微生物發(fā)酵豆粕對早期斷奶仔豬生長及血清指標(biāo)的影響

微生物發(fā)酵豆粕對早期斷奶仔豬生長及血清指標(biāo)的影響

豆豆是我國廣泛使用的主要蛋白質(zhì)飼料資源。然而，根據(jù)研究，大量豆豆被用作飼料蛋白，是因?yàn)轲B(yǎng)分和抗劑原因的存在，年輕動物的腸道過敏反應(yīng)，損害了腸道的形態(tài)結(jié)構(gòu)，影響了養(yǎng)分的吸收和健康生長。斷奶仔豬由于其消化道生理功能發(fā)育不完善,內(nèi)源酶分泌不足,對飼料營養(yǎng)源質(zhì)量要求高,蛋白質(zhì)營養(yǎng)是斷奶仔豬營養(yǎng)的核心,對仔豬的生長發(fā)育起著舉足輕重的的作用。近年來,研究顯示,生物發(fā)酵可以改善大豆及豆粕的營養(yǎng)品質(zhì),降低抗?fàn)I養(yǎng)因子含量,尤其是抗原蛋白水平。因此,本研究采用Aspergillusoryzae發(fā)酵處理豆粕,通過對仔豬生長、腸道形態(tài)學(xué)及血清相關(guān)指標(biāo)分析,以探討微生物處理豆粕的生物學(xué)價(jià)值。1材料和方法1.1試驗(yàn)豬及飼糧營養(yǎng)水平試驗(yàn)地點(diǎn)在浙江省海寧市三聯(lián)養(yǎng)豬廠,選擇60頭出生時(shí)間相近,出生體重相似,健康狀況良好的35日齡斷奶杜×長×大三元雜交仔豬作為試驗(yàn)仔豬,飼喂期為23d。試驗(yàn)仔豬隨機(jī)分為2組:試驗(yàn)組(微生物發(fā)酵豆粕組)和對照組(豆粕組),每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)10頭。飼糧營養(yǎng)水平參照NRC(1998)豬的營養(yǎng)需要。飼糧配方如表1。1.2發(fā)酵溫度和接種發(fā)酵豆粕的制備參照Hong等方法稍作修改。干燥的豆粕在蒸餾水里浸泡60min,接著在溫度為60～70℃蒸汽罐里煮1h,室溫下冷卻1h,然后按照0.3%的Aspergillusoryzae接種,混合,在無菌塑料袋發(fā)酵48h。新鮮的發(fā)酵豆粕在50～60℃干燥3d,粉碎,混合到飼料中,對照為不發(fā)酵的普通豆粕。發(fā)酵前后營養(yǎng)成分變化見表2。1.3測試方法1.3.1試驗(yàn)4:30日增重、食性能計(jì)劃1次飼養(yǎng)場地定期進(jìn)行消毒,以確保飼養(yǎng)條件。試驗(yàn)仔豬自由飲水,每天飼喂5次,從早上7:30到晚上9:30每3h飼喂1次。試驗(yàn)開始、結(jié)束時(shí),仔豬空腹24h稱個(gè)體重,統(tǒng)計(jì)每重復(fù)耗料量,計(jì)算仔豬平均日增重、采食量、料重比。試驗(yàn)結(jié)束后,從每個(gè)處理選出6頭仔豬(每個(gè)重復(fù)2頭),進(jìn)行屠宰試驗(yàn),取血清和試驗(yàn)所需樣品。1.3.2腹瀉率的觀察腹瀉程度用腹瀉指數(shù)表示,腹瀉指數(shù)為糞便評分之和。1.3.3血清免疫指標(biāo)測定血清尿素氮用瑞典產(chǎn)BeckmanCX-7DELTA型全自動生化分析儀按脲酶法測定,血清免疫指標(biāo)用瑞典產(chǎn)BeckmanCX-7DELTA型全自動生化分析儀按免疫濁度法測定,所用試劑盒由寧波慈城生化試劑廠提供。1.3.4討論十二指腸的形態(tài)試驗(yàn)光鏡樣本的制作和觀察為固定樣品經(jīng)脫水-包埋-切片-染色等處理后,用LeicaDMR型光鏡進(jìn)行觀察。1.4處理數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)處理與分析采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因子方差分析和Duncan氏多重比較,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2結(jié)果2.1平均日增重和腹瀉指數(shù)試驗(yàn)結(jié)果表明,飼喂微生物發(fā)酵豆粕能使仔豬的平均日增重提高5.68%(P<0.05),料重比降低8.39%(P<0.05),腹瀉指數(shù)降低39.96%(P<0.01)。2.2比例:5.97%p>0.1由表4可知,血清尿素氮含量降低39.47%(P<0.01);血清IgG水平下降6.35%(P<0.05),IgA與IgM水平未產(chǎn)生顯著變化。2.3對腸道形狀的光度觀察圖1光鏡觀察表明,試驗(yàn)組仔豬的小腸上皮細(xì)胞微絨毛較好,整齊而致密,顯得發(fā)育良好;對照組仔豬空腸上皮微絨毛有萎縮現(xiàn)象,微絨毛稀疏。3討論3.1新型豆?jié){和消化豆豆粕是目前飼料工業(yè)廣泛應(yīng)用的植物蛋白源,但研究表明,普通熱處理的大豆產(chǎn)品仍會引起斷奶仔豬的消化過程異常,包括消化物的運(yùn)動和腸道黏膜的炎癥反應(yīng),這種變化是由于一些殘留和未降解的抗?fàn)I養(yǎng)因子所引起,最終影響動物正常生長。研究顯示,豆粕經(jīng)過處理,使其中的抗?fàn)I養(yǎng)因子去除或減少,能有效提高仔豬的生產(chǎn)性能。Hong等研究顯示豆粕經(jīng)過發(fā)酵處理顯著降低了大分子抗原蛋白和胰蛋白酶抑制因子的水平。Kiers研究發(fā)現(xiàn)Rhizopussubtilis發(fā)酵豆粕飼喂仔豬能顯著提高仔豬的日增重和采食量。本研究使用Aspergillusoryzae發(fā)酵豆粕,改善了豆粕的營養(yǎng)價(jià)值,同時(shí)有效的去除了胰蛋白酶抑制因子(Table2)。試驗(yàn)結(jié)果顯示用發(fā)酵豆粕飼喂仔豬,可顯著提高仔豬的生長性能,同時(shí)降低其腹瀉率。3.2免疫刺激作用血清生理生化指標(biāo)有利于判定飼用大豆蛋白源對仔豬的適合程度。本研究發(fā)現(xiàn),微生物發(fā)酵豆粕降低了仔豬血清中免疫球蛋白IgG水平,其原因可能是發(fā)酵后豆粕中的抗原蛋白被有效降解,減少了對仔豬的免疫刺激效應(yīng)。同時(shí),本試驗(yàn)中豆粕經(jīng)微生物發(fā)酵后能有效降低仔豬血漿尿素水平,表明進(jìn)入體內(nèi)的蛋白質(zhì)利用效率提高,從日增重和飼料利用率的相對顯著提高也表明經(jīng)微生物處理能顯著提高氮的利用率。3.3胰蛋白酶抑制因子的影響小腸絨毛是養(yǎng)分吸收的主要場所,絨毛上皮細(xì)胞是消化吸收的功能細(xì)胞,對酶的活動和營養(yǎng)物質(zhì)吸收非常有利。Zarkadas等研究表明,斷奶仔豬的絨毛高度與胰蛋白酶抑制因子的水平呈負(fù)相關(guān)。本試驗(yàn)表明,飼喂斷奶仔豬發(fā)酵豆粕后,小腸上皮細(xì)胞和微絨毛發(fā)育良好;而對照組微絨毛萎縮,排列不整。這表明,發(fā)酵后胰蛋白酶抑制因子的完全消除,有效的降低了豆粕對斷奶仔豬腸道的影響。此外,還有研究表明,豆粕中的抗原蛋白(主要包括11s球蛋白和β-伴球蛋白)對仔豬消化道也有很大的負(fù)面影響。4發(fā)酵豆?jié){飼婦人①與普通豆粕相比,微生物發(fā)酵