中藥瀉味制劑化學(xué)成分、炮制及藥理作用研究進(jìn)展

中藥瀉味制劑化學(xué)成分、炮制及藥理作用研究進(jìn)展

腹瀉是澤瀉科植物的一個(gè)干燥的莖，具有甘寒和腎膀胱經(jīng)。主要用于排尿不良、水腫腹脹、腹瀉、尿少、粘液、頭暈、熱脈、出血等。臨床單味用藥的情況較少,多與其它藥物配伍作成方制劑使用。本文綜述了中藥澤瀉的化學(xué)成分、炮制研究及藥理作用,并介紹了近幾年來(lái)該味藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究情況。1化學(xué)成分的研究1.1c23-阿布氏三類化合物澤瀉醇A(alisolA)及其乙酸酯、澤瀉醇B(AlisolB)及其乙酸酯、澤瀉醇C單乙酸酯(AlisolC23-acetate)為首次從澤瀉中分離得到的三萜類化合物。此后,各國(guó)學(xué)者又從不同產(chǎn)地、不同加工方法的澤瀉飲片中分離得到了30多個(gè)三萜類化合物,其結(jié)構(gòu)多為原萜烷型(Protostane)四環(huán)三萜,如24-乙酰澤瀉醇A極其衍生物、23-乙酰澤瀉醇B及其衍生物、乙酰澤瀉醇E、澤瀉醇F、澤瀉醇H、澤瀉醇G等。從生物途徑歸納,三萜類都是由23-澤瀉醇B衍生而來(lái)。1.2巖清經(jīng)方與造林地的土地澤瀉主含愈創(chuàng)木烷型倍半萜,最早由Oshima從中分離到的是Alismo1和澤瀉二醇(Alismoxide),后又陸續(xù)分離出澤瀉醇萜A、澤瀉醇萜B、澤瀉醇萜C、澤瀉醇萜E、澤瀉醇萜F等。1.3類化合物的絕對(duì)原型90年代中期,Nakajima等首次從澤瀉鮮品中分離出一個(gè)貝殼杉烷型四環(huán)二萜類化合物,并最終確定其絕對(duì)構(gòu)型為:(-)-16R-ent-kaurane-2,12-dione。最近,彭國(guó)平等又從中分離出兩個(gè)新的貝殼杉烷型四環(huán)二萜類化合物:Oriediterpenol及Ofiediter-penoside。1.4-谷哌醇-5-o澤瀉還含有β-谷甾醇(β-sitosterol)、β-谷甾醇-6′-O-硬酸脂、硬脂酸、甘油醇-1-硬酸脂、三十烷、膽堿、植物凝聚素、澤瀉多糖PH、PIIIF、生物堿、黃酮大黃素、淀粉、蛋白質(zhì)、氨基酸等成分。2關(guān)于生產(chǎn)研究2.1從工藝上的變化發(fā)展南北劉宋時(shí)代有酒浸(《雷公》)。宋代有酒浸后炙(《總錄》、微炒(《洪氏》)、酒浸后蒸(《傳言》)等方法。元代有清蒸(《世醫(yī)》)法。明代增加了皂角水浸焙(《仁術(shù)》)、蒸焙(《啟玄》)、米泔水浸后蒸(《大法》)、米泔浸后炒(《醒齋》)等方法。清代又增加了鹽水伴(《備要》)、鹽水炒焦(《幼幼》)、酒炒(《得配》)、酒伴(《求真》)、酒伴烘(《要旨》)等炮制方法。從炮制方法的變革上看,早期是酒浸后取出,并不要浸出物部分;而后是浸過(guò)之后或炒或蒸或焙或烘,是由生制熟的過(guò)程,可能是為了提高有效成分含量并去除寒性。2.2草地病肉的制備現(xiàn)代澤瀉藥用有生澤瀉、鹽澤瀉、麩炙澤瀉3個(gè)主要品種。生澤瀉:除去雜質(zhì),稍浸,潤(rùn)透,切厚片,干燥。鹽澤瀉:取澤瀉片,加適量鹽水拌勻悶透,置鍋內(nèi),以文火加熱、炒至微黃色時(shí),取出放涼。每100kg澤瀉用鹽2kg。麩炙澤瀉:先將鍋燒熱,撒入麥麩待冒煙時(shí),投入澤瀉片不斷翻炒,炒至藥物呈黃色時(shí)取出,篩去麥麩放涼。每100kg澤瀉用麥麩10~15kg。樟幫麩炒澤瀉:先將鍋內(nèi)燒熱,撒入麩皮,待冒煙時(shí)加入澤瀉片,不斷地翻動(dòng),炒至藥物表面呈金黃色取出,篩去麩皮,放涼。每澤瀉100公斤,用麥麩10公斤。2.3獨(dú)立鹽充液的制備澤瀉性味甘、寒,歸腎、膀胱經(jīng),具有利小便、清濕熱的功能,用于小便不利、水腫漲滿、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛及高血脂等癥。澤瀉生品以利水滲濕為主,用于小便不利、水腫、泄瀉、淋濁、濕熱黃疸、濕熱帶下、痰飲等癥。鹽炙后能夠引藥下行,增強(qiáng)滋陰、瀉熱、利尿的作用,并利尿而不傷陰,用于小便淋澀、遺精淋漓、腰部重痛等癥。麩炒后寒性緩和,以滲濕和脾,降濁以生清為主,用于脾濕泄瀉、久瀉等癥。3給藥劑研究3.1單味依賴藥的藥理作用3.1.1小鼠腸道菌尿量的變化24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B灌胃給藥,能使大鼠尿液的鈉含量增加,鉀含量不變;澤瀉醇B有增加尿量的傾向。澤瀉煎劑2g(生藥)/kg及浸膏給家兔口服時(shí)利尿效果極弱,但澤瀉流浸膏腹腔注射或煎劑劑量大于前者時(shí)則呈顯著利尿作用,對(duì)由硝酸鈾皮下注射引起的家兔血中尿素及膽固醇的滯留有減輕作用,并能增加健康人尿量,增加尿素及氯化鈉的排泄。3.1.2對(duì)慢性血清三、三醇三醇酯的抑制作用澤瀉提取物對(duì)兔實(shí)驗(yàn)性高膽固醇癥具有明顯的降膽固醇作用,對(duì)實(shí)驗(yàn)性血清高三酰甘油亦具有一定抑制作用。澤瀉降膽固醇的主要活性成分為澤瀉醇A及澤瀉醇A、B、C的醋酸脂,尤以澤瀉醇24-乙酰澤瀉醇A降脂作用最強(qiáng)。3.1.3抗膽紅素作用澤瀉水提物及苯提取物可使血清膽固醇及肝脂肪量降低。3.1.4不同濃度的0.4對(duì)兔身主動(dòng)脈條的影響澤瀉乙醇提取物給兔靜脈注射可使其血壓迅速下降;澤瀉經(jīng)甲醇、苯和丙酮提取的組分可使貓和兔的血壓下降。澤瀉薁醇對(duì)生理鹽水溶液中的兔離體胸主動(dòng)脈條收縮和45Ca2+滯留無(wú)影響,也不影響去甲腎上腺素引起的收縮;對(duì)高K+生理鹽溶液中的收縮和45Ca2+滯留則有顯著抑制作用。故認(rèn)為澤瀉薁醇對(duì)兔胸主動(dòng)脈條的影響,主要是抑制鈣通道內(nèi)流。澤瀉薁醇可干擾神經(jīng)末梢在點(diǎn)刺激時(shí)對(duì)去甲腎上腺素的釋放;它還能抑制血管緊張素I所引起的動(dòng)脈收縮。3.1.5小鼠血清抗體igg含量的影響小鼠灌胃給予澤瀉煎劑能抑制小鼠碳粒廓清速率,對(duì)免疫器官重量和血清抗體IgG含量無(wú)影響;對(duì)綿羊紅細(xì)胞所致小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)也無(wú)影響;能明顯抑制由DNCB所致小鼠接觸性皮炎。20g/kg能減輕二甲苯引起的小鼠耳廓腫,抑制大鼠棉球肉牙組織增生。3.1.6體重法澤瀉水煎劑喂飼對(duì)大劑量谷氨酸鈉引起的肥胖有減肥作用,能降低肥胖大鼠的Lee指數(shù)值、子宮及睪丸周圍脂肪指數(shù)及血清三酰甘油含量。3.1.7對(duì)大鼠尿ca2+分泌量和腎組織ca2+水平的影響澤瀉有效成分四環(huán)三萜類化合物對(duì)大鼠體內(nèi)草酸鈣結(jié)晶的抑制作用。比較血清生化指標(biāo)和對(duì)大鼠24h尿Ca2+分泌量以及腎組織Ca2+水平的結(jié)果,澤瀉組生化指標(biāo)以及尿Ca2+分泌量和腎組織Ca2+水平均明顯低于草酸鈣模型組。3.2澤加王藥方劑的臨床應(yīng)用3.2.1和臨床用利水病與豬苓、茯苓、滑石等同用,可用于治療水熱互結(jié)之小便不利、水腫,如豬苓湯(《傷寒論》);若與豬苓、白術(shù)、桂枝等同用,可用于治療外有表證,內(nèi)有水濕、頭痛發(fā)熱、煩渴欲飲,或小便不利、水濕內(nèi)停的水腫,如五苓散(《傷寒論》);與茯苓、白術(shù)(土炒)、豬苓同用,具有利水除濕的作用,用于水瀉、小便不利,如四苓湯(《醫(yī)宗金鑒》);若與茯苓、蒼術(shù)、厚樸等同用,可用于治療夏秋之間脾胃?jìng)?、水谷不分、泄瀉不止,以及水腫、腹?jié)q、小便不利,如胃苓湯(《丹溪心法》);與牡丹皮、桂心、木通等同用,具有利水滲濕、泄熱的作用,可用于治療虛勞、膀胱氣滯、腰中重、小便淋漓,如澤瀉散(《圣惠方》);與茵陳、滑石、梔子等同用,具有滲濕褪黃的作用,用于濕熱黃疸、身目俱黃、濕重于熱、小便不利,如茵陳五苓散(《金匱要略》);若與黃芩、白鮮皮、茵陳等同用,可用于治療酒黃、病人五臟積熱、面赤、妄言妄語(yǔ)、昏沉錯(cuò)亂、目中黃色,如澤瀉湯(《總錄》);與白術(shù)同用,具有利水滲濕的作用,用于心下有支飲,其人苦眩暈,如澤瀉湯(《金匱要略》);若與白術(shù)、白茯苓同用,可用于治療冒暑霍亂、小便不利、頭暈引飲,如三白散(《綱目》)。3.2.2茯苓、杜仲、生姜與熟地、白菊花等同用,具有滋陰明目的作用,用于視物模糊、目色羞明等證,如明目地黃丸(《處方集》);與熟地、杜仲、牛膝等同用,具有補(bǔ)腎氣、強(qiáng)腰膝的作用,用于腎虛腰膝酸軟、疼痛等證;若與茯苓、杜仲、干姜等同用,可用于經(jīng)脈不通、腰部重痛,如圣濟(jì)澤瀉湯(《總錄》);與茯苓、豬苓、陳皮同用,具有利水通淋的作用,可用于治療小便不利、淋濁,亦治腳氣、水濕腫脹,如四苓散(《瘟疫論》),方中澤瀉鹽水炒后,能引藥下行,增強(qiáng)利水通淋的作用。3.2.3茯苓散配伍法與白術(shù)、茯苓神曲等同用,具有滲濕和脾的作用,用于濕阻中焦、脾失健運(yùn)、大便泄瀉如水、小便不利,如伴有寒癥,加炮姜、煨木香等,以散寒掉氣,如泄瀉方(《類證治裁》)。與白術(shù)、茯苓、車前子等同用,具有利水除飲、培土制水的作用,用于飲邪停胃、濁陰上范之眩暈、泛惡作嘔等證。史久良報(bào)道,在大白鼠的利尿?qū)嶒?yàn)中,生澤瀉、酒澤瀉、麩炒澤瀉均有一定的利尿作用,而鹽澤瀉幾乎沒(méi)有利尿作用;但在五苓散配伍中,無(wú)論選用生澤瀉或者鹽澤瀉均有利尿作用;鹽澤瀉在單味藥或者其它成方制劑中都沒(méi)有增強(qiáng)利尿作用的效果。4對(duì)凈化配方的測(cè)定澤瀉藥材等級(jí)的傳統(tǒng)劃分以塊莖個(gè)頭大小判斷,而現(xiàn)代研究澤瀉質(zhì)量的優(yōu)劣多以藥材中澤瀉醇24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B的含量作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。如彭國(guó)平等對(duì)澤瀉中的24-乙酰澤瀉醇A、23-乙酰澤瀉醇B、24-乙酰澤瀉醇C等活性成分進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)澤瀉醇23-乙酰澤瀉醇B專屬性好,檢測(cè)方法可靠,且在藥材中含量基本穩(wěn)定,其含量可以體現(xiàn)出澤瀉藥材的品質(zhì)優(yōu)劣并可區(qū)分澤瀉的混淆品。因而,將澤瀉醇23-乙酰澤瀉醇B定為澤瀉藥材的對(duì)照品。4.1重質(zhì)譜分析法彭國(guó)平等對(duì)澤瀉中倍半萜成分alismol進(jìn)行了分離鑒定以制備對(duì)照品。將澤瀉粉末經(jīng)硅膠柱預(yù)處理,洗脫液再薄層層析,進(jìn)行光密度掃描測(cè)定。顯色劑為硅烏酸乙醇溶液,薄層掃描測(cè)定波長(zhǎng)537nm,狹縫1.2mm×1.2mm,SX=3。郭素華、吳水生等用薄層掃描法對(duì)閩產(chǎn)澤瀉中澤瀉醇B的含量進(jìn)行了測(cè)定。用95%乙醇超聲提取樣品,硅膠G板點(diǎn)樣,以石油醚-乙酸乙脂-乙醇(9∶7∶1)作為展開劑,25%硫酸乙醇在105℃顯色10min,置薄層掃描儀上進(jìn)行單波長(zhǎng)鋸齒式掃描,檢測(cè)波長(zhǎng)537nm,狹縫1.2mm×1.2mm,線性化參數(shù)SX=3。鞏麗萍等以萜類化合物為研究對(duì)象,采用薄層色譜法對(duì)不同地區(qū)不同種類的藥材和飲片進(jìn)行了TCL圖譜分析。以23-乙酰澤瀉醇B為對(duì)照品,分別取江西、福建、四川、廣西等不同地方的澤瀉藥材制得供試品。具體實(shí)驗(yàn)方法為:藥材加甲醇超聲提取30min,過(guò)濾后用甲醇溶解殘?jiān)鳛楣┰嚻啡芤骸Ｈ」┰嚻泛蛯?duì)照液分別點(diǎn)于同一硅膠板上,以環(huán)己烷-醋酸乙脂-丙酮(4∶2∶1)為展開劑,香草醛硫酸-乙醇(4∶1)溶液為顯色劑。薄層掃描波長(zhǎng)560nm,狹縫1.2mm×0.05mm,掃描速度10mm·s-1。用薄層色譜掃描儀檢測(cè)出8個(gè)共有峰,可用于澤瀉TCL圖譜的鑒定。其中,23-乙酰澤瀉醇B所出的峰各批藥材飲片都有,且含量變化相對(duì)較小,可認(rèn)為是澤瀉的主要成分之一。發(fā)現(xiàn)選用薄層顯色專屬性強(qiáng),靈敏度高,操作簡(jiǎn)便,穩(wěn)定性好。4.2重質(zhì)醇的hplc-elsd法檢測(cè)目前,大多研究者采用HPLC法測(cè)定澤瀉藥材或飲片中有效成分含量的方法來(lái)評(píng)價(jià)澤瀉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。文紅梅、李偉等對(duì)澤瀉不同采收期23-乙酰澤瀉醇B的含量采用HPLC法進(jìn)行了考察。流動(dòng)相為乙腈-水(65∶35),紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為208nm,柱溫25℃,ATTN:5。4月份23-乙酰澤瀉醇B的含量明顯增加,故4月份為最佳采收期。周壇樹、施大文用HPLC法對(duì)不同產(chǎn)地澤瀉中23-乙酰澤瀉醇B和24-乙酰澤瀉醇C進(jìn)行了測(cè)定。23-乙酰澤瀉醇B的HPLC流動(dòng)相為甲醇-水(85∶15),紫外檢測(cè)波長(zhǎng)210nm;24-乙酰澤瀉醇C的HPLC流動(dòng)相為甲醇-水(70∶30),紫外檢測(cè)波長(zhǎng)245nm。檢測(cè)結(jié)果為建澤瀉23-乙酰澤瀉醇B含量最大,川澤瀉24-乙酰澤瀉醇C含量最大。文紅梅、彭國(guó)平等對(duì)澤瀉中兩種主要成分澤瀉醇24-乙酰澤瀉醇A和23-乙酰澤瀉醇B采用HPLC法進(jìn)行了測(cè)定。流動(dòng)相采用乙腈-水(65∶35),紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為208nm,溫度25℃,TTN∶5。結(jié)果表明,福建、江西澤瀉中澤瀉醇23-乙酰澤瀉醇B含量較高,而四川、廣西澤瀉中澤瀉醇24-乙酰澤瀉醇A含量較高。鞏麗萍、王少云等用高效液相色譜-蒸發(fā)光散射法測(cè)定了澤瀉中23-乙酰澤瀉醇B含量。流動(dòng)相為醇-水(84∶16),體積流量為0.5ml/min,柱溫為室溫,漂移管溫度為60℃,霧化氣體流速為1.4L/min。測(cè)定結(jié)果表明,不同產(chǎn)地澤瀉中23-乙酰澤瀉醇B的量差異較大,藥材與飲片中23-乙酰澤瀉醇B的量差異顯著。張瑩等采用HPLC-ELSD法鑒別了澤瀉藥材飲片。柱溫為室溫,流動(dòng)相為乙腈-水(4∶1),流速為0.5mL/min,ELSD氣體流速為2.25L/min,漂移管溫度為70℃。結(jié)果表明,在地道的建澤瀉飲片中,含有澤瀉醇24-乙酰澤瀉醇A和23-乙酰澤瀉醇B;市售澤瀉飲片中,只含有24-乙酰澤瀉醇A;而澤瀉對(duì)照藥材中,只含有23-乙酰澤瀉醇B。該法可清楚區(qū)分地道建澤瀉飲片、澤瀉對(duì)照藥材和市售澤瀉藥材飲片。4.3測(cè)定藥物樣品的色譜檢測(cè)現(xiàn)代澤瀉指紋圖譜的研究多用HPLC法對(duì)樣品進(jìn)行色譜分析,得到的色譜峰較多。許枬、楊松松等人做了澤瀉指紋圖譜的初步研究,取24-乙酰澤瀉醇A、澤瀉醇A、25an-thyl-alisolA各5mg,加甲醇使溶解,并定容于5ml量瓶中,作為對(duì)照品溶液。取澤瀉藥材2g,醋酸乙酯超聲提取30min,加5%碳酸氫鈉萃取3次,棄去,醋酸乙酯層回收溶媒。殘?jiān)蛹状际谷芙?并定容于5ml量瓶中,作為供試品溶液。以210nm作為測(cè)定波長(zhǎng),甲醇-乙腈-水(30∶20∶20)為流動(dòng)相,對(duì)10批樣品的色譜峰進(jìn)行比較,每個(gè)樣品比較11個(gè)峰。蔣軼倫等又做了澤瀉的液相色譜指紋圖譜研究,分別準(zhǔn)確稱取24-乙酰澤瀉醇A和23-乙酰澤瀉醇B對(duì)照品,用甲醇溶解定容。制成24-乙酰澤瀉醇A1.350mg/mL、23-乙酰澤瀉醇B1.330mg/mL的對(duì)照品溶液。取澤瀉藥材2.000g,乙酸乙酯超聲提取2次,每次30min。離心后上清液加0.005g/mL碳酸氫鈉萃取3次,棄去水層,乙酸乙酯回收溶質(zhì),殘?jiān)蛹状际谷芙?定容于5mL容量瓶中。用0.45μm膜過(guò)濾,作為供試品溶液。色譜條件為溫度20℃,檢測(cè)波長(zhǎng)208nm,乙腈-水為梯度流動(dòng)相,色譜圖光譜采集范圍為200-800nm。通過(guò)實(shí)