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、原核生物與真核生物的基因結(jié)構(gòu)、原核生物基因結(jié)構(gòu)一非編碼區(qū)→1←——編碼區(qū)—1←非編碼區(qū),啟動(dòng)子廣1ATGTGCACGTAGTTA鐵止ATACACGTGCATCAAT.I.編碼區(qū)上游編碼蛋白質(zhì)編碼區(qū)下游調(diào)控遺傳信息的表達(dá)(調(diào)控程序)(1)編碼區(qū)和非編碼區(qū)能編碼蛋白質(zhì)的區(qū)段叫做編碼區(qū);不能編碼蛋白質(zhì)的區(qū)段叫做非編碼區(qū),在非編碼區(qū)上有調(diào)控遺傳信息表達(dá)的核苷酸序列非編碼區(qū)→1編碼區(qū)非編碼區(qū)啟動(dòng)子cce【止子RNA聚合酵)AUGUGCACGUAGUUA(2)啟動(dòng)子、RNA聚合酶、終止子啟動(dòng)子:位于基因首端一段能與RNA聚合酶結(jié)合并能起始mRNA合成的序列。沒(méi)有啟動(dòng)子,基因就不能轉(zhuǎn)錄。RNA聚合酶能夠識(shí)別啟動(dòng)子上的結(jié)合位點(diǎn)并與其結(jié)合的一種蛋白質(zhì)終止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片斷它能阻礙RNA聚合酶的移動(dòng),并使其從DNA模板鏈上脫離下來(lái),使轉(zhuǎn)錄終止。2、真核生物的基因結(jié)構(gòu)一非編碼區(qū)→1編碼區(qū)←非編碼區(qū)編碼蛋白質(zhì)啟動(dòng)子終止子外顯子內(nèi)含子(能編碼蛋白質(zhì))(不能編碼蛋白質(zhì))(1)外顯子和內(nèi)含子外顯子能編碼蛋白質(zhì),內(nèi)含子不能編碼蛋白質(zhì)。(2)非編碼區(qū)和非編碼序列非編碼序列包括非編碼區(qū)和編碼區(qū)的內(nèi)含子非編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼廢編碼區(qū)上游編碼區(qū)下游啟動(dòng)子終止子與RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)編碼區(qū)啟動(dòng)子終止子轉(zhuǎn)錄nRNA前體外顯子加工↓成熟mRNA內(nèi)含子翻譯肽0▲◆。◆①相同點(diǎn):都是由能夠編碼蛋白質(zhì)的編碼區(qū)和具有調(diào)控作用的非編碼區(qū)構(gòu)成。②不同點(diǎn):原核細(xì)胞基因的編碼區(qū)是連續(xù)的;真核細(xì)胞的編碼區(qū)是間隔的,不連續(xù)的。二、基因工程的基本操作程序閱讀教材P8-12,回答下列相關(guān)問(wèn)題:1、基因工程的基本操作流程圖:生物材料專(zhuān)錄限制窖包扦第二非植物組織培養(yǎng)等(一)目的基因的獲取生物材料→分離DNA6NA片段基因組文庫(kù)①?gòu)幕蛭膸?kù)分離MRNA→cDNA、cDNA文庫(kù)中獲取②利用PcR技術(shù)擴(kuò)增③化學(xué)方法人工合成1、從基因文庫(kù)中直接獲取:(1)基因文庫(kù)的概念:見(jiàn)P(2)基因文庫(kù)的分類(lèi):(按外源DNA片段的來(lái)源分類(lèi))基因組DNA文庫(kù):含有一種生物的全部基因部分基因文庫(kù):只包含了一種生物的部分基因,如:cDNA文庫(kù)(3)建立基因文庫(kù)的目的在未知基因序列的情況下,便于尋找并獲得所需的大量的目的基因。(4)基因文庫(kù)的構(gòu)建方法:〔①直接分離法基因組文庫(kù)②反轉(zhuǎn)錄法-cDNA基因文庫(kù)的構(gòu)建方法之一:①直接分離法鳥(niǎo)槍法原核生物的基因組文庫(kù)用喝制切成多村斷提取某種生物的全部DNA用適當(dāng)?shù)南拗泼盖卸ù笮〉腄MA片段將DNA片與載體連接導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存基因組文庫(kù)馨基因文庫(kù)的構(gòu)建方法之二:反轉(zhuǎn)錄法:一主要是真核生物的cDNA原核細(xì)胞的基因:真核細(xì)胞的基因在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)轉(zhuǎn)在細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄mRNA在細(xì)胞質(zhì)中將mRNA分離并加入反轉(zhuǎn)錄酶DNA單鏈合成第二條DNA鏈CDNA基因文庫(kù)的構(gòu)建方法基因組文庫(kù):一般針對(duì)原核生物的基因,因?yàn)榛蛏俨糠只蛭膸?kù):一般針對(duì)真核生物的基因,如cDNA文庫(kù)文庫(kù)類(lèi)型cDNA文庫(kù)基因組文庫(kù)文庫(kù)大小基因中啟動(dòng)子基因中內(nèi)含子小無(wú)無(wú)大有有基因多少某種生物的部分基因某種生物的全部基因物種之間的基可以部分基因可以因交流說(shuō)明基因文庫(kù)的組建過(guò)程就包含基因工程的基本操作步驟。從基因文庫(kù)中獲取目的基因的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,缺點(diǎn)是工作量大,具有一定的盲目性.基因組AJ含目的基DNAl的基因I提取構(gòu)建文庫(kù)」篩選國(guó)因的菌株分離母菌cDNA|CJ含目的基mRNAHcDNA提取構(gòu)建文庫(kù)」篩選因的菌株分離目
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