電解質(zhì)及藥物對(duì)離體蛙心活動(dòng)的影響

電解質(zhì)及藥物對(duì)離體蛙心活動(dòng)的影響【教學(xué)對(duì)象與學(xué)時(shí)】一、 教學(xué)對(duì)象：五年制本科二、 學(xué)時(shí)：4學(xué)時(shí)【目的要求】1、 掌握Straud離體蛙心的灌流方法2、 觀察鈉、鉀、鈣三種離子與腎上腺素、異丙腎上腺素、去甲腎上腺素、乙酰膽堿、強(qiáng)心甙、氨茶堿等對(duì)離體心臟的作用【課堂提問及解答】一、離體蛙心如何制備？蟾蜍雙毀髓，將雙毀髓的蟾蜍仰臥固定在蛙板上，夾起胸骨后端的腹部皮膚剪一小口，再將手術(shù)剪由切口處伸人皮下向左右兩惻鎖骨外惻方向剪開皮膚，并向頭端掀開。用鑷子提起胸骨后端的腹肌并剪一小口，將手術(shù)剪由切口處伸人腹腔內(nèi)，緊貼胸壁（以免損壞心臟和血管）沿皮膚切口剪開肌肉，剪斷左右鳥骨和鎖骨，使創(chuàng)口呈倒三角形。用眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開即可暴露心臟。在暴露心臟的主動(dòng)脈干下方引兩根線，一條在主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用，另一根則在動(dòng)脈圓錐上方，系一松結(jié)用于結(jié)扎固定蛙心插管。左手持左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線，用眼科剪在松結(jié)上方左主動(dòng)脈根部剪一小斜口，右手將盛有少許任氏液，大小適宜的蛙心插管由此剪口處插入動(dòng)脈圓錐，當(dāng)插管頭到達(dá)動(dòng)脈圓錐時(shí)，再將插管稍向后退，并轉(zhuǎn)向心室中央方向，在心室收縮期插入心室，判斷蛙心插管是否進(jìn)入心室可根據(jù)插管內(nèi)的任氏液液面能否隨心室的舒縮而上下波動(dòng)。如蛙心插管已進(jìn)入心室，則將預(yù)先準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊，并固定在蛙心插管的側(cè)鉤上以免蛙心插管滑出心室。剪斷主動(dòng)脈左右分支。輕輕提起蛙心插管以抬高心臟，用一線在靜脈竇與腔靜脈交界處作一結(jié)扎，結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓，以免傷及靜脈竇，在結(jié)扎線外側(cè)剪斷所有組織，將蛙心游離出來即可。二、腎上腺素、乙酰膽堿、強(qiáng)心甙、氨茶堿這幾種藥物中能增強(qiáng)心臟收縮張力的是哪幾個(gè)？腎上腺素、強(qiáng)心甙、氨茶堿【實(shí)驗(yàn)原理介紹】蟾蜍心臟離體后，用理化特性近似其血漿的任氏液，在一定時(shí)間內(nèi)可以保持心臟節(jié)律性收縮舒張，改變灌流液成分，心臟收縮舒張幅度與頻率會(huì)隨之變化?！局攸c(diǎn)和難點(diǎn)】一、 重點(diǎn)1、 Straud離體蛙心的制備與灌流方法；2、 BL-420生物信息記錄系統(tǒng)檢測(cè)記錄心肌收縮張力曲線。二、 難點(diǎn)1、 0.65%NaCl對(duì)心肌收縮張力曲線影響的機(jī)制2、 乙酰膽堿對(duì)心肌收縮張力曲線影響的機(jī)制【觀察指標(biāo)】心功能：心跳頻率、幅度，心肌收縮張力曲線和舒縮程度【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】一、 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：蟾賒二、 實(shí)驗(yàn)分組：共6組三、 藥品、器材：生物信息記錄儀、張力傳感器、蛙類手術(shù)器械一套、玻璃分針、濾紙、棉球、澆杯2個(gè)、縫線、滴管2支、蛙心夾、鐵支架、雙凹夾2個(gè)、試管夾、蛙心插管、任氏液、0.65%NaCl、3%CaCl2、1%KCl、1:10000腎上腺素、1:100000乙酰膽堿、1:10000異丙腎上腺素、25:1000氨茶堿(2.5%)、25:100000毒K(0.025%)四、 觀察指標(biāo)：心功能：心跳頻率、幅度，心肌收縮張力曲線和舒縮程度五、 實(shí)驗(yàn)步驟：1、Straud離體蛙心制備(一)蟾蜍雙毀髓術(shù)枕骨大孔的定位：左手握住軀干及肢體，右手母指與食指握住蟾蜍的唇尖部前后搖動(dòng)，在其頭部背面可見一明顯的凹陷點(diǎn)即為枕骨大孔處或左手握住蟾蜍軀干及肢體，食指向下壓蟾蜍的頭部，用金屬探針（蛙鉆）由枕骨沿正中線向脊柱端觸劃，當(dāng)觸到凹陷處即枕骨大孔處。（2）蟾蜍雙毀髓金屬探針從枕骨大孔垂直進(jìn)針后與軀干平行向前折插入顱腔左右攪動(dòng)搗毀腦組織，再將針尖后退至枕骨大孔與軀干平行向后折刺入脊椎管搗毀脊髓至蟾蜍四肢松軟、呼吸消失既可備用。（三）蛙心標(biāo)本制備蟾蜍雙毀髓，將雙毀髓的蟾蜍仰臥固定在蛙板上，夾起胸骨后端的腹部皮膚剪一小口，再將手術(shù)剪由切口處伸人皮下向左右兩惻鎖骨外惻方向剪開皮膚，并向頭端掀開。用鑷子提起胸骨后端的腹肌并剪一小口，將手術(shù)剪由切口處伸人腹腔內(nèi)，緊貼胸壁（以免損壞心臟和血管）沿皮膚切口剪開肌肉，剪斷左右鳥骨和鎖骨，使創(chuàng)口呈倒三角形。用眼科鑷提起心包膜并用眼科剪剪開即可暴露心臟。在暴露心臟的主動(dòng)脈干下方引兩根線，一條在主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用，另一根則在動(dòng)脈圓錐上方，系一松結(jié)用于結(jié)扎固定蛙心插管。左手持左主動(dòng)脈遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線，用眼科剪在松結(jié)上方左主動(dòng)脈根部剪一小斜口，右手將盛有少許任氏液，大小適宜的蛙心插管由此剪口處插入動(dòng)脈圓錐，當(dāng)插管頭到達(dá)動(dòng)脈圓錐時(shí)，再將插管稍向后退，并轉(zhuǎn)向心室中央方向，在心室收縮期插入心室，判斷蛙心插管是否進(jìn)入心室可根據(jù)插管內(nèi)的任氏液液面能否隨心室的舒縮而上下波動(dòng)。如蛙心插管已進(jìn)入心室，則將預(yù)先準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊，并固定在蛙心插管的側(cè)鉤上以免蛙心插管滑出心室。剪斷主動(dòng)脈左右分支。輕輕提起蛙心插管以抬高心臟，用一線在靜脈竇與腔靜脈交界處作一結(jié)扎，結(jié)扎線應(yīng)盡量下壓，以免傷及靜脈竇，在結(jié)扎線外側(cè)剪斷所有組織，將蛙心游離出來即可。

3、觀察項(xiàng)目：正常蛙心收縮張力曲線；新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后將任氏液換為0.65%NaCl溶液，觀察心功能；新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后在任氏液中加3%CaCl21?2滴，觀察心功能;新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后在任氏液中加1%KCl1?2滴，觀察心功能；新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后在任氏液中加1：10000腎上腺素溶液1?2滴，觀察心功能；新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后在任氏液中加1：100000的乙酰膽堿1?2滴，觀察心功能；新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后在任氏液中加1：10000異丙腎上腺素1?2滴，觀察心功能；新鮮任氏液換洗待曲線恢復(fù)正常后插管內(nèi)任氏液換成低鈣任氏液，觀察心功能；當(dāng)心力出現(xiàn)衰竭時(shí)，加入25：100000的毒K0.3ml觀察心功能變化，然后重復(fù)(8)。當(dāng)心力出現(xiàn)衰竭時(shí)，加入25:10000氨茶堿0.3ml，觀察心功能變化?！咀⒁馐马?xiàng)】1、 制備蛙心標(biāo)本時(shí)，勿傷及靜脈竇；2、 上述各實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，一旦出現(xiàn)變化就應(yīng)立即用新鮮任氏液換洗，以免心肌受損，但必須待心功能恢復(fù)正常后方能進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)；3、 蛙心插管液面應(yīng)保持恒定，以免影響結(jié)果；4、 滴加藥品和換取新鮮任氏液須及時(shí)標(biāo)記，以便觀察分析；5、 吸新鮮任氏液和吸蛙心插管內(nèi)廢液的滴管應(yīng)區(qū)分專用，不可混淆使用，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；6、 藥物作用不明顯時(shí)，可適量增加，密切觀察藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果?！纠碚擃A(yù)期結(jié)果】觀察項(xiàng)目心跳頻率心跳幅度對(duì)照0.65%NaCl減慢減小3%CaCl2增快增大1%KCI增快減小1：10000腎上腺素增快增大1：100000乙酰膽堿減慢減小1：10000異丙腎上腺素增快增大低鈣任氏液減慢減小25：100000毒K減慢增大25:10000氨茶堿增快增大III入 丁▼ ▼5.乙酰膽堿Ach自律性降低，心率減慢心肌收縮力降低6、1：10000異丙腎上腺素激動(dòng)B1受體，機(jī)制同腎上腺素，心率加快，收縮增強(qiáng)7、 低鈣任氏液細(xì)胞外液鈣離子減少，興奮收縮耦聯(lián)削弱，心率減慢，收縮減弱，模擬心衰8、 25：100000毒K強(qiáng)心苷類藥物，可選擇性作用于心肌細(xì)胞，可競(jìng)爭性抑制心肌細(xì)胞膜上的Na+-K+-ATP酶，使心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量增加，產(chǎn)生正性肌力作用，使心肌收縮力增強(qiáng)，同時(shí)強(qiáng)心苷可增強(qiáng)迷走神經(jīng)活性，具有負(fù)性頻率作用，使心率減慢9、25:10000氨茶堿磷酸二酯酶抑制劑，磷酸二酯酶是cAMP降解酶，抑制此酶可增加細(xì)胞內(nèi)cAMP含量，發(fā)揮正性肌力作用【結(jié)論】1、 0.65%NaCl，1：100000Ach，低鈣任氏液可使蛙心頻率減慢，心跳幅度減?。?、 3%CaCl2,1：10000腎上腺素，1：10000異丙腎上腺素，25:10000氨茶堿可使蛙心頻率