藥學(xué)研究申報(bào)資料

目錄1品種概述12變更事項(xiàng)及變更因素12.1變更事項(xiàng)12.2變更內(nèi)容及變更理由12.3變更的合理性評價(jià)和風(fēng)險(xiǎn)分析23變更前后輔料有關(guān)狀況及其質(zhì)量原則24制劑處方研究34.1濕法制粒處方研究34.1.1采用清膏濕法制粒34.1.2采用噴霧粉濕法制粒44.2流化床一步制粒成型研究104.2.1噴霧速率考察104.2.2霧化壓力考察114.2.3小試樣品的制備115生產(chǎn)工藝研究與驗(yàn)證125.1濕法制粒工藝研究125.2流化床一步制粒工藝研究與驗(yàn)證135.2.1變更后XXXX工藝流程圖135.2.2中試工藝驗(yàn)證樣品生產(chǎn)工藝145.2.33批中試工藝驗(yàn)證生產(chǎn)信息155.2.4重要的生產(chǎn)設(shè)備165.2.5各工序質(zhì)量控制點(diǎn)165.2.6中間產(chǎn)品的控制175.2.7三批中實(shí)驗(yàn)證成果和評價(jià)175.3變更前后的制備辦法比較186包裝材料187XXXX質(zhì)量研究197.1性狀197.2鑒別197.2.1儀器與試藥197.2.2丹參薄層鑒別207.2.3川芎薄層鑒別247.2.4葛根素薄層鑒別287.3檢查327.3.1水分327.3.2溶化性337.3.3粒度337.3.4微生物程度檢查337.4含量測定357.4.1儀器與試藥357.4.2丹參含量測定辦法學(xué)驗(yàn)證357.4.3葛根含量測定辦法學(xué)驗(yàn)證447.4.4XXXX(未添加蔗糖)含量測定538變更后持續(xù)3批樣品的檢查報(bào)告書548.1樣品信息548.2檢查成果549穩(wěn)定性研究559.1實(shí)驗(yàn)儀器559.2對照品和對照藥材559.3實(shí)驗(yàn)樣品569.4研究內(nèi)容569.5研究結(jié)論579.6穩(wěn)定性數(shù)據(jù)589.6.1加速實(shí)驗(yàn)589.6.2長久實(shí)驗(yàn)621、品種概述1.1藥品名稱藥品名稱：XXXX1.2規(guī)格：每袋裝10g1.3同意文號：國藥準(zhǔn)字Z62041.4同意時(shí)間：7月101.5執(zhí)行原則國家藥品原則1.6使用期：36個(gè)月1.7歷次補(bǔ)充申請及近來一次再注冊的狀況：補(bǔ)充申請：9月5日：公司名稱由“XXXX特種藥材飲片生產(chǎn)有限公司”變更為“XXXX藥業(yè)有限公司”，生產(chǎn)地址不變。再注冊狀況：7月24日，獲得甘肅省食品藥品監(jiān)督管理局“藥品再注冊批件（批件號：）”，藥品同意文號使用期：7月23日。2、變更事項(xiàng)及變更因素2.1變更事項(xiàng)本次XXXX補(bǔ)充申請為“變更藥品處方中已有藥用規(guī)定的輔料”，即輔料由“蔗糖”變更為“糊精、甜菊素”。涉及到的關(guān)聯(lián)變更涉及：增加藥品規(guī)格，即在原規(guī)格“每袋裝10g”基礎(chǔ)上，增加“每袋裝6g（未添加蔗糖）”。2.2變更內(nèi)容及變更理由本品變更前后的重要變化涉及：批量、輔料種類及用量。生產(chǎn)設(shè)備、制備辦法、工藝參數(shù)等均未變化。XXXX變更前、后重要變化及因素變更內(nèi)容變更前變更后因素批量8萬袋1萬袋變更研究階段的批量較小，生產(chǎn)所使用的設(shè)備能滿足該批量規(guī)定。輔料種類及用量蔗糖（適量）制得1000g糊精（適量）、甜菊素（2.4g），制得600g根據(jù)臨床需求，由“有糖顆?！弊兏鼮椤盁o糖顆粒”，通過處方研究，擬定了變更后的輔粒用量和種類。規(guī)格每袋裝10g每袋裝6g變更前后輔料用量不同，規(guī)格發(fā)生了變更，但每袋所含生藥量沒有變化。2.3變更的合理性評價(jià)和風(fēng)險(xiǎn)分析XXXX（添加蔗糖）的輔料為蔗糖，因藥品的異味和苦味，其中蔗糖用量大，易吸潮，不適宜用于老年人、糖尿病人等禁糖患者，臨床應(yīng)用局限。為克服中藥顆粒劑因含糖而致的多種弊病，可對制劑進(jìn)行改善，替代輔料蔗糖，研發(fā)為中藥無糖顆粒劑。其一，解除了糖尿病患者、肥胖的群體或潛在的代謝綜合征患者等人群的用藥限制，制劑得以更廣泛的應(yīng)用于各領(lǐng)域，并更加好的服務(wù)與患者；其二，解決了顆粒中蔗糖易吸潮、軟化的問題，無糖顆粒劑使藥品更利于保存。傳統(tǒng)含糖顆粒改制為無糖劑型后的優(yōu)良特點(diǎn)，使無糖顆粒劑受到市場及臨床的青睞。本品變更的輔料為慣用輔料（糊精、甜菊素），含有法定原則，符合輔料管理規(guī)定，且輔料變更幅度符合各輔料允許使用范疇。這類變更不會引發(fā)藥用物質(zhì)基礎(chǔ)的變化，對藥品的吸取、運(yùn)用不會產(chǎn)生明顯影響，不會引發(fā)安全性、有效性的明顯變化。根據(jù)《已上市中藥變更研究技術(shù)指導(dǎo)原則（一）》，本次變更屬Ⅰ類變更。經(jīng)檢索國家藥品監(jiān)督管理局網(wǎng)站國產(chǎn)藥品數(shù)據(jù)庫，XXXX有“不含蔗糖”的同意文號，如：北京亞東生物制藥（安國）有限公司，規(guī)格：8g；河南興源制藥有限公司，規(guī)格：5g；哈爾濱大洋制藥股份有限公司，規(guī)格：6g。通過對變更前后產(chǎn)品的質(zhì)量和穩(wěn)定性研究比較，變更后的產(chǎn)品與變更前產(chǎn)品質(zhì)量無明顯差別。總而言之，本次輔料的變更是合理可行，對本品的產(chǎn)品有效性、安全性不會產(chǎn)生影響。3.變更前后輔料有關(guān)狀況及其質(zhì)量原則原輔料來源、同意文號及執(zhí)行原則輔料生產(chǎn)商同意文號執(zhí)行原則產(chǎn)品登記號變更前蔗糖湖南九典宏陽制藥股份有限公司湘食藥輔準(zhǔn)字F0025ChP四部/變更后糊精遼寧東源藥業(yè)有限公司/ChP四部F甜菊素曲阜圣仁制藥有限公司/ChP四部F糊精、甜菊素輔料資質(zhì)文獻(xiàn)見附件。4、制劑處方研究根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局《藥品注冊管理措施》及《已上市中藥變更研究的技術(shù)指導(dǎo)原則（一）》中有關(guān)規(guī)定，在原XXXX的煎煮、濃縮、干燥等工藝不變的基礎(chǔ)上，通過一系列優(yōu)選實(shí)驗(yàn)，篩選輔料的種類和用量，擬定XXXX（未添加蔗糖）的制劑處方。在制劑處方研究過程中，采用顆粒劑慣用的濕法制粒和流化床一步制粒2種方式進(jìn)行研究。4.1濕法制粒處方研究選擇顆粒劑慣用輔料糊精和可溶性淀粉，設(shè)計(jì)不同的成型處方進(jìn)行輔料篩選。4.1.1采用清膏濕法制粒取處方量的藥材，加水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.08，趁熱濾過，濾液濃縮至相對密度為1.30（80℃）和1.35（80℃）的清膏。分別取不同相對密度（1.30、1.35）的XXXX清膏適量，加入不同比例的糊精，混勻，并加入適量乙醇，14目篩制粒，成果以下：糊精用量篩選實(shí)驗(yàn)成果清膏相對密度清膏：糊精清膏用量（g）糊精用量（g）乙醇用量（ml）制粒成果1.301:1.050.5550.621軟材較黏，不能制粒1:1.250.7861.042軟材較黏，制粒困難1:1.451.1071.582軟材較黏，制粒困難1:1.650.3380.553軟材黏，顆粒形狀普通1:1.854.0997.373軟材握之成團(tuán)，觸之即散，顆粒形狀較好1.351:1.240.6048.712軟材較粘，制粒困難1:1.641.0965.882軟材軟材握之成團(tuán)，觸之即散，顆粒形狀較好1:1.840.0572.112軟材較松散，顆粒細(xì)粉較多結(jié)論：根據(jù)初步實(shí)驗(yàn)探索，清膏相對密度在1.30時(shí)，清膏：糊精（1:1.8）較適宜，制成的顆粒形狀較好，經(jīng)折算XXXX的規(guī)格相稱于每袋8g；清膏相對密度在1.35時(shí)，清膏：糊精（1:1.6）較適宜，制成的顆粒形狀較好，經(jīng)折算XXXX的規(guī)格相稱于每袋7g，均未達(dá)成擬定的規(guī)格規(guī)定（不大于6g/袋）。4.1.2采用噴霧粉濕法制粒①制劑規(guī)格的擬定按5g/袋規(guī)格設(shè)計(jì)的初步研究稱取XXXX噴霧粉（批號0103，噴霧干燥制得，干膏率15.6%）23.4g，分別與26.6g糊精或可溶性淀粉混勻，以不同濃度的乙醇為潤濕劑制粒，觀察制粒的難易程度，成果以下：輔料篩選實(shí)驗(yàn)成果（規(guī)格：5g/袋）序號噴霧粉（g）糊精（g）可溶性淀粉（g）乙醇濃度（%）制粒狀況123.4526.68/55軟材較黏，制粒困難223.44/26.61軟材較黏，制粒困難323.5126.71/60軟材較黏，制粒困難423.48/26.66軟材較黏，制粒困難523.4026.66/65軟材較黏，制粒困難623.49/26.65軟材較黏，制粒困難723.5226.61/70軟材較黏，制粒困難823.55/26.60軟材較黏，制粒困難923.4126.65/75軟材結(jié)小團(tuán)塊，制粒困難1023.42/26.67軟材結(jié)小團(tuán)塊，制粒困難結(jié)論：按5g/袋設(shè)計(jì)成型處方，以糊精或可溶性淀粉為輔料，用不同濃度的乙醇為潤濕劑制軟材，均結(jié)團(tuán)發(fā)黏，難以制粒，故本品不適合制備5g/袋的規(guī)格。按6g/袋規(guī)格設(shè)計(jì)的初步研究按6g/袋規(guī)格設(shè)計(jì)成型處方實(shí)驗(yàn)，稱取XXXX噴霧粉（批號0103，干膏率15.6%）23.4g，與36.6g糊精或可溶性淀粉制粒，觀察制粒的難易程度，成果以下：輔料篩選實(shí)驗(yàn)成果（規(guī)格：6g/袋）序號噴霧粉（g）糊精（g）可溶性淀粉（g）乙醇濃度（%）制粒狀況123.4736.62/50軟材黏，制粒困難223.50/36.65軟材黏，制粒困難323.4236.63/55軟材較黏，制粒困難423.46/36.69軟材較黏，制粒困難523.5136.60/60軟材握之成團(tuán)，觸之即散，顆粒形狀較好623.41/36.68軟材握之成團(tuán)，觸之即散，顆粒形狀較好723.4036.61/65軟材較松散，顆粒細(xì)粉較多823.42/36.66軟材較松散，顆粒細(xì)粉較多923.5536.62/70軟材松散，顆粒細(xì)粉多1023.43/36.61軟材松散，顆粒細(xì)粉多結(jié)論：以糊精或可溶性淀粉為輔料，使用60%的乙醇適量制粒，顆粒形狀較好，XXXX（未添加蔗糖）能夠制成6g/袋的規(guī)格。②不同處方配比（糊精和可溶性淀粉）輔料篩選根據(jù)上述6g/袋規(guī)格的處方預(yù)實(shí)驗(yàn)狀況，考察噴霧粉和不同比例的糊精和可溶性淀粉混勻，以60%的乙醇為潤濕劑制粒，以制粒狀況、溶化性、成型性、流動性、吸濕性為指標(biāo)進(jìn)行綜合評價(jià)。制粒狀況：以“揉之成團(tuán)，觸之即散”為軟材的原則，以大小均勻?yàn)闈耦w粒的指標(biāo)。溶化性：按ChP四部通則0104“顆粒劑”項(xiàng)下溶化性檢查辦法：取供試品10g，加熱水200ml，攪拌5分鐘，立刻觀察，應(yīng)全部溶化或輕微渾濁，均不得有焦屑等異物。成型性：用顆粒的成型率來測定，按ChP四部通則0982“粒度和粒度分布測定法”（第二法雙篩分法）測定，收集能通過1號篩而不能通過5號篩的顆粒稱重，按下式計(jì)算成型率，顆粒成型率=（過篩后顆粒重量/過篩前顆粒重量）×100%。流動性：顆粒流動性以休止角測定來衡量，休止角的測定采用固定漏斗法，即將3只漏斗串聯(lián)并固定于水平放置的坐標(biāo)紙上適宜高度處，使漏斗下口距坐標(biāo)紙的距離為H（1cm），小心地將樣品沿漏斗壁倒入最上面的漏斗中，直到最下面漏斗藥粉的圓錐體尖端接觸到漏斗口為止，此時(shí)由坐標(biāo)紙測出圓錐體底部的直徑R，計(jì)算出休止角（tanα=2H/R）。每個(gè)處方選用一種，測定三次，求其平均值。休止角應(yīng)控制在40o下列可滿足顆粒裝量差別的規(guī)定。吸濕性實(shí)驗(yàn)：將稱量瓶烘至恒重，冷卻后精確稱重，分別加入1.0g左右不同處方的顆粒，平鋪于瓶底，精密稱重后，放入有KNO3過飽和溶液的干燥器內(nèi)(RH=92.5%)，將稱量瓶打開，定時(shí)稱重，按下式計(jì)算吸濕百分率，吸濕率=（吸濕后顆粒重量-吸濕前顆粒重量）/吸濕前顆粒重量×100%。按表7設(shè)計(jì)的不同制劑處方配比，以60%的乙醇適量制粒，干燥，整粒，每個(gè)處方進(jìn)行3次實(shí)驗(yàn)，成果見表8、9、10。不同制劑處方配比處方號ABCDEF噴霧粉g23.423.423.423.423.423.4糊精g33.029.325.622.018.336.6可溶性淀粉g3.77.3211.014.618.3/不同處方配比的篩選實(shí)驗(yàn)成果（制粒狀況、溶化性、成型率）處方號制粒狀況溶化性成型率（%）平均成型率（%）A1軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.892.72軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定93.13軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.2B1軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定93.592.62軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定91.93軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.6C1軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定94.193.42軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定93.43軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.8D1軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.693.42軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定93.33軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定94.3E1軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.692.52軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定93.23軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定91.7F1軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定94.693.72軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定92.13軟材適宜，顆粒形狀好符合規(guī)定94.4不同處方配比的篩選實(shí)驗(yàn)成果（流動性）處方號直徑R（cm）休止角（°）平均休止角（°）A13.033.733.423.232.032.934.6B13.132.832.323.132.833.331.2C12.934.634.022.934.633.132.8D13.132.832.323.331.233.132.8E13.232.032.123.430.533.033.7F12.934.632.923.331.233.132.8各制劑處方顆粒在RH=92.5%的環(huán)境中的吸濕百分率(%)處方號2h4h6h24h48hA1.622.643.6312.5817.47B1.582.843.9312.6217.53C1.682.813.9112.7117.91D1.872.753.8312.5817.74E1.822.853.9212.2017.92F1.842.813.8912.6417.27結(jié)論：不同處方配比輔料篩選成果表明，不同比例的糊精與可溶性淀粉混勻進(jìn)行制粒，對XXXX（無糖型）的制備無明顯影響，即：各實(shí)驗(yàn)組制備的軟材適宜，顆粒形狀較好；顆粒成型率良好；溶化性符合規(guī)定；顆粒流動性好（休止角不大于40°）；吸濕性差別不大。在確保制劑質(zhì)量的前提下，應(yīng)盡量減少輔料種類及用量，以減少成本，減少服用量。糊精價(jià)格較低，且顆粒成型性好，成品顆粒水溶性好，因此，擬定本品選用糊精為制劑成型輔料。③矯味劑的篩選XXXX噴霧粉苦口難咽，為提高病人服藥的順應(yīng)性，需在成型處方中加入一定量的矯味劑。甜菊素甜度是蔗糖的200～300倍，價(jià)格是蔗糖的30倍，是慣用的無糖顆粒矯味劑，己載入ChP，其安全性高、熱量低、應(yīng)用廣泛，故選用甜菊素作為本品的矯味劑。矯味劑用量篩選實(shí)驗(yàn)：按優(yōu)選的處方，稱取噴霧粉54g，糊精約66g，分別按成型處方量的0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%加入甜菊素，混勻，用60%乙醇適量為潤濕劑，14目篩制粒，干燥，整粒。取制得的顆粒6g，溶于100ml熱水中，以口感為評價(jià)指標(biāo)，篩選適宜的矯味劑用量。甜菊糖用量考察甜菊素用量0.1%0.2%0.3%0.4%0.5%0.6%口感狀況苦微苦欠佳適宜，口感佳偏甜很甜結(jié)論：當(dāng)甜菊素的用量占成型處方量的0.4％時(shí)，甜度適宜，口感佳，因此選擇加入0.4％的甜菊素進(jìn)行矯味。④臨界相對濕度的測定(CRH)臨界相對濕度測定：在已恒重的稱量瓶底部放入厚約2mm的成品顆粒，105℃烘至恒重，精確稱量后，分別置于盛有不同濃度硫酸或不同鹽的過飽和溶液的干燥器內(nèi)（稱量瓶蓋打開），于25℃恒溫培養(yǎng)箱（HSW-250型）中保持96h后稱量，計(jì)算吸濕率，以吸濕率（％）為縱坐標(biāo)，相對濕度（％）為橫坐標(biāo)作圖，曲線兩端的切線交點(diǎn)對應(yīng)的橫坐標(biāo)即為臨界相對濕度。25℃條件下不同相對濕度的顆粒吸濕率溶液RH（%）吸濕百分率（%）平均吸濕百分率（%）54%硫酸溶液29.553.963.973.9948%硫酸溶液40.525.975.895.8144%硫酸溶液48.528.398.428.4439.5%硫酸溶液57.7012.4412.4412.43氯化鈉過飽和溶液75.2823.9823.6023.23氯化鉀過飽和溶液84.2632.1332.5232.91硝酸鉀過飽和溶液92.4840.8740.8540.83圖1.XXXX（未添加蔗糖）相對臨界濕度圖結(jié)論：由“XXXX相對臨界濕度圖”可見，XXXX的臨界相對溫度為61.0％，故在生產(chǎn)時(shí)，分裝車間的相對濕度應(yīng)控制在61.0％下列。4.2流化床一步制粒成型研究一步制粒機(jī)是一種將噴霧干燥技術(shù)和流化床技術(shù)結(jié)合為一體的新型制粒工藝設(shè)備。其原理是熱空氣從底部分布板進(jìn)入流化床制粒室，將制粒室中的粉末鼓動懸浮成流化態(tài)，并發(fā)生混勻，粘合劑在壓縮空氣的作用下霧化成細(xì)小液滴，噴灑在流化床制粒室中呈流化狀態(tài)的粉末上使之膠結(jié)成團(tuán)進(jìn)行制粒。與傳統(tǒng)的顆粒制備工藝濕法制粒相比較，一步制粒技術(shù)集傳統(tǒng)的制粒、干燥、混勻功效于一體，其優(yōu)勢在于該技術(shù)使得物料受熱均勻，有效物質(zhì)分散均勻，產(chǎn)品的產(chǎn)出率高。按“噴霧粉濕法制粒工藝（規(guī)格：6g/袋）”擬定的的輔料和用量，采用流化床一步制粒對XXXX成型制粒技術(shù)進(jìn)行研究，以期獲得工藝參數(shù)穩(wěn)定、質(zhì)量合格的產(chǎn)品。成型研究所使用的設(shè)備：重慶英格WBF-5C流化床制粒干燥機(jī)4.2.1噴霧速率考察根據(jù)變更前的XXXX的生產(chǎn)工藝規(guī)定，物料溫度控制在55~65℃，研究中通過設(shè)立進(jìn)風(fēng)溫度達(dá)成物料溫度規(guī)定。噴霧速率考察實(shí)驗(yàn)：稱取XXXX噴霧粉156g、糊精244g置于流化床中，用水作潤濕劑，采用不同的噴霧速率制粒，待顆粒成型后，繼續(xù)干燥20分鐘。流化床參數(shù)設(shè)立以下：噴霧速率：15r/min、20r/min、25r/min、30r/min進(jìn)風(fēng)溫度：90℃霧化壓力：1.0kg/cm2流化床一步制粒噴霧速率考察成果噴霧速率（r/min）噴霧粉重量（g）糊精重量（g）顆粒總重（g）粒度不合格品重量（g）成型率（%）15156.27244.12371.4272.9380.3620156.83244.51379.0646.4887.7425156.02244.75373.8123.1093.8230156.19244.13385.1474.0580.77注：成型率=（顆?？傊?不合格品重量/顆粒重量）×100%結(jié)論：當(dāng)噴霧速率在25r/min時(shí)，XXXX成品率較高，故選擇以25r/min作為小試一步制粒研究的噴霧速率。4.2.2霧化壓力考察霧化壓力考察實(shí)驗(yàn)：稱取處方量配比XXXX噴霧粉156g、糊精244g置于流化床中，用水作潤濕劑，采用不同的霧化壓力制粒，待顆粒成型后，繼續(xù)干燥20分鐘。流化床參數(shù)設(shè)立以下：霧化壓力：0.75kg/cm2、1.2kg/cm2、1.4kg/cm2進(jìn)風(fēng)溫度：90℃噴霧速率：25r/min流化床一步制粒霧化壓力考察成果霧化壓力（kg/cm2）噴霧粉重量（g）糊精用量（g）顆?？傊兀╣）粒度不合格品重量（g）成型率（%）0.75156.03244.51379.3875.7580.031.20156.44244.01368.8131.2391.531.40156.28244.72374.5263.9282.93結(jié)論：在霧化壓力為1.20kg/cm2時(shí)，顆粒成型率較好，在0.75kg/cm2時(shí)，顆粒易結(jié)塊，塌床，而1.40kg/cm2時(shí)，顆粒粉性較高，故以霧化壓力為1.20kg/cm2作為XXXX的制備工藝參數(shù)。4.2.3小試樣品的制備小試樣品制備辦法：稱取處方量配比XXXX噴霧粉234g、糊精約364g、甜菊素約2.4g置于流化床中，用水作潤濕劑，待顆粒成型后，繼續(xù)干燥20分鐘。按上述實(shí)驗(yàn)擬定的流化床參數(shù)設(shè)立：進(jìn)風(fēng)溫度：90℃噴霧速率：25r/min霧化壓力：1.20kg/cm2流化床一步制粒三批小試樣品考察成果批號噴霧粉重量(g)糊精用量(g)甜菊素用量(g)顆?？傊?g)粒度不合格品重量(g)成型率（%）水分(%)休止角溶化性0308-1234.01363.692.51573.1744.6092.221.4729°符合規(guī)定0308-2234.24363.612.43581.0634.9393.991.6528°符合規(guī)定0308-3234.17363.642.49579.2236.3293.731.6029°符合規(guī)定結(jié)論：3批小試樣品顆粒成型率良好；水分符合顆粒劑規(guī)定；溶化性均符合顆粒劑規(guī)定；休止角均在40°下列，流動性較好。實(shí)驗(yàn)成果表明：一步制粒能夠滿足制備XXXX（未添加蔗糖）的規(guī)定。5、生產(chǎn)工藝研究與驗(yàn)證按上述優(yōu)選出的制備濕法制粒和流化床一步制粒辦法進(jìn)行中試生產(chǎn)，成果表明采用流化床一步制粒方式生產(chǎn)XXXX（未添加蔗糖），工藝設(shè)計(jì)合理，含有可重復(fù)性和易操作性，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可控，可將其作為本品的成型工藝。5.1濕法制粒工藝研究取XXXX噴霧粉（批號0103，干膏率15.6%）、糊精置槽形混合機(jī)（CH-200型）中，混勻，加入60%乙醇適量制成軟材，制粒，于鼓風(fēng)干燥箱55～65℃干燥，用振蕩篩整粒。濕法制粒中試生產(chǎn)狀況生產(chǎn)批號0401批量1萬袋物料用量物料名稱?物料編號/批號?配料量??通脈噴霧粉030425kg糊精F-0135kg60%乙醇/適量重要生產(chǎn)設(shè)備設(shè)備名稱設(shè)備型號生產(chǎn)廠家槽形混合機(jī)CH-200常州品正干燥設(shè)備有限公司搖晃顆粒機(jī)LYK-160D重慶市科旭制藥機(jī)械設(shè)備制造有限公司鼓風(fēng)干燥機(jī)LGL-120重慶市科旭制藥機(jī)械設(shè)備制造有限公司生產(chǎn)數(shù)據(jù)顆?？傊?0.01kg合格顆粒重量（整粒后）41.04kg收率68.4%結(jié)論：在制粒過程中，軟材攪拌時(shí)間稍長，軟材會發(fā)粘，經(jīng)搖晃式制粒機(jī)制粒困難，粘網(wǎng)，且干燥過程中存在粘連成餅的現(xiàn)象，成品顆粒收率低，因此，擬定本品成型工藝不采用濕法制粒。5.2流化床一步制粒工藝研究與驗(yàn)證按變更前XXXX成型工藝參數(shù)規(guī)定，擬定本品的流化床一步制粒工藝參數(shù)，變更前后未變化。5.2.1變更后XXXX工藝流程圖 圖2.XXXX（未添加蔗糖）工藝流程圖5.2.2中試工藝驗(yàn)證樣品生產(chǎn)工藝制粒：稱取通脈噴霧粉、糊精、甜菊素，加入一步制粒機(jī)中，按《LGL-120流化床制粒干燥機(jī)原則操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程》JSSB01-046操作，設(shè)立進(jìn)風(fēng)溫度90～120℃，控制物料溫度在55～65℃，風(fēng)機(jī)頻率控制在25～50HZ；噴液速度控制在5～40rpm，將純化水通過噴槍噴入沸騰床，使物料形成均勻的顆粒并干燥，取出，整粒，包裝。整粒：按《漩渦振蕩篩原則操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程》JSSB01-019操作，將干顆粒進(jìn)行整粒，上層過10目篩，下層過80目篩，使其不能通過的顆?？偤筒坏眠^14%。混合：整粒后的顆粒按批量進(jìn)行混合，操作時(shí)用真空上料機(jī)吸入三維混合機(jī)中，按《三維混合機(jī)原則操作及維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程》JSSB01-016操作，混合15分鐘。內(nèi)包裝：按《DXDK40IV型自動顆粒包裝機(jī)的操作與維護(hù)保養(yǎng)規(guī)程》JSSB01-101操作，啟動自動顆粒包裝機(jī)，包裝成6g/袋。5.2.33批中試工藝驗(yàn)證生產(chǎn)信息三批中實(shí)驗(yàn)證生產(chǎn)信息批號040204030404批量1萬袋1萬袋1萬袋生產(chǎn)日期.4.10.4.11.4.11生產(chǎn)地點(diǎn)XXXX藥業(yè)有限公司固體制劑車間物料用量物料名稱編碼/批號用量（kg）編碼/批號用量（kg）編碼/批號用量（kg）噴霧粉030425.01030526.50030626.51糊精F-0134.75F-0133.26F-0133.25甜菊素F-010.24F-010.24F-010.24復(fù)合膜B-0112.30B-0111.90B-0111.77生產(chǎn)數(shù)據(jù)顆粒總重（kg）59.4260.8260.00合格顆粒重量（整粒后）（kg）57.3558.8558.78總混后顆粒重（kg）57.0057.5358.325.2.4重要的生產(chǎn)設(shè)備重要的生產(chǎn)設(shè)備工序設(shè)備名稱規(guī)格型號數(shù)量生產(chǎn)能力生產(chǎn)廠家制粒流化床制粒干燥機(jī)LGC-1201臺60-140kg/批重慶市科旭制藥機(jī)械設(shè)備制造有限公司整粒旋渦振蕩篩ZK-6501臺180-kg/h江蘇瑰寶集團(tuán)有限公司總混三維混合機(jī)SBH-8001臺750L/380kg內(nèi)包裝自動顆粒包裝機(jī)DXDK-40VI1臺50-110袋/分鐘天津市三橋包裝機(jī)械有限責(zé)任公司5.2.5各工序質(zhì)量控制點(diǎn)各工序質(zhì)量控制點(diǎn)質(zhì)量監(jiān)控點(diǎn)控制項(xiàng)目監(jiān)控原則噴霧粉、輔料外觀、品名、批次、合格狀態(tài)標(biāo)志應(yīng)無肉眼可見異物；有檢查報(bào)告書，核對品名、批次、合格狀態(tài)標(biāo)志投料品名、使用期、批號、數(shù)量不得有差錯制粒干燥水分≤7%流化床干燥溫度90~120℃整粒篩網(wǎng)上層篩為10目，下層篩為80目混合時(shí)間15分鐘裝量、封口核對品名、批次、數(shù)量、狀態(tài)標(biāo)記不得有差錯裝量差別6g±5%封口封口牢固，無脫膜、漏氣現(xiàn)象袋身產(chǎn)品批號、生產(chǎn)日期、使用期至5.2.6中間產(chǎn)品的控制本品中間產(chǎn)品檢查辦法與程度見表20；三批中實(shí)驗(yàn)證樣品中間體檢測成果見表21。中間產(chǎn)品的質(zhì)量原則中間體名稱檢測項(xiàng)目內(nèi)控原則待包裝品性狀本品為棕黃色至棕褐色的顆粒；氣微，味甜、微苦粒度照粒度測定法（ChP四部通則0982）測定，不能通過一號篩與能通過五號篩的總和，不得過14%溶化性取本品6g，加熱水200ml，攪拌5分鐘，立刻觀察，應(yīng)全部溶化或輕微渾濁。（ChP四部通則0104）水分照水分測定法（ChP四部通則0832）測定，不得過7.0%。含量本品每6g含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不少于50mg，含丹參以丹酚酸B(C36H30O16)計(jì)，不少于30mg三批中實(shí)驗(yàn)證樣品中間體檢測成果項(xiàng)目040204030404性狀本品為棕黃色顆粒；微苦本品為棕黃色顆粒；微苦本品為棕黃色顆粒；微苦粒度8%10%5%溶化性顆粒全部溶化顆粒全部溶化顆粒全部溶化水分1.3%1.3%1.3%含量葛根素/袋84.6mg79.8mg85.8mg丹酚酸B/袋43.2mg57.6mg48.6mg5.2.7三批中實(shí)驗(yàn)證成果和評價(jià)工藝驗(yàn)證成果匯總表工序驗(yàn)證成果制粒工序經(jīng)驗(yàn)證，制粒工序物料溫度、霧化壓力、噴霧速率、篩網(wǎng)目數(shù)均符合工藝規(guī)定范疇?？偦旃ば蚪?jīng)驗(yàn)證，總混工序混合時(shí)間、混合均勻度均符合工藝規(guī)定范疇。包裝工序經(jīng)驗(yàn)證，包裝工序裝量差別、設(shè)定縱封溫度、橫封溫度均符合工藝規(guī)定范疇。5.3變更前后的制備辦法比較通脈膠囊變更前后制備辦法中，除輔料種類、用量以及制成總量發(fā)生變化外，其它制備過程均未變化，變更前后的制備辦法比較以下：變更前后的制備辦法比較處方丹參500g川芎500g葛根500g變更前制備辦法以上三味，加水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.08（80℃），趁熱濾過，濾液濃縮至適量，加入蔗糖粉適量，制成顆粒，低溫干燥，制成1000g；或噴霧干燥，加入蔗糖粉適量，混勻，制成顆粒1000g，即得。變更后制備辦法以上三味，加水煎煮二次，第一次1.5小時(shí)，第二次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度1.08（80℃），趁熱濾過，濾液濃縮至適量，噴霧干燥，加入糊精適量，甜菊素2.4g，混勻，制成顆粒600g，即得。6、包裝材料變更前后的包裝材料未發(fā)生變化，包材的類型、來源及有關(guān)證明文獻(xiàn)以下：包材類型、來源及有關(guān)證明文獻(xiàn)項(xiàng)目包裝材料包材類型聚酯/鋁/聚乙烯藥用復(fù)合膜包材生產(chǎn)商徐州龍潤醫(yī)藥包裝有限公司包材注冊證號國藥包字0283包材注冊證使用期03月14日包材質(zhì)量原則編號YBB0017-藥品審評中心備案登記號B附件：徐州龍潤醫(yī)藥包裝有限公司營業(yè)執(zhí)照附件：聚酯/鋁/聚乙烯藥用復(fù)合膜注冊證附件：聚酯/鋁/聚乙烯藥用復(fù)合膜質(zhì)量原則和檢查報(bào)告7、XXXX質(zhì)量研究按照通脈膠囊的質(zhì)量原則（WS3-B-0824-91-）對變更后樣品的質(zhì)量原則進(jìn)行了研究，對薄層鑒別（丹參、川芎、葛根）、含量測定（丹酚酸B、葛根素）辦法學(xué)進(jìn)行了考察，通過辦法學(xué)考察，擬定仍采用原質(zhì)量原則對本品進(jìn)行控制（鑒別、含量測定項(xiàng)下的樣品取樣量因規(guī)格的變化作了對應(yīng)的調(diào)節(jié)）。擬定的XXXX(未添加蔗糖)的質(zhì)量原則草案見附件7.1性狀根據(jù)三批XXXX(未添加蔗糖)性狀成果，暫定本品性狀為：棕黃色至棕褐色的顆粒；氣微，味甜、微苦。變更前后XXXX性狀比較批號性狀變更前0309為棕褐色的顆粒；氣微，味甜、微苦。0310為棕褐色的顆粒；氣微，味甜、微苦。0311為棕褐色的顆粒；氣微，味甜、微苦。變更后0402為棕褐色的顆粒；氣微，微苦。0403為棕褐色的顆粒；氣微，微苦。0404為棕褐色的顆粒；氣微，微苦。7.2鑒別7.2.1儀器與試藥（1）儀器ME204E萬分之一電子天平（梅特勒·托利多）、ZF-2三用紫外儀（上海安亭科學(xué)儀器廠）、KQ-500DB超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、展開缸、硅膠G薄層板。（2）試藥XXXX(未添加蔗糖)（批號：0309、0310、0311）XXXX(未添加蔗糖)（批號：0402、0403、0404）；川芎對照藥材（批號：12；購于中國食品藥品檢定研究院）；丹參對照藥材（批號：12；購于中國食品藥品檢定研究院）；葛根素對照品（批號：11；購于中國食品藥品檢定研究院）；乙醇、氯仿、甲醇、鹽酸、乙酸乙酯、甲苯、甲酸、乙醚、正己烷均為分析純；水為自制純化水。7.2.2丹參薄層鑒別薄層辦法學(xué)考察項(xiàng)目涉及：不同溫度考察、不同濕度考察、不同薄層板考察。鑒別辦法：取本品6g，研細(xì)，加乙醇50m1，超聲解決25分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0m1使溶解，加鹽酸2滴，加乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，低溫蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹參對照藥材2g，加水30ml煎煮30分鐘，濾過，濾液加鹽酸2滴，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典四部通則0502)實(shí)驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各3μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲苯-甲酸（24:20:10:6)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜對應(yīng)的位置上，顯相似顏色的主斑點(diǎn)。（1）辦法學(xué)驗(yàn)證研究①不同廠家薄層板及專屬性考察分別采用不同廠家的硅膠薄層板（青島海洋化工、乳山上邦新、煙臺新諾薄層板）上，按上述薄層色譜條件展開、取出、晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，置日光下檢視。123123A(青島海洋化工硅膠G板)B（煙臺新諾硅膠G板）1.丹參對照藥材2.供試品3.缺丹參陰性圖3.不同廠家薄層板及專屬性考察成果成果分析：通過比較不同廠家生產(chǎn)的硅膠G薄層板，XXXX(未添加蔗糖)在與丹參對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的主斑點(diǎn)，色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，不同廠家薄層板對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。②不同濕度考察分別吸取丹參對照藥材溶液、供試品溶液（批號：0402）、缺丹參供試品溶液點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述薄層色譜條件，分別在低濕（25%）和高濕(65%)條件下展開、取出、晾干，置日光下檢視。1212A(低濕25%)B（高濕65%）1.丹參對照藥材2.供試品圖4.不同濕度考察成果成果分析：在低濕和高濕條件下，XXXX(未添加蔗糖)在與丹參對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的主斑點(diǎn)，且色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，實(shí)驗(yàn)成果表明，濕度對XXXX(未添加蔗糖)提取物薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。③不同溫度考察分別吸取丹參對照藥材溶液、供試品溶液（批號：0402）、缺丹參供試品溶液點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述薄層色譜條件，分別在室溫（25℃）和高溫(40℃)條件下展開、取出、晾干，置日光下檢視。1212A(室溫25℃)B（高溫40℃）丹參對照藥材2.供試品圖5.不同溫度考察成果成果分析：在室溫和高溫條件下，XXXX(未添加蔗糖)在與丹參對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的主斑點(diǎn)，且色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，實(shí)驗(yàn)成果表明，濕度對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。（2）樣品檢查XXXX變更前3批樣品（批號：0309、0310、0311）、變更后3批樣品（批號：0402、0403、0404）丹參薄層鑒別成果以下：123415671.丹參對照藥材（3μL）2.供試品（0402批）3.供試品（0403批）4.供試品（0404批）5.供試品（0309批）6.供試品（0310批）7.供試品（0311批）圖6.三批中試樣品考察成果結(jié)論：XXXX變更前后各3批樣品的丹參薄層鑒別，供試品色譜中，在與丹參對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的主斑點(diǎn)，均符合規(guī)定。7.2.3川芎薄層鑒別川芎薄層鑒別辦法學(xué)考察項(xiàng)目：不同溫度考察、不同濕度考察、不同薄層板考察。鑒別辦法：取本品3.6g，加水30ml，微熱使溶解，濾過，濾液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加乙醚60ml，加飽和氯化鈉溶液2ml，輕輕振搖，靜置，分取乙醚液（如果乳化，分取乳化層，加無水乙醇1ml，搖勻，分取乙醚液），水層繼續(xù)用乙醚60ml提取，合并乙醚液，低溫蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對照藥材2g，加水40ml，煎煮15分鐘，濾過，放冷，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，加乙醚60ml，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典四部通則0502)實(shí)驗(yàn)，分別吸取供試品溶液5ul，對照藥材溶液8ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙醚-正己烷（9:1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜對應(yīng)的位置上，顯相似顏色的熒光斑點(diǎn)。（1）辦法學(xué)驗(yàn)證研究①不同廠家薄層板及專屬性考察分別吸取川芎對照藥材溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)（0402）供試品溶液3μL、XXXX(未添加蔗糖)缺丹參供試品溶液3μL點(diǎn)于不同廠家的硅膠薄層板（青島海洋化工、乳山上邦新、煙臺新諾薄層板）上，按上述薄層色譜條件展開、取出、晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。123123123A(青島海洋化工硅膠G板)B（煙臺新諾硅膠G板）C(乳山上邦新硅膠G板)1.川芎對照藥材（2μL）2.供試品3.缺川芎陰性圖7.不同廠家薄層板及專屬性考察成果成果分析：通過比較不同廠家生產(chǎn)的硅膠G薄層板，XXXX(未添加蔗糖)在與川芎對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的熒光主斑點(diǎn)，色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，不同廠家薄層板對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。②不同濕度考察分別吸取川芎對照藥材溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)（0402）供試品溶液3μL、XXXX(未添加蔗糖)缺川芎供試品溶液3μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述薄層色譜條件，分別在低濕（25%）和高濕(65%)條件下展開、取出、晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。123123A(低濕25%)B（高濕65%）1.缺丹參陰性（3μL）2.供試品3.川芎對照藥材圖8.不同濕度考察成果成果分析：在低濕和高濕條件下，XXXX(未添加蔗糖)在與川芎對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的熒光主斑點(diǎn)，且色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，濕度對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。③不同溫度考察分別吸取川芎對照藥材溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)（0402）供試品溶液3μL、XXXX(未添加蔗糖)缺川芎供試品溶液3μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述薄層色譜條件，分別在室溫（25℃）和高溫(40℃)條件下展開、取出、晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。123123A(室溫25℃)B（高溫40℃）1.川芎對照藥材2.供試品3.缺川芎陰性圖9.不同溫度考察成果結(jié)論：在室溫和高溫條件下，XXXX(未添加蔗糖)在與川芎對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的熒光主斑點(diǎn)，且色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，濕度對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。（2）樣品檢測XXXX變更前3批樣品（批號：0309、0310、0311）、變更后3批樣品（批號：0402、0403、0404）川芎薄層鑒別成果以下：123415671.川芎對照藥材（2μL）2.供試品（0402批）3.供試品（0403）4.供試品（0404批）5.供試品（0309批）6.供試品（0310批）7.供試品（0311批）圖10.三批中試樣品考察成果結(jié)論：XXXX變更前后各3批樣品的川芎薄層鑒別，供試品色譜中，在與川芎對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的主斑點(diǎn)，均符合規(guī)定。7.2.4葛根素薄層鑒別取鑒別（1）項(xiàng)下的供試品溶液，作為供試品溶液，再取葛根素對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典一部附錄VIB)實(shí)驗(yàn)，吸取上述二種溶液各2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（7:2.5:0.25)為展開劑，預(yù)飽和15分鐘，展開，取出，晾干，至紫外燈（365nm）下檢視，供試品色譜中，在.與對照品色譜對應(yīng)的位置上，顯相似顏色的熒光斑點(diǎn)。辦法學(xué)考察項(xiàng)目：不同點(diǎn)樣量考察、不同溫度考察、不同濕度考察、不同薄層板考察。（1）辦法學(xué)驗(yàn)證研究①不同廠家薄層板及專屬性考察分別吸取葛根素對照品溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)（0402）供試品溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)缺丹參供試品溶液2μL點(diǎn)于不同廠家的硅膠薄層板（青島海洋化工、乳山上邦新、煙臺新諾薄層板）上，按上述薄層色譜條件展開、取出、晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。123123123A(青島海洋化工硅膠G板)B（煙臺新諾硅膠G板）C(乳山上邦新硅膠G板)1.葛根素對照品（2μL）2.XXXX(未添加蔗糖)（2μL）3.XXXX(未添加蔗糖)缺葛根陰性（2μL）圖11.不同廠家薄層板及專屬性考察成果結(jié)論：通過比較不同廠家生產(chǎn)的硅膠G薄層板，XXXX(未添加蔗糖)在與葛根素對照品色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的熒光斑點(diǎn)，色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，不同廠家薄層板對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。②不同濕度考察分別吸取葛根素對照品溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)（0402）供試品溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)缺葛根供試品溶液2μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述薄層色譜條件，分別在低濕（25%）和高濕(65%)條件下展開、取出、晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。1212A(低濕25%)B（高濕65%）1.葛根素對照品（2μL）2.XXXX(未添加蔗糖)（2μL）圖12.不同濕度考察成果結(jié)論：在低濕和高濕條件下，XXXX(未添加蔗糖)在與葛根素對照品色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的熒光斑點(diǎn)，且色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，濕度對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。③不同溫度考察分別吸取葛根素對照品溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)（0402）供試品溶液2μL、XXXX(未添加蔗糖)缺葛根供試品溶液2μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，按上述薄層色譜條件，分別在室溫（25℃）和高溫(40℃)條件下展開、取出、晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。1212A(室溫25℃)B（高溫40℃）葛根素對照品（2μL）2.XXXX(未添加蔗糖)（2μL）圖13.不同溫度考察成果結(jié)論：在室溫和高溫條件下，XXXX(未添加蔗糖)在與葛根素對照品色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的熒光斑點(diǎn)，且色譜斑點(diǎn)分離效果都較好，陰性無干擾，專屬性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)成果表明，濕度對XXXX(未添加蔗糖)薄層鑒別無明顯影響，該薄層鑒別辦法的耐用性良好。（2）樣品檢測XXXX變更前3批樣品（批號：0309、0310、0311）、變更后3批樣品（批號：0402、0403、0404）葛根素薄層鑒別成果以下：123415671.葛根素對照品2.供試品（0402批）3.供試品（0403）4.供試品（0404批）5.供試品（0309批）6.供試品（0310批）7.供試品（0311批）圖14.三批中試樣品考察成果結(jié)論：XXXX變更前后各3批樣品的葛根素薄層鑒別，供試品色譜中，在與葛根素對照藥材色譜對應(yīng)的位置上顯相似顏色的主斑點(diǎn)，均符合規(guī)定。7.3檢查應(yīng)符合顆粒劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定(通則0104)。7.3.1水分中藥顆粒劑照水分測定法（通則0832)第二法（烘干法）測定，除另有規(guī)定外，水分不得超出8.0%。水分檢查辦法：取供試品2～5g，精密稱定，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超出5mm；疏松供試品不超出10mm，精密稱定，啟動瓶蓋在105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱重，至持續(xù)兩次稱重的差別不超出5mg為止。根據(jù)減失的重量，計(jì)算供試品中含水量（%）。XXXX變更前后各3批樣品檢查成果以下：變更前后XXXX水分測定成果批號變更前變更后030903100311040204030404水分（%）3.243.183.111.391.291.35結(jié)論：XXXX變更前后各3批樣品水分檢測成果均未超出8.0%，符合規(guī)定。7.3.2溶化性除另有規(guī)定外，顆粒劑照下述辦法檢查，溶化性應(yīng)符合規(guī)定。溶化性檢查：取供試品10g(中藥單劑量包裝取1袋），加熱水200ml，攪拌5分鐘，立刻觀察，可溶顆粒應(yīng)全部溶化或輕微渾濁，均不得有焦屑等異物。變更前后XXXX溶化性測定成果批號變更前變更后030903100311040204030404溶化性符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定結(jié)論：XXXX變更前后各3批樣品溶化性檢查成果均符合規(guī)定。7.3.3粒度除另有規(guī)定外，照粒度和粒度分布測定法（通則0982第二法雙篩分法)測定，不能通過一號篩與能通過五號篩的總和不得超出15%。粒度檢查：取單劑量包裝的5袋（瓶）或多劑量包裝的1袋（瓶），稱定重量，置該劑型或品種項(xiàng)下規(guī)定的上層(孔徑大的）藥篩中（下層的篩下配有密合的接受容器），保持水平狀態(tài)過篩，左右來回，邊篩動邊拍打3分鐘。取不能通過大孔徑篩和能通過小孔徑篩的顆粒及粉末，稱定重量，計(jì)算其所占比例（％)。變更前后XXXX粒度測定成果批號變更前變更后030903100311040204030404粒度（%）7.697.587.661.151.271.16結(jié)論：XXXX變更前后各3批樣品粒度檢查成果均未超出15%，符合規(guī)定。7.3.4微生物程度檢查建立XXXX（未添加蔗糖)微生物程度檢查辦法。按照ChP四部通則1105、1106進(jìn)行驗(yàn)證，確認(rèn)對供試品進(jìn)行微生物程度檢查時(shí)，所采用的需氧菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)辦法和控制菌檢查辦法適合于該藥品的微生物程度檢查。XXXX（未添加蔗糖)微生物程度檢查辦法合用性見附件。微生物驗(yàn)證成果驗(yàn)證項(xiàng)目驗(yàn)證成果需氧菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)辦法合用性實(shí)驗(yàn)銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的菌回收率均在50-200%之間，能夠確認(rèn)采用稀釋法，通過平皿傾注法培養(yǎng)，適合于XXXX的需氧菌總數(shù)、霉菌與酵母菌總數(shù)的測定?？刂凭竽c埃希菌檢查辦法合用性實(shí)驗(yàn)本品大腸埃希菌采用常規(guī)法進(jìn)行控制菌檢查，陽性菌生長良好，陰性對照組無菌生長，表明該控制菌檢查辦法專屬性好。XXXX（未添加蔗糖）根據(jù)ChP微生物程度檢測法，通過驗(yàn)證，能夠得出以下辦法進(jìn)行微生物程度檢測：需氧菌總數(shù)：供試品10g加到滅菌的三角瓶中，加入pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液100ml，溶解、混勻，制成1:10供試液，取1:10供試液1ml置直徑90mm的無菌平皿中，注2個(gè)平皿，注入20ml溫度不超出45℃的溶化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，培養(yǎng)、計(jì)數(shù)，測定菌數(shù)。霉菌及酵母菌總數(shù)：取1:10供試液1ml置直徑90mm的無菌平皿中，注2個(gè)平皿，注入20ml溫度不超出45℃的溶化的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，培養(yǎng)、計(jì)數(shù)，測定菌數(shù)。大腸埃希菌：取1:10供試液10ml至100ml胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)后，按常規(guī)法進(jìn)行檢測。程度：需氧菌總數(shù)不得過103cfu/g，霉菌和酵母菌數(shù)不得過102cfu/g，不得檢出大腸埃希菌(1g)。變更前后XXXX微生物程度檢查成果批號變更前變更后030903100311040204030404需氧菌總數(shù)（cfu/g）600500100600500550霉菌、酵母菌（cfu/g）＜20＜20＜20＜20＜20＜20大腸埃希菌/g未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出未檢出7.4、含量測定照高效液相色譜法（《中國藥典》四部通則0512）測定。參考XXXX(添加蔗糖)含量測定項(xiàng)測定辦法中色譜條件和辦法，建立XXXX(未添加蔗糖)的含量測定，并根據(jù)《中國藥典》（四部通則9101）“藥品質(zhì)量原則分析辦法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”，對建立的XXXX(未添加蔗糖)含量測定辦法進(jìn)行辦法學(xué)驗(yàn)證，辦法學(xué)研究成果表明該辦法符合含量測定的規(guī)定，可用于測定XXXX(未添加蔗糖)中丹酚酸B、葛根素含量的測定。7.4.1儀器與試藥（1）儀器設(shè)備：色譜儀1:島津LC-2040C3D色譜系統(tǒng)色譜儀2：島津LC-20A色譜系統(tǒng)，涉及LC-20AT輸液泵、SIL-20AC自動進(jìn)樣器、CTO-20AC色譜柱溫箱、SPD-M20A紫外檢測器。電子天平：ME204E（梅特勒·托利多）、AG135（十萬分之一）、XP6（百萬分之一）。超聲儀：昆山市超聲儀器有限公司。（2）色譜柱信息以下：色譜柱1：依利特SupersilODS25μm4.6mm×250mm柱號：E2916630色譜柱2：島津InertsilODS-35μm4.6mm×250mmS/N.1A7184412（3）試劑乙腈（Adamas-beta，色譜純），水為純化水，甲醇（北京百靈威科技有限公司，色譜純），磷酸等其它試劑均為分析純。（4）試藥丹酚酸B對照品（中國食品藥品檢定研究院批號：11，含量94.1%）；葛根素對照品（中國食品藥品檢定研究院批號：11，含量95.4%）；葛根素對照品（中國食品藥品檢定研究院批號：11，含量95.4%）；XXXX(未添加蔗糖)（0402、0403、0404）7.4.2丹參含量測定辦法學(xué)驗(yàn)證丹酚酸B含量測定辦法：色譜條件與系統(tǒng)合用性實(shí)驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙晴-0.1%磷酸溶液（22:78）為流動相；檢測波長266nm。理論板數(shù)按丹酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。對照品溶液的制備取丹酚酸B對照品適量，精密稱定，加75%甲醇制成每1ml含80μg的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差別項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，精密加入75%甲醇50ml，稱定重量，超聲解決（功率300W，頻率40Hz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μL，注入液相色譜儀，測定，即得。丹酚酸B含量測定辦法驗(yàn)證成果項(xiàng)目可接受原則驗(yàn)證成果專屬性缺丹參供試品陰性實(shí)驗(yàn)不干擾本品含量測定陰性實(shí)驗(yàn)不干擾本品含量測定，本辦法專屬性良好。線性以丹酚酸B對照品的濃度（mg/ml）為橫坐標(biāo)，色譜峰面積（A）為縱坐標(biāo)，作線性回歸得回歸方程，回歸線的有關(guān)系數(shù)（r）不得不大于0.999。丹酚酸B在9.37～187.48μg/ml濃度范疇內(nèi)呈線性，線性方程為y=26947.5829x-5161.5311，有關(guān)系數(shù)r=1.0000，闡明在此濃度范疇內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。精密度重復(fù)性6份供試品溶液，含量測定成果的相對原則偏差不不不大于2.0%。本品6份供試品溶液，丹酚酸B含量均值為7.91mg/g，RSD為1.24%，不大于2.0%，表明本辦法重復(fù)性良好。中間精密度由另一名分析人員使用不同的儀器進(jìn)行測試，測試6份，與重復(fù)性樣品進(jìn)行比較，所得12份供試品溶液，丹酚酸B含量測定成果的RSD應(yīng)不不不大于4.0%。兩名分析人員使用不同的儀器進(jìn)行測試，所得12份供試品溶液，丹酚酸B含量均值為8.04mg/g，RSD為2.18%，不大于4.0%，表明本此辦法中間精密度良好?；厥章矢鳚舛葮悠返幕厥章示鶓?yīng)在92.0%~105.0%之間，且6次測得成果間RSD不不不大于2.0%。6份供試品溶液的回收率在100.00~102.37%范疇內(nèi)，均在92.0%~105.0%之間，且6次測得成果的RSD為0.91%，不大于2.0%，表明本辦法回收率良好。溶液穩(wěn)定性對照品及供試品溶液中丹酚酸B保存時(shí)間、峰面積的相對原則偏差不不不大于2.0%。對照品溶液于室溫條件放置24h，丹酚酸B保存時(shí)間的RSD值為0.61%，峰面積RSD值為1.28%，供試品溶液于室溫條件放置24h，丹酚酸B保存時(shí)間的RSD值為0.72%，峰面積RSD值為1.61%，均不大于2.0%；可認(rèn)為對照品溶液和供試品溶液室溫條件放置24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。耐用性通過微小變化波長、流速、柱溫、流動相比例及更換不同色譜柱等色譜條件參數(shù)，考察測定成果不受影響的程度。規(guī)定在各變動參數(shù)下，丹酚酸B含量的RSD<4.0%；可認(rèn)為本辦法對此色譜條件耐用性良好。微調(diào)波長(±2nm)、流速(±0.02ml/min)、柱溫(±1℃)、流動相比例（乙腈-0.1%磷酸（21:79)和乙腈-0.1%磷酸（23:77））及更換不同型號、不同品牌色譜柱（依利特SupersilODS2C185μm(4.6*250mm)和島津InertsilODS3C185μm(4.6*250mm)），在各色譜條件下，丹酚酸B含量與正常條件相比較，RSD均不大于4.0%，可認(rèn)為微小變動上述色譜條件，對本品含量測定成果無影響。表明本法耐用性良好。（1）專屬性考察按照供試品溶液制備辦法依法制備缺丹參供試品溶液，精密吸取20μL，注入液相色譜儀，統(tǒng)計(jì)色譜圖，成果陰性實(shí)驗(yàn)無干擾。見附圖圖15.丹酚酸B對照品色譜圖圖16.XXXX(未添加蔗糖)供試品色譜圖圖17.XXXX(未添加蔗糖)缺丹參色譜圖（2）線性考察精密稱取丹酚酸B對照品4.981mg，置25ml量瓶中，加75%甲醇振搖使溶解并定容至刻度，作為對照品儲備液。再分別精密量取對照品儲備液1.0ml→20ml、1.0ml→10ml、2.0ml→10ml、3.0ml→10ml、5.0ml→10ml、10.0ml→10ml，加75%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。精密量取上述溶液各20μl，注入液相色譜儀，統(tǒng)計(jì)色譜圖（見附件-圖），以對照品濃度為橫坐標(biāo)（x），峰面積為縱坐標(biāo)（y），進(jìn)行線性回歸分析，繪制原則曲線。回歸方程：y=26947.5829x-5161.5311，r=1.0000。丹酚酸B線性關(guān)系考察成果濃度（μg/ml）9.3718.7537.5056.2593.74187.48峰面積2490425016651004936150690725207845047998回歸方程y==26947.5829x-5161.5311有關(guān)系數(shù)r=1.0000線性關(guān)系圖結(jié)論：線性考察成果表明，丹酚酸B在9.37～187.48μg/ml范疇內(nèi)線性關(guān)系良好。（3）精密度考察①重復(fù)性考察取同一批（0402）XXXX(未添加蔗糖)6份，按供試品溶液的制備辦法制備成供試品溶液，照上述色譜條件進(jìn)行測定并計(jì)算含量成果RSD。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)成果分析員：實(shí)驗(yàn)員A高效液相色譜儀：島津LC-2040C3D序號123456含量(mg/g)7.767.947.848.007.928.02平均含量(mg/g)7.91RSD(%)1.24結(jié)論：本品6份供試品溶液，丹酚酸B含量均值為7.91mg/g，RSD為1.24%，不大于2.0%，表明本辦法重復(fù)性良好。②中間精密度考察由另一人，取同一批（0402）XXXX(未添加蔗糖)6份，按供試品溶液的制備辦法制備成供試品溶液，在另一臺儀器，照上述色譜條件進(jìn)行測定并計(jì)算含量成果RSD%。成果見下表，成果RSD為0.51%，表明該辦法中間精密度良好。中間精密度實(shí)驗(yàn)成果分析員：實(shí)驗(yàn)員B高效液相色譜儀：島津LC-20A高效液相供試品123456均值(mg/g)RSD（%）含量(mg/g)8.148.138.118.228.208.178.160.5112次含量檢測成果平均值：8.04mg/g12次檢測成果RSD：2.18%結(jié)論：兩名分析人員使用不同的儀器進(jìn)行測試，所得12份供試品溶液，丹酚酸B含量均值為8.04mg/g，RSD為2.18%，不大于4.0%，表明本此辦法中間精密度良好。（4）精確度考察精密稱取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖）6份樣品(丹酚酸B含量為7.72mg/g)約0.25g，分別置于50ml量瓶中，分別精密加入丹酚酸B對照品溶液（濃度1.882mg/mL）1mL，按供試品制備辦法解決，即得加樣回收樣品溶液；進(jìn)行含量測定。測定上述溶液及對照品溶液峰面積，計(jì)算丹酚酸B加樣回收率。成果表明，平均回收率為101.19%。實(shí)驗(yàn)成果表明辦法精確性良好。精確度實(shí)驗(yàn)成果名稱樣品取樣量(mg)樣品含量(mg/g)加入對照品量(mg)樣品含量(mg)測得總含量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD（%）10.28517.721.8822.2014.1089101.39101.190.9120.28452.1964.1170102.0630.29632.2874.2139102.3740.27982.1604.0419100.0050.27472.1214.0118100.5060.28252.1814.0776100.79成果及分析：經(jīng)實(shí)驗(yàn)考察，丹酚酸B的平均加樣回收率為101.19%，RSD%為0.91，表明該辦法良好。（5）溶液穩(wěn)定性考察精密稱取丹酚酸B對照品2.215mg，按對照品溶液制備辦法制備對照品溶液。另精密稱取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖），按供試品制備辦法，制備供試品溶液，分別在0、2、4、8、12、24小時(shí)進(jìn)樣，測定峰面積，考察丹酚酸B對照品及供試品溶液的穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)成果見下表：丹酚酸B對照品溶液穩(wěn)定性測定成果時(shí)間（h）保存時(shí)間（min）峰面積022.5702220499222.7082212039422.8322189166822.48721756671222.47521480242422.6152163151RSD%0.611.28供試品溶液穩(wěn)定性測定成果時(shí)間（h）保存時(shí)間（min）峰面積022.7211933031222.7621929638422.9311993194822.47819750001222.53019785532422.664509RSD%0.721.61結(jié)論：經(jīng)穩(wěn)定性24小時(shí)考察，丹酚酸B對照品及XXXX（未添加蔗糖）溶液的RSD均不大于2%，表明丹酚酸B對照品及供試品溶液在24小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定，能夠滿足測定需要。（6）耐用性考察①不同波長考察取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖），按“供試品制備辦法”制備供試品溶液，分別在不同波長284nm、286nm、288nm下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測定丹酚酸B的含量。不同波長測定成果波長含量（mg/g）均值（mg/g）相對原則偏差（%）284nm7.747.610.837.48286nm7.737.727.71288nm7.737.727.70結(jié)論：成果表明不同波長對丹酚酸B的含量測定影響較小。②不同流速考察:取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖），按供試品制備辦法，制備成供試品溶液，分別在不同流速0.98mL/min、1.0mL/min、1.02mL/min下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測定丹酚酸B的含量。不同流速測定成果流速含量（mg/g）均值（mg/g）相對平均偏差/%0.98mL/min7.787.751.467.721.0mL/min7.737.727.711.02mL/min8.017.937.85結(jié)論：成果表明變化微小條件（流速±0.02ml/min），不同流速對丹酚酸B的含量測定影響較小。③不同柱溫的考察：取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖），按“供試品制備辦法”制備供試品溶液，分別在不同柱溫24℃、25℃、26℃下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測定丹酚酸B的含量。不同柱溫測定成果柱溫含量（mg/g）均值（mg/g）相對平均偏差/%24℃7.547.671.077.7925℃7.737.727.7126℃7.987.567.89成果及分析：成果表明變化微小條件（柱溫±1℃），不同柱溫對丹酚酸B的含量測定影響較小。④不同色譜柱的考察：取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖），按“供試品制備辦法”制備供試品溶液，分別在不同色譜柱AgilentHCC18、DiamonsilC18、島津Shim-PackVP-ODSC18、島津InertsilODS3C18下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，測定丹酚酸B的含量。不同色譜柱的測定成果色譜柱含量（mg/g）均值（mg/g）相對平均偏差/%依利特SupersilODS2C187.737.721.457.71島津InertsilODS3C187.897.887.87結(jié)論：在進(jìn)行不同色譜柱考察時(shí)，AgilentHCC18、DiamonsilC18、島津Shim-PackVP-ODSC18均不合用，而島津InertsilODS3C18色譜柱對丹酚酸B的含量影響較小。⑤不同流動相比例的考察：取同一批號（0402）XXXX（未添加蔗糖），按“供試品制備辦法”制備供試品溶液，分別在不同流動相比例乙腈-0.1%磷酸（21:79）、乙腈-0.1%磷酸（22:78）、乙腈-0.1%磷酸（23:77）下實(shí)驗(yàn)，測定丹酚酸B的含量。不同流動相比例的測定成果流動相比例含量（mg/g）均值（mg/g）相對平均偏差/%乙腈-0.1%磷酸（21:79）7.757.802.337.85乙腈-0.1%磷酸（22:78）7.737.727.71乙腈-0.1%磷酸（23:77）8.028.078.12結(jié)論：成果表明不同流動相比例對丹酚酸B的含量測定影響較小。7.4.3葛根含量測定辦法學(xué)驗(yàn)證葛根素含量測定辦法：色譜條件與系統(tǒng)合用性實(shí)驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙晴-水（10:90）為流動相；檢測波長250nm。理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。對照品溶液的制備取葛根素對照品適量，精密稱定，加30%乙醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。供試品溶液的制備取裝量差別項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取約0.12g，精密稱定，精密加入30%乙醇50ml，稱定重量，超聲解決（功率300W，頻率40Hz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用30%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。葛根素含量測定辦法驗(yàn)證成果項(xiàng)目可接受原則驗(yàn)證成果專屬性缺葛根供試品陰性實(shí)驗(yàn)不干擾本品含量測定陰性實(shí)驗(yàn)不干擾本品含量測定，本辦法專屬性良好。線性以葛根素對照品的濃度（mg/ml）為橫坐標(biāo)，色譜峰面積（A）為縱坐標(biāo)，作線性回歸得回歸方程，回歸線的有關(guān)系數(shù)（r）不得不大于0.999。葛根素在7.03～140.58μg/ml濃度范疇內(nèi)呈線性，線性方程為y=45869.7695x-4682.8040，有關(guān)系數(shù)r=1.0000，闡明在此濃度范疇內(nèi)峰面積與濃度呈良好的線性關(guān)系。精密度重復(fù)性6份供試品溶液，含量測定成果的相對原則偏差不不不大于2.0%。本品6份供試品溶液，葛根素含量均值為13.10mg/g，RSD為0.56%，不大于2.0%，表明本辦法重復(fù)性良好。中間精密度由另一名分析人員使用不同的儀器進(jìn)行測試，測試6份，與重復(fù)性樣品進(jìn)行比較，所得12份供試品溶液，丹酚酸B含量測定成果的RSD應(yīng)不不不大于4.0%。兩名分析人員使用不同的儀器進(jìn)行測試，所得12份供試品溶液，葛根素含量均值為13.01mg/g，RSD為1.03%，不大于4.0%，表明本此辦法中間精密度良好?；厥章矢鳚舛葮悠返幕厥章示鶓?yīng)在92.0%~105.0%之間，且6次測得成果間RSD不不不大于2.0%。6份供試品溶液的回收率在97.64~99.75%范疇內(nèi)，均在92.0%~105.0%之間，且6次測得成果的RSD為0.74%，不大于2.0%，表明本辦法回收率良好。溶液穩(wěn)定性對照品及供試品溶液中葛根素保存時(shí)間、峰面積的相對原則偏差不不不大于2.0%。對照品溶液于室溫條件放置48h，葛根素保存時(shí)間的RSD值為1.10%，峰面積RSD值為0.36%，供試品溶液于室溫條件放置48h，葛根素保存時(shí)間的RSD值為0.78%，峰面積RSD值為0.21%，均不大于2.0%；可認(rèn)為對照品溶液和供試品溶液室溫條件放置48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。耐用性通過微小變化波長、流速、柱溫、流動相比例及更換不同色譜柱等色譜條件參數(shù)，考察測定成果不受影響的程度。規(guī)定在各變動參數(shù)下，葛根素含量的RSD<4.0%；可認(rèn)為本辦法對此色譜條件耐用性良好。微調(diào)波長(±2nm)、流速(±0.05ml/min)、柱溫(±2℃)、流動相比例（乙腈-水（9:91）和乙腈-水（11:89））及更換不同型號、不同品牌色譜柱（月旭WelchUltimateAQC185μm(4.6*250mm)、DiamonsilC185μm(4.6*250mm)和依利特SupersilODS2C185μm(4.6*250mm)），在各色譜條件下，葛根素含量與正常條件相比較，RSD均不大于4.0%，可認(rèn)為微小變動上述色譜條件，對本品含量測定成果無影響。表明本法耐用性良好。（1）專屬性考察按照供試品溶液制備辦法依法制備缺葛根供試品溶液，按【含量測定】項(xiàng)下所述的色譜條件進(jìn)行HPLC分析，統(tǒng)計(jì)色譜圖，成果陰性實(shí)驗(yàn)無干擾。圖18.葛根素對照品色譜圖圖19.XXXX(未添加蔗糖)供試品色譜圖圖20.XXXX(未添加蔗糖)缺葛根色譜圖（2）線性考察精密稱取葛根素對照品3.684mg，置25ml量瓶中，加30%乙醇醇振搖使溶解并定容至刻度，作為對照品儲備液。再分別精密量取對照品儲備液1.0ml→20ml、1.0ml→10ml、2.0ml→10ml、3.0ml→10ml、5.0ml→10ml、10.0ml→10ml，加30%乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。精密量取上述溶液各10μl，注入液相色譜儀，統(tǒng)計(jì)色譜圖（見附件-圖），以對照品濃度為橫坐標(biāo)（x），峰面積為縱坐標(biāo)（y），進(jìn)行線性回歸分析，繪制原則曲線?；貧w方程：y=45869.7695x-4682.8040，R2=1.0000。XXXX（未添加蔗糖）線性關(guān)系考察成果濃度（μg/ml）7.0314.0628.1242.1770.29140.58峰面積3164026456721285364192624732168146445542回歸方程y=45869.7695x-4682.8040有關(guān)系數(shù)r=1.0000線性關(guān)系圖成果及分析：經(jīng)線性考察，成果表明葛根素濃度在7.03～140.58μg/ml范疇內(nèi)線性關(guān)系良好。（3）精密度考察①重復(fù)性考察取同一批（0402）XXXX(未添加蔗糖)6份，按供試品溶液的制備辦法制備成供試品溶液，照