第一章基因工程復(fù)習(xí)

1、思考：什么是基因？

2、基因的基本功能是什么？基因是一段有遺傳功能的核酸，大多數(shù)生物是一段DNA，少數(shù)是一段RNA。傳遞遺傳信息表達(dá)遺傳信息基因工程是狹義的遺傳工程，但廣義的遺傳工程泛指把_______________________（細(xì)胞核、染色體、脫氧核糖核酸等）____________________________并使這種遺傳物質(zhì)所帶的遺傳信息在________________。基因工程的核心是構(gòu)建__________________，因此，早期也將基因工程稱為_______________技術(shù)。什么是基因工程一種生物的遺傳物質(zhì)移到另一種生物的細(xì)胞中去受體細(xì)胞中表達(dá)重組DNA分子重組DNA基因工程的理論基礎(chǔ)是：____________是生物的遺傳物質(zhì)，_____________結(jié)構(gòu)的確立，_________________的認(rèn)定；基因工程的技術(shù)保障是__________________、_______________和_________________的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用什么是基因工程DNADNA雙螺旋限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶質(zhì)粒載體遺傳信息傳遞方式

一、限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶是能夠識別和切割DNA分子內(nèi)一小段特殊核苷酸序列的酶。EcoRI

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?；虿僮鞯墓ぞ吡姿岫ユI限制性核酸內(nèi)切酶切割部位限制酶切割的是哪個部位的鍵?限制性核酸內(nèi)切酶2

識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，其長度一般為4～6個核苷酸對，且具有雙重旋轉(zhuǎn)對稱的結(jié)構(gòu)形式。具有特定的酶切位點連接的部位磷酸二酯鍵（梯子的扶手）而不是氫鍵（梯子的踏板）。無特異性二、DNA連接酶

DNA限制酶作用于磷酸二酯鍵

DNA連接酶作用于磷酸二酯鍵

DNA聚合酶作用于磷酸二酯鍵

DNA解旋酶作用于氫鍵幾種酶的比較：DNA連接酶：主要是連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵，起連接作用，在基因工程中起作用。耗能。DNA聚合酶：主要是連接DNA片段與單個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵，在DNA復(fù)制中起做用。耗能。DNA限制酶：一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，是特異性地切斷DNA鏈中磷酸二酯鍵，可能耗能。解旋酶：是一類解開氫鍵的酶，耗能。作用基因工程的載體---將外源基因送入受體細(xì)胞。常用的運載體有：質(zhì)粒噬菌體動植物病毒等三、質(zhì)粒質(zhì)粒是能夠自主復(fù)制的雙鏈環(huán)狀DNA分子，是一種特殊的遺傳物質(zhì)。（存在細(xì)菌和酵母菌中）最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒質(zhì)粒（最常用的載體）1、能進(jìn)入受體細(xì)胞，且無害2、能自主復(fù)制3、有限制酶切點4、具有標(biāo)記基因一、基因工程的原理原理：讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定和高效地表達(dá)。剪切拼接導(dǎo)入表達(dá)（一）獲得目的基因（二）形成重組DNA分子（三）將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞（四）目的基因的檢測和表達(dá)第2節(jié)基因工程的原理和技術(shù)1、篩選含有目的基因的受體細(xì)胞2、目的基因的表達(dá)步驟一獲得目的基因人工合成利用PCR技術(shù)擴(kuò)增已知序列：從基因文庫獲得未知序列：供體細(xì)胞DNA限制酶許多DNA片段載入載體導(dǎo)入受體細(xì)胞擴(kuò)增產(chǎn)生特定性狀分離目的基因從基因文庫獲得目的基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄單鏈DNA合成雙鏈DNA（目的基因）蛋白質(zhì)氨基酸序列推測mRNA的核苷酸序列推測結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列化學(xué)合成目的基因人工合成法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基酸序列直接合成DNA用限制酶切割同種限制酶切斷目的基因插入質(zhì)粒切口加適量DNA連接酶形成重組DNA分子質(zhì)粒目的基因露出黏性末端露出黏性末端2.目的基因與運載體結(jié)合