平面色譜法中展開(kāi)劑的應(yīng)用

平面色譜法中展開(kāi)劑的應(yīng)用

由于該層析成像設(shè)備簡(jiǎn)單且易于操作，該層析成像的初始識(shí)別和實(shí)驗(yàn)方法具有高度的特異性。由于樣品少，化學(xué)合成和天然藥物的定性和純度試驗(yàn)，以及鉻光刻的重要性，因此在分析中得到了很好的應(yīng)用。這主要是由于分離效果，分離效果主要由三個(gè)因素決定。樣品、吸附劑和廣告劑。三者中樣品的性質(zhì)（如溶解度、酸堿性及極性）是固定的。吸附劑的活性和非活性，在吸附薄層色譜中通常以硅膠為主，故種類(lèi)也是有限的。而展開(kāi)劑種類(lèi)則千變?nèi)f化，并且受制約的因素比較多，主要的還是樣品的性質(zhì)和吸附劑。因此可以這樣說(shuō)能找到與樣品及吸附劑相匹配的展開(kāi)劑就能對(duì)樣品的分離起決定性作用。以下就對(duì)展開(kāi)劑的選擇作一探討：一、作為一種開(kāi)口劑，應(yīng)滿足以下條件1助劑對(duì)芳香烴及其衍生物的分離至少要用AR試劑，展開(kāi)劑如有雜質(zhì)，則會(huì)直接影響分離效果。如三氯甲烷、乙酸乙酯和乙醚中含有少量的醇和水會(huì)使其極性增大；芳香烴中含有雜環(huán)化合物和酚類(lèi)物質(zhì)，鹵化烴中含有游離酸也會(huì)使極性增大；三氯甲烷中的光氣、乙醚中的過(guò)氧化物有可能氧化或破壞被分離組分等。2適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定性一般不用三氯甲烷，因其中的乙醇量不夠則易生成光氣。3低粘度4影響顯色和定量展開(kāi)后能快速地在薄層上揮發(fā)樣品，不影響顯色和定量；揮發(fā)性過(guò)弱，飽和時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，不利于展開(kāi)，過(guò)強(qiáng)則在展開(kāi)過(guò)程中易沖蓋而導(dǎo)致系統(tǒng)不飽和致使實(shí)驗(yàn)失敗。5.嘗試盡量減少6.二、展開(kāi)劑的使用、洗脫和分離采用“相似相溶”原則來(lái)選擇展開(kāi)劑，也就是說(shuō)極性強(qiáng)的組分需用極性強(qiáng)的展開(kāi)劑，極性弱組分需用極性弱的展開(kāi)劑。在TLC實(shí)驗(yàn)中，更多地采用試驗(yàn)方法，在薄層板上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在吸附薄層上先用單一的弱極性溶劑展開(kāi)：若所選展開(kāi)劑混合物的點(diǎn)都移到溶劑的前沿，則說(shuō)明溶劑的極性過(guò)強(qiáng)，如果所選的展開(kāi)劑幾乎不能使混合物中的組分移動(dòng)，則說(shuō)明溶劑極性過(guò)弱。然后再按溶劑的洗脫順序依次更換極性較大的溶劑進(jìn)行試驗(yàn)。若用單一溶劑不能分離時(shí)，可用兩種以上的多元展開(kāi)劑，并不斷地改變多元展開(kāi)劑的組成和比例，使待測(cè)組分的Rf值在0.2～0.8之間，定量測(cè)定應(yīng)在0.3～0.5之間，最終能使各組分之間有效地分離。但混合展開(kāi)劑配制的比例要精確，特別是比例小的，如1～10ml的應(yīng)用吸管移取，現(xiàn)用現(xiàn)配。1物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)由于物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)不同，則極性有所不同，為了更好地分析物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)與底劑之間的關(guān)系，表1是有關(guān)文獻(xiàn)中定性地給出典型化學(xué)結(jié)構(gòu)和底劑之間的強(qiáng)度因子ε0值。表中可見(jiàn)不同的化合物都有相應(yīng)的ε0值。參照表1分析物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，根據(jù)物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)在表1中確定相對(duì)應(yīng)的ε0值，然后用ε0值在表2中確定接近ε0值的溶劑作為底劑，取ε0值盡可能低些的無(wú)氫鍵的的溶劑為底劑。使用表1和表2時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：（1）烴基和鹵素取代芳香族化合物ε0值的改變不超過(guò)原來(lái)的±0.05；(2）典型的脂肪族化合物R=C6H13，化合物中R=2～20碳的化合物ε0值不超過(guò)典型化合物ε0值的±0.05；(3）物質(zhì)的母核相同，分子中極性基團(tuán)較多，則分子的極性越大。一般情況下，與溶劑易形成氫鍵的官能團(tuán)數(shù)目增加分子極性增大，但在分子內(nèi)形成氫鍵的，則分子極性減弱，相似的分子結(jié)構(gòu)中，芳香、共軛雙鍵多的極性增強(qiáng)。2加入調(diào)節(jié)劑：對(duì)被分離物質(zhì)進(jìn)行調(diào)節(jié)在吸附薄層中，調(diào)節(jié)劑在吸附和解吸附過(guò)程中起了主要作用，選擇哪一種溶劑調(diào)節(jié)劑直接影響物質(zhì)的分離效果。加入極性太強(qiáng)的調(diào)節(jié)劑，則調(diào)節(jié)劑物質(zhì)優(yōu)先占領(lǐng)吸附點(diǎn)；加入極性太弱的調(diào)節(jié)劑則物質(zhì)較溶劑優(yōu)先占領(lǐng)吸附點(diǎn)，這兩種情況都不利于物質(zhì)的分離，只有加入的溶劑與分離物質(zhì)有相同或相似的官能團(tuán)時(shí)，分離效果會(huì)較好。這樣一方面有利于物質(zhì)和調(diào)節(jié)劑競(jìng)爭(zhēng)吸附點(diǎn)，另一方面物質(zhì)與調(diào)節(jié)劑相似性結(jié)構(gòu)增強(qiáng)，物質(zhì)在展開(kāi)劑溶解度也相應(yīng)增大。加入調(diào)節(jié)劑應(yīng)注意以下四個(gè)方面的內(nèi)容,且這四個(gè)方面是相互聯(lián)系的:(1)加入的調(diào)節(jié)劑與被分離物質(zhì)應(yīng)有相同或相似的官能團(tuán);(2)被分離物質(zhì)具有兩種或者兩種以上的官能團(tuán)時(shí),加入一種調(diào)節(jié)劑,調(diào)節(jié)劑的官能團(tuán)與被分離物質(zhì)中一種官能團(tuán)相同或相似,當(dāng)加入第二種調(diào)節(jié)劑時(shí),調(diào)節(jié)劑官能團(tuán)與被分離組分的各種官能團(tuán)相同或相似均可;(3)被分離物質(zhì)具有多種官能團(tuán),如天然藥物,一般情況下選擇極性最強(qiáng)的官能團(tuán)即加入調(diào)節(jié)劑的官能團(tuán)與物質(zhì)極性最強(qiáng)的官能團(tuán)相同或相似;(4)被分離物質(zhì)具有強(qiáng)極性的官能團(tuán)時(shí),任選一種官能團(tuán)即可。3.拖尾抑制劑的篩選展開(kāi)劑中加入少量酸或堿,一般的酸有乙酸、乙二酸、磷酸、甲酸等,堿包括三乙胺、二乙胺、吡啶、氨試液等,這類(lèi)溶劑可抑制某些酸堿性物質(zhì)或其鹽類(lèi)解離而產(chǎn)生斑點(diǎn)拖尾,故稱之為拖尾抑制劑。4鹽酸普魯卡因?yàn)榈讋┑某醪胶Y選鹽酸普魯卡因檢查雜質(zhì)“對(duì)氨基苯甲酸”時(shí)給出了苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14:1:1:4）的展開(kāi)劑。根據(jù)上述理論分析，鹽酸普魯卡因的基本結(jié)構(gòu)酸為“”。從表1中找到“”的結(jié)構(gòu)，確定ε0值在0.25左右的溶劑為底劑，即苯為底劑。由于其具“”的結(jié)構(gòu)，因此加入了相同官能團(tuán)的冰醋酸為調(diào)節(jié)劑。三、．展開(kāi)劑的選擇1．對(duì)普通酸性的組分，特別是離解度較大的弱酸性組分，在展開(kāi)劑中加入一定比例的酸，可防止拖尾現(xiàn)象；對(duì)于多元展開(kāi)劑，例如：苯-丙酮，則可加入二乙胺來(lái)調(diào)整展開(kāi)劑的pH值，使分離集中。2．在分離堿性物質(zhì)，如生物堿，多數(shù)情況下是以氧化鋁為吸附劑，則要選用中性溶劑為展開(kāi)劑；若采用硅膠為吸附劑，則選用堿性展開(kāi)劑為宜。例如：鹽酸小檗堿的展開(kāi)劑為：乙酸乙酯-三氯甲烷-甲醇-二乙胺（8:2:2:1）；茶堿的展開(kāi)劑為：正丁醇-丙酮-三氯甲烷-濃氨溶液（4:3:3: