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電子顯微鏡技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用南醫(yī)大電鏡室透射電子顯微鏡
TransmissionElectronMicroscope,TEM透射電鏡外觀一、結(jié)構(gòu)(一)照明系統(tǒng)1.電子槍:陰極:0.1-0.5nm鎢絲,V型陽(yáng)極:帶孔的金屬圓盤
-10—-120kv
柵極:控制電子束2.聚光鏡(1-3個(gè)活動(dòng)光闌):200、300、400um控制照明束的強(qiáng)弱(二)樣品室(三)成像系統(tǒng):物鏡、中間鏡、投影鏡
(四)觀察室、底片室透射電子顯微鏡剖面圖透射電鏡的成像原理
高速電子與樣品中原子核發(fā)生碰撞,從而發(fā)生散射現(xiàn)象。標(biāo)本厚度、密度、電子束受阻情況不同,透過標(biāo)本電子束流就有多少的區(qū)別,熒光屏上出現(xiàn)明暗不同影像。標(biāo)本的密度、厚度與電子的散射作用成正比。標(biāo)本中電子散射得少,透過的部分就多----標(biāo)本亮;反之亦然。電子產(chǎn)生與樣品發(fā)生的多種作用入射電子束二次電子俄歇電子背散射電子特征X射線散射電子散射電子透射電子樣品二、超薄切片技術(shù)
受電子束穿透能力的限制,標(biāo)本切成厚度小于0.1μm稱超薄切片,常用厚度為50-70nm(在光視野下呈現(xiàn)灰色)TEM樣品制備取材固定脫水浸透、包埋超薄切片染色三、組織、細(xì)胞、細(xì)胞器的電鏡表現(xiàn)膠原纖維骨骼肌細(xì)胞突觸有髓神經(jīng)纖維四、透射電鏡在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用病毒、微生物:負(fù)染技術(shù):2%~4%PTA,PH7.0,稀釋注意點(diǎn):1.定位性、特征性、重復(fù)性、
排列性,忌偶見性
2.偽性:SER、鉛污染、核內(nèi)假包含體、初級(jí)溶酶體、絨毛突起甲型流感病毒負(fù)染,圖示一條完整的絲狀體和一個(gè)小球狀體乙型肝炎抗原負(fù)染細(xì)胞核內(nèi)結(jié)晶狀排列的腺病毒粘液病毒金黃色葡萄球菌120,00
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