯已定B.56℃30分鐘C.75%乙醇D.含氯消毒劑41.在基因擴(kuò)增檢測(cè)中,全血或骨髓標(biāo)本不能用肝素抗凝,原因是(D)()A.肝素是TaqDNA聚合酶活性的強(qiáng)克制劑B.肝素對(duì)Mg++有絡(luò)合作用C.經(jīng)典的核酸提取措施很難清除肝素D.以上A和C42.下列哪種狀況需對(duì)PCR檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行措施學(xué)驗(yàn)證試驗(yàn):(D)()A.開(kāi)展新項(xiàng)目前B.更換試劑品牌C.更換儀器D.以上全是43.在臨床基因擴(kuò)增檢查中,弱陽(yáng)性室內(nèi)質(zhì)控品發(fā)生失控,常見(jiàn)的原因有下述各項(xiàng),除(B)外()A.核酸提取中的丟失、有機(jī)溶劑的清除不徹底、標(biāo)本中擴(kuò)增克制物的殘留等B.擴(kuò)增儀孔間溫度的不一致性C.擴(kuò)增產(chǎn)物的污染D.Taq酶和/或反轉(zhuǎn)錄酶的失活44.PCR擴(kuò)增檢測(cè)采用內(nèi)標(biāo),可以識(shí)別擴(kuò)增檢測(cè)的(C)()A.假陰性B.假陽(yáng)性C.假陰性、假陽(yáng)性都可以防止D.假陰性、假陽(yáng)性都不能防止45.在一種DNA分子中,如G所占摩爾比為17.2%,則A所占摩爾比為(B)()A.82.8%B.32.8%C.17.2%D.65.6%四.簡(jiǎn)答題(每題5分,共25分)1.簡(jiǎn)述什么狀況下應(yīng)進(jìn)行性能驗(yàn)證?(5分)()答:(1)在常規(guī)應(yīng)用前,應(yīng)由試驗(yàn)室對(duì)未加修改而使用的已確認(rèn)的檢查程序進(jìn)行獨(dú)立驗(yàn)證。(2)任何嚴(yán)重影響檢測(cè)系統(tǒng)分析性能的狀況發(fā)生后,如儀器搬遷、設(shè)施、環(huán)境嚴(yán)重失控等。(3)常規(guī)有效期間,定期做。(4)啟用新的檢測(cè)系統(tǒng):更換試劑、儀器、校準(zhǔn)品溯源性變化2.臨床PCR試驗(yàn)室質(zhì)量管理體系文獻(xiàn)應(yīng)包括哪些內(nèi)容?(5分)()答:(1《質(zhì)量手冊(cè)》:質(zhì)量方針和質(zhì)量目的的申明。(2)準(zhǔn)則規(guī)定的程序和記錄。(3)試驗(yàn)室規(guī)定的文獻(xiàn)和記錄:為保證有效籌劃、運(yùn)行并控制其過(guò)程。(4)合用的法規(guī)、原則及其他規(guī)范文獻(xiàn)。3.請(qǐng)簡(jiǎn)述完整的員工培訓(xùn)計(jì)劃應(yīng)包括哪些內(nèi)容。(5分)()答:(1)培訓(xùn)所波及的范圍:儀器設(shè)備的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)。試劑措施原理。質(zhì)量管理體系。有關(guān)法律法規(guī),有關(guān)領(lǐng)域的新技術(shù)、新理念和新進(jìn)展。試驗(yàn)操作技能等。(2)怎樣培訓(xùn):講座,討論,自學(xué)和參與培訓(xùn)班。(3)培訓(xùn)的評(píng)估:書(shū)面考試,試驗(yàn)考核,討論心得,論文,綜述等。4.感染性疾病的定量、定性檢測(cè),人基因組的基因型檢測(cè),對(duì)上述三類(lèi)PCR檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度水平和型別怎樣規(guī)定?(5分)()答:定量PCR檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度:測(cè)定線性范圍內(nèi)的高、中、低三種濃度,型別:生物DNA/RNA參照原則品;定性PCR檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度:靠近措施測(cè)定下限(2-4倍)的濃度,型別:生物DNA參照原則品;人基因組的基因型檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控品的濃度:型別:人類(lèi)基因組DNA參照原則品。5.簡(jiǎn)述生物安全的概念、試驗(yàn)室生物安全水平的概念。(5分)()答:試驗(yàn)室生物安全:為了防止微生物和醫(yī)學(xué)試驗(yàn)室中有害或有潛在危害的生物因子對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)導(dǎo)致的危害或潛在危害,而采用的防護(hù)措施(硬件)和管理措施(軟件),到達(dá)對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)的安全防護(hù)目的。生物安全水平:根據(jù)試驗(yàn)室的工作性質(zhì)及也許分離到的病原體等級(jí)進(jìn)行安全防護(hù)水平的劃分。6.什么是室內(nèi)質(zhì)量控制?(5分)()答:由試驗(yàn)室工作人員,采用一定的措施和環(huán)節(jié),持續(xù)評(píng)價(jià)本試驗(yàn)室工作的可靠性程度,意在監(jiān)測(cè)和控制本試驗(yàn)室工作的精密度,提高本試驗(yàn)室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢查的一致性,以確定測(cè)定成果與否可靠,可否發(fā)出匯報(bào)的一項(xiàng)工作。包括三個(gè)方面的內(nèi)容:測(cè)定前的質(zhì)量控制、記錄學(xué)質(zhì)量控制、質(zhì)量控制的評(píng)價(jià)。7.請(qǐng)從氣流方向、高效過(guò)濾器位置、保護(hù)對(duì)象、操作對(duì)象幾方面比較生物安全柜、超凈臺(tái)、通風(fēng)櫥三
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