脫細(xì)胞真皮基質(zhì)分析報(bào)告

前言大面積深度燒傷或其他創(chuàng)傷導(dǎo)致皮膚真皮成分缺損，通過刃厚小皮片或微粒植皮技術(shù)雖然能使創(chuàng)面愈合，但由于其缺乏真皮層，導(dǎo)致愈合后創(chuàng)面彈性差，凸凹不平，易攣縮且不耐摩擦。移植自體皮瓣或全厚及中厚皮供皮區(qū)又將形成同等程度的缺損，日后形成瘢痕。為解決這一問題，國內(nèi)外學(xué)者致力于查找一種抱負(fù)的真皮替代品。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)概述脫細(xì)胞真皮基質(zhì)〔acellulardermalmatrixADM〕是用物理、化學(xué)等方法將人或動物皮膚中的表皮層及細(xì)胞成分徹底去除僅保存真皮中含膠原網(wǎng)架的細(xì)胞外基質(zhì)。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)由于完全沒有了細(xì)胞成分和Ⅰ、Ⅱ型細(xì)胞相容性抗原的主要免疫活性,故一般不會誘發(fā)排斥反響。但脫細(xì)胞真皮基質(zhì)保存有正常膠原的三維構(gòu)造和真皮中含膠原支架的細(xì)胞外基質(zhì)能為組織細(xì)胞的再生供給一個良好的支架構(gòu)造，具有創(chuàng)面掩蓋、組織缺損填充、引導(dǎo)組織再生和支架等作用。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)中無細(xì)胞成分,免疫活性低,不會誘發(fā)免疫反響。它保留了表皮和真皮間的基底膜,移植后可形成真皮面和基底膜面?；啄っ婵芍С?jǐn)鄬悠て纳L,這對表皮細(xì)胞的增殖分化以及移植皮的外觀和功能起著重要作用,同時也有利于種子細(xì)胞的點(diǎn)附增殖等。真皮面利于脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的快速血管化,為成纖維細(xì)胞的增殖供給支架,有助于膠原成分改建,促使成纖維細(xì)胞排列分布規(guī)章,形成構(gòu)造形態(tài)正常的膠原纖維,此細(xì)胞外基質(zhì)蛋白也可以促進(jìn)表皮細(xì)胞的再生。因此,脫細(xì)胞真皮基質(zhì)可作為真皮替代品,在為燒傷創(chuàng)面供給真皮的同時,可明顯削減瘢痕形成。是一種抱負(fù)的真皮替代材料。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備方法依據(jù)來源的不同脫細(xì)胞真皮基質(zhì)分為異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)〔來源主要為尸體皮〕和異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)〔來源為動物皮以豬皮和牛皮為主〕兩種。制備過程都是盡可能的去除具有抗原性的細(xì)胞(表皮細(xì)胞、毛囊、皮維成分和組織根本構(gòu)造。早期人們曾利用反復(fù)凍融法、胰酶消化法等制備ADMADM移植后引起前ADM的制備方法主要有DispaseII-Triton法、高滲鹽-SDS法、高滲鹽-酶消化法、NaOH消蝕法等。只要條件把握適度,這些方法均可制備出符合條件的ADMDispaseII-Triton法皮膚標(biāo)本先經(jīng)DispaseII處理U/ml溶液,448h),再經(jīng)TritonX2100處理%溶液,室溫下作用48h)可將皮膚中的細(xì)胞徹底脫除。DispaseII主要分解IV型膠原和纖維粘蛋白,能裂解基底膜中的致密層。DispaseII是一種快速有效的分別表皮與真皮的酶。標(biāo)本經(jīng)DispaseII處理后,表皮真皮間的基底膜及皮膚附屬器官四周結(jié)締組織成分均被破壞。DispaseII同時也破壞了纖維細(xì)胞和結(jié)締組織基質(zhì)間的連結(jié),更有利于TritonX2100的浸透。TritonX2100TritonX2100中的疏水端也能和基底膜構(gòu)造破壞大,不利于上皮細(xì)胞底黏附生長。高滲鹽-SDS法皮膚標(biāo)本先經(jīng)高滲鹽作用(1mol/LNaCl37℃下作用24h)使錨著細(xì)絲與表皮基內(nèi)幕胞的半橋粒分別,從而完整地去除表皮。然后在未轉(zhuǎn)變膠原構(gòu)造的狀況下,再用破膜劑十二烷基硫酸鈉%SDS溶液,室溫下作用1h皮膚標(biāo)本中的細(xì)胞脫除。該方法細(xì)胞脫除也比較徹底,基底膜完整保存,但真皮中Ⅳ型膠原、纖維結(jié)合素、彈力素、HLA-DR等含量較多,因此具有相對高的抗原性。高滲鹽-NaOH消蝕法該方法利用高滲鹽(1mol/LNaCl37℃下作用24h)去除表皮，同時再利用NaOH(低濃度溶液,室溫下作用18h)中堿離子的吸水作用奪取組織細(xì)胞的水分,使細(xì)胞脫水而死亡;最終使用超聲清洗儀清洗除去細(xì)胞。該方法細(xì)胞徹底脫除,膠原纖維構(gòu)造完整,排列較正常松散。但要留意把握NaOH的作用時間,假設(shè)過長(如:36h)會使膠原變性,蛋白裂解,得到的是真皮皮漿。該方法用胰蛋白酶%溶液,4℃下作用24h),接著用TritonX2100%溶液,室溫下作用8h),最終用Dispase(560units/L,4℃下作用24h)。Ray7]18h)和SDS用12h),然后用胰蛋白酶再作用12h,Dispase(560units/L,25℃下作用12h),制得的基質(zhì)均無細(xì)胞成分,膠原支架完整。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的制備流程脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的作用機(jī)制脫細(xì)胞真皮基質(zhì)保存了真皮與表皮之間的基底膜,故在應(yīng)用時可形利于組織工程中種子細(xì)胞或培育的角朊細(xì)胞的黏附、擴(kuò)展等。真皮面有利于ADM在宿主內(nèi)快速血管化,為成纖維細(xì)胞的生長供給良好的支架,有助于對脫細(xì)胞真皮膠原成分的改建,促使成纖維細(xì)胞形成形態(tài)構(gòu)造及排列分布正常的膠原纖維,還具有調(diào)整、誘導(dǎo)、促進(jìn)宿主細(xì)胞長入,促進(jìn)纖維細(xì)胞增生、生血管和上皮形成等作用。真皮成分的多寡是創(chuàng)面愈合后彈性、外觀是否良好的重要因素,瘢痕形成的量及攣縮程度與所植皮片中真皮的基質(zhì)經(jīng)改建后即成為瘢痕組織。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)作為一種真皮代替物能被宿主接納,并被改建成為自體真皮組織,削減皮片移植后的瘢痕形成及攣縮,能與全厚皮片移植后的效果相媲美。脫細(xì)胞真皮基質(zhì)的臨床應(yīng)用范圍1.腹壁外科嬰幼兒腹壁缺損 〔2〕嵌頓性或絞窄性腹壁疝〔3〕腹壁缺損伴有污染或感染創(chuàng)面〔4〕食道裂孔疝〔5〕盆底腹膜修復(fù) 〔6〕腹腔室間隔綜合癥腹腔關(guān)閉全腹壁切除或缺損的腹壁再造〔8〕其他簡潔的腹壁修復(fù)狀況2.泌尿外科長段尿道狹窄或缺損、先天性尿道下裂、尿瘺、膀胱擴(kuò)容、腎組織修補(bǔ)3.結(jié)直腸、肛門外科非急性期的單純性高位和低位肛瘺 〔2〕陰道前庭瘺(3)對肛門括約肌功能影響大的肛瘺和肛周感染〔4〕管狀消化道瘺4口腔科〔1〕口腔黏膜缺損〔2〕牙周手術(shù)治療〔3〕腭裂修復(fù)術(shù)中修復(fù)軟組織缺損整形外科燒傷創(chuàng)面及燒傷后期瘢痕攣縮畸形的修復(fù)(2)慢性創(chuàng)面及病理性瘢痕的修復(fù)(3)耳鼻喉科〔1〕鼓膜穿孔的修補(bǔ)〔2〕鼻中隔穿孔的修補(bǔ)〔3〕咽部缺損的修復(fù)〔4〕腦脊液鼻漏修補(bǔ)及蝶鞍的修復(fù)產(chǎn)品性能要求和技術(shù)可行性檢測標(biāo)準(zhǔn)外觀 目測規(guī)格型號 企標(biāo)單位面積重量 企標(biāo)酸堿度企標(biāo)枯燥失重企標(biāo)耐溫性企標(biāo)熾灼殘?jiān)髽?biāo)重金屬含量GB/T降解時間GB/T抑菌性能GB/T致熱性GB/TF生皮內(nèi)反響試驗(yàn)GB/T物遲發(fā)型超敏反GB/T學(xué)應(yīng)評細(xì)胞毒性試驗(yàn)GB/T價全身毒性〔急性〕

GB/T亞慢性毒性 GB/T遺傳毒性 GB/T植入 GB/T血液相容性 GB/T無菌試驗(yàn) GB/T求。從質(zhì)量把握角度，可從有脫細(xì)胞真皮生產(chǎn)力氣的廠家選購真皮材料，依據(jù)公司制定的原材料檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)對選購的真皮材料質(zhì)量進(jìn)展把握，質(zhì)量合格方能進(jìn)入生產(chǎn)，然后利用公司現(xiàn)有分切設(shè)備，包裝等設(shè)備進(jìn)展生產(chǎn)，經(jīng)過滅菌后依據(jù)產(chǎn)品企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格前方能出廠銷售。從關(guān)鍵技術(shù)把握角度，可對關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)進(jìn)展設(shè)定，要求供給商到達(dá)選購設(shè)定的性能技術(shù)要求，并制定原材料檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，依據(jù)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)對選購的真皮材料進(jìn)展關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)的檢驗(yàn)，檢驗(yàn)合格前方能入庫生產(chǎn)。因此，終上所述，可吸取止血紗布技術(shù)可行，產(chǎn)品質(zhì)量可控。國內(nèi)外上市脫細(xì)胞真皮基質(zhì)現(xiàn)況LifeCell公司推出的Allodern，該產(chǎn)品的異體真皮來源于尸體皮。臨床上應(yīng)用于燒傷，瘢痕切除創(chuàng)面取得良好的效果。而國內(nèi)上市的產(chǎn)品主要有北京桀亞萊福生物技術(shù)生產(chǎn)的J-1型異體脫細(xì)胞真皮基質(zhì)和北京清源偉業(yè)生物組織工程科技生產(chǎn)的脫細(xì)胞異體真皮基質(zhì)醫(yī)用組織補(bǔ)片(商品名稱:瑞諾)。雖然異體脫細(xì)胞基質(zhì)在臨床上的應(yīng)用效果較好但也存在著不行無視的不足〔1〕異體皮供體來源有限；〔2〕有傳播人類疾病的可能性；〔3〕存在著倫理問題；〔4〕需要低溫保存，保存運(yùn)輸不便利。而目前，異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在國內(nèi)以上市的有：北京瑞克倍爾醫(yī)療器械出產(chǎn)的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料，該產(chǎn)品以豬皮為主要原材料，承受型物理、化學(xué)及生化等方法除去了豬皮內(nèi)的各種雜質(zhì)，完整地保存了真皮細(xì)胞外基質(zhì)的形態(tài)，保持原有的三維1234.中厚皮供皮區(qū)創(chuàng)面；5.微粒皮移植手術(shù)創(chuàng)面，6.燒傷創(chuàng)面、切削痂后的創(chuàng)面。江蘇優(yōu)創(chuàng)生物醫(yī)學(xué)科技生產(chǎn)的異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷與脫細(xì)胞等工藝制備而成具有三維網(wǎng)狀構(gòu)造，主要用于淺Ⅱ度燒(燙)傷創(chuàng)面、供皮區(qū)創(chuàng)面、深度燒傷切(削)痂創(chuàng)面，肉芽創(chuàng)面等創(chuàng)面的掩蓋治療。江陰奔翔生物科技生產(chǎn)的豬皮脫細(xì)胞真皮基質(zhì)敷料，同樣也是以豬皮為原料經(jīng)純化處理冷凍枯燥后成型加工而成，該產(chǎn)品適用于Ⅱ度燒傷創(chuàng)面、供皮區(qū)創(chuàng)面掩蓋。于Ⅱ度燒傷創(chuàng)面、供皮區(qū)創(chuàng)面掩蓋?！?〕煙臺正海生物技術(shù)生產(chǎn)的口腔修復(fù)膜(商品名：海奧)〔4〕煙臺正海生物技術(shù)生產(chǎn)的口腔修復(fù)膜(商品名：海奧)和皮膚修復(fù)膜(商品名：海孚)兩者均為牛的皮膚組織經(jīng)一系列處理后制備1.軟組織淺層缺損的修復(fù)。2.腮腺手術(shù)中預(yù)防味覺出汗(Frey`s