農(nóng)藥對(duì)小菜蛾的生物毒性研究

農(nóng)藥對(duì)小菜蛾的生物毒性研究

野生香脂魚(yú)（l.）（lepi斗花：yponatopo）是中國(guó)十字花科植物中最重要的害蟲(chóng)之一。該蟲(chóng)具有生殖能力強(qiáng)，寄主范圍廣(TalekarandShelton,1993;呂利華等，2003;陳科偉等，2006)，以及極強(qiáng)的遷飛能力(SmithandSears,1982)等特性，對(duì)十字花科蔬菜的生產(chǎn)常造成嚴(yán)重危害。雖然小菜蛾的成災(zāi)涉及十字花科蔬菜品種(呂利華等，2003)、耕作制度、氣候和本身生物學(xué)特性等諸多因素，但是它對(duì)殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生抗藥性和農(nóng)藥頻繁使用造成的田間天敵的缺失是極其重要的成災(zāi)因素之一(張廣學(xué)，1999;林珠鳳等，2007)。目前化學(xué)防治仍然是控制小菜蛾為害的有效應(yīng)急手段，因此測(cè)定不同類型農(nóng)藥對(duì)田間小菜蛾的毒力及其天敵的安全性，對(duì)于制定科學(xué)用藥策略、保護(hù)和利用天敵的控害能力，具有重要意義。為此，作者于2009年11月至2010年5月測(cè)定11種不同類型農(nóng)藥對(duì)小菜蛾的生物活性，并對(duì)浙江省蔬菜地主要天敵草間小黑蛛Erigonidiumgraminicolum(Sundevall)的安全性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，該研究結(jié)果將為十字花科專食性害蟲(chóng)小菜蛾的有效防治，以及農(nóng)田蜘蛛的保護(hù)利用提供理論指導(dǎo)。1材料和方法1.1草間小蛛和成蛛的飼養(yǎng)供試小菜蛾于2009年采自浙江上虞的雨衣甘藍(lán)地。小菜蛾在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由甘藍(lán)(Brassicaoleraceavar.capitata)飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為:溫度(25±1)℃，相對(duì)濕度60%～70%，光照周期L∶D=14∶10。待幼蟲(chóng)發(fā)育到3齡中期后，用于試驗(yàn)。草間小黑蛛采于上虞的甘藍(lán)地，采蟲(chóng)時(shí)間2010年5月。成蛛在田間用離心管捕捉，單頭飼養(yǎng)，帶到實(shí)驗(yàn)室后第2天直接用于試驗(yàn);初孵幼蛛采用田間收集卵塊的方法，拿回室內(nèi)先等其孵化，待其補(bǔ)充水分后次日用于試驗(yàn)。幼蛛和成蛛的室內(nèi)飼養(yǎng)條件同小菜蛾。試驗(yàn)挑選行動(dòng)活潑的蜘蛛，試驗(yàn)前均饑餓約24h。1.2聚乳酸鹽原藥的使用高效氯氰菊酯Alpha-cypermethrin、氟蟲(chóng)腈Fipronil、茚蟲(chóng)威Indoxacarb、阿維菌素Abamection、啶蟲(chóng)隆Chlorfluazuron、丁醚脲Diafenthiuron、蟲(chóng)酰肼Tebufenozide、溴蟲(chóng)腈Chlorfenapyr統(tǒng)一由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所購(gòu)買質(zhì)量可靠的原藥配制成乳油，并分析檢測(cè)獲得其有效含量;巴丹Cartap為直接購(gòu)買鹽酸鹽原藥用于試驗(yàn)，同樣經(jīng)檢測(cè)獲得原藥的有效含量;多殺菌素Spinosad、蘇云金桿菌Bacillusthuringiensis則分別使用生產(chǎn)上常用的制劑產(chǎn)品菜喜和農(nóng)林豐。以上6大類11種殺蟲(chóng)劑的試驗(yàn)濃度參考這些藥劑的田間推薦濃度設(shè)置，詳見(jiàn)表1。1.3測(cè)試方法1.3.1調(diào)查時(shí)間及方法采用葉片藥膜法。用潔凈的甘藍(lán)葉片，剪成直徑6.5cm的圓片(避免主葉脈)。將葉片在藥液中浸泡10s后取出晾干(25℃，2h)，將晾干的葉片放在直徑6.5cm的塑料培養(yǎng)皿中，并接入3齡中期幼蟲(chóng)10頭，覆蓋雙層吸水卷紙后蓋上培養(yǎng)皿蓋，正面朝上置于培養(yǎng)箱中(溫度(25±1)℃，相對(duì)濕度RH60%～70%，光照周期L∶D=14∶10)。根據(jù)殺蟲(chóng)劑的殺蟲(chóng)特性不同，其調(diào)查結(jié)果時(shí)間不同。其中啶蟲(chóng)隆、蟲(chóng)酰肼和Bt制劑分別在96h檢查死亡率，其余8種藥劑48h后調(diào)查。以小毛筆輕觸蟲(chóng)體，不能協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)的蟲(chóng)體視為死亡。試驗(yàn)以清水處理的甘藍(lán)葉片作為對(duì)照，每處理重復(fù)4次。1.3.2草間小蛛1.8用試管藥膜法(郭世儉等，1998;2003)。供試藥劑、濃度和稀釋方法同1.2，亦用清水稀釋。將供試藥液注滿試管(內(nèi)徑1.8cm，高7cm)，靜置10s后去掉藥液，待自然晾干，形成藥膜。引入24h內(nèi)初孵幼蛛或成蛛1頭，試管內(nèi)放置一小的濕棉球?yàn)橹┲胩峁┧郑糜谂囵B(yǎng)箱中(溫度(25±1)℃，光照周期L∶D=14∶10)飼養(yǎng)。分別于處理后2、12、24、48h檢查草間小黑蛛死亡情況，以蜘蛛不能爬行作為判別死亡的標(biāo)準(zhǔn)。以清水處理作對(duì)照。每組處理重復(fù)20～35次。1.4dps數(shù)據(jù)處理試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用EXCEL辦公軟件及唐啟義和馮明光(2007)研制的DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)誤，均值差異顯著性通過(guò)Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行多重分析比較。2藥劑防治小菜初步控制2.111種農(nóng)藥常用劑量對(duì)小菜蛾的室內(nèi)毒性采用室內(nèi)葉片藥膜法測(cè)定了11種農(nóng)藥田間常用劑量對(duì)上虞地區(qū)小菜蛾的毒性。試驗(yàn)結(jié)果表明，11種農(nóng)藥中蘇云金桿菌、氟蟲(chóng)腈、溴蟲(chóng)腈、多殺菌素、丁醚脲殺蟲(chóng)效果最好，藥劑處理后小菜蛾幼蟲(chóng)死亡率均為100%;其次是啶蟲(chóng)隆和巴丹，處理后死亡率分別為90.0%和87.5%，但是二者的殺蟲(chóng)效果顯著低于蘇云金桿菌、氟蟲(chóng)腈、溴蟲(chóng)腈、多殺菌素、丁醚脲(P<0.05)。阿維菌素、茚蟲(chóng)威、蟲(chóng)酰肼對(duì)小菜蛾的殺蟲(chóng)效果一般，處理后死亡率分別為72.50%、67.5%和55.0%，殺蟲(chóng)效果顯著低于蘇云金桿菌等前7個(gè)農(nóng)藥。本試驗(yàn)中高效氯氰菊酯對(duì)小菜蛾幼蟲(chóng)死亡率為0，無(wú)殺蟲(chóng)效果，小菜蛾幼蟲(chóng)對(duì)其表現(xiàn)出極強(qiáng)的抗藥性(表2)。2.2從急性毒性來(lái)看，植物葉片幼蛛的毒性較高本試驗(yàn)同時(shí)評(píng)估了11種農(nóng)藥對(duì)草間小黑蛛初孵幼蛛和成蛛的毒性(表3)。對(duì)于初孵幼蛛，隨著藥劑處理時(shí)間的延長(zhǎng)，11種農(nóng)藥導(dǎo)致的死亡率均逐漸上升。處理后48h，巴丹、溴蟲(chóng)腈對(duì)幼蛛表現(xiàn)為極高的毒性，死亡率達(dá)100%;阿維菌素和高效氯氰菊酯的毒性次之，幼蛛死亡率為87.1%～88.6%，也表現(xiàn)為高毒性;氟蟲(chóng)腈、茚蟲(chóng)威、多殺菌素雖然初始毒性低(處理后2h幼蛛死亡率分別為10.0%、0和0)，但是處理后48h幼蛛死亡率位于55.0%～70.0%之間，仍表現(xiàn)為較高的毒性;而丁醚脲、蘇云金桿菌、蟲(chóng)酰肼和啶蟲(chóng)隆對(duì)草間小黑蛛幼蛛的毒性較低，48h幼蛛死亡率位于22.7%～28.0%之間，顯著低于其它7種農(nóng)藥(P<0.05)，且這4種農(nóng)藥的藥后2h的急性毒性很低，死亡率均為0(表3)。對(duì)于草間小黑蛛成蛛，11種農(nóng)藥對(duì)其急性毒性均較低，僅巴丹、氟蟲(chóng)腈藥后2h有7.7%、6.7%的成蛛死亡(表4)。而阿維菌素、高效氯氰菊酯處理后2h和12h成蛛無(wú)死亡或死亡率低，但24h時(shí)死亡率分別達(dá)到40.0%和30.0%，48h時(shí)則進(jìn)一步上升到50.0%，對(duì)成蛛毒性最大，顯著高于試驗(yàn)的其它9種藥劑(P<0.05);毒性次之的是巴丹、丁醚脲、氟蟲(chóng)腈、多殺菌素，處理后48h死亡率分別為30.8%、23.3%、20.0%和13.3%;而蘇云金桿菌、溴蟲(chóng)腈、蟲(chóng)酰肼的48h死亡率僅為6.7%，啶蟲(chóng)隆和茚蟲(chóng)威死亡率為0，這些藥劑毒性已經(jīng)很低或該劑量下沒(méi)有表現(xiàn)出毒性，對(duì)草間小黑蛛成蛛安全(表4)。3農(nóng)藥對(duì)3齡幼蟲(chóng)的效果據(jù)本項(xiàng)目組2010年春季上海、浙江兩地的田間調(diào)查顯示，草間小黑蛛是華東地區(qū)十字花科蔬菜地的主要蜘蛛種類(調(diào)查結(jié)果另文發(fā)表)，由于該蜘蛛具有很強(qiáng)的捕食小菜蛾幼蟲(chóng)的能力(林文彩等，2006)，因此評(píng)估農(nóng)藥對(duì)草間小黑蛛的安全性對(duì)于指導(dǎo)田間科學(xué)用藥具有重要指導(dǎo)作用。本試驗(yàn)選擇了6大類11種農(nóng)藥，是目前防治十字花科蔬菜小菜蛾的主要品種(注:氟蟲(chóng)腈已于2009年10月起禁止在蔬菜作物上使用，農(nóng)業(yè)部、工業(yè)和信息化部、環(huán)境保護(hù)部聯(lián)發(fā)的第1157號(hào)公告)。對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的試驗(yàn)結(jié)果表明，蘇云金桿菌、氟蟲(chóng)腈、溴蟲(chóng)腈、多殺菌素、丁醚脲對(duì)小菜蛾的殺蟲(chóng)效果最好，常用劑量室內(nèi)死亡率達(dá)100%。就防治小菜蛾而言，除去禁用的氟蟲(chóng)腈，蘇云金桿菌、溴蟲(chóng)腈、多殺菌素、丁醚脲都可用于十字花科蔬菜地小菜蛾的防治。但是由于農(nóng)田存在眾多可利用的天敵，篩選對(duì)目標(biāo)害蟲(chóng)高效、對(duì)天敵低毒的農(nóng)藥種類也是天敵保護(hù)和利用的重要環(huán)節(jié)。本次農(nóng)藥對(duì)草間小黑蛛毒性測(cè)定結(jié)果顯示，丁醚脲、蘇云金桿菌、蟲(chóng)酰肼和啶蟲(chóng)隆4種藥劑對(duì)草間小黑蛛幼蛛毒性低，藥劑處理后48h的死亡率低于30%;而成蛛由于其抗逆性強(qiáng)，處理后48h后死亡率低于30%的藥劑增加到7種，分別是丁醚脲、多殺菌素、蘇云金桿菌、溴蟲(chóng)腈、蟲(chóng)酰肼、啶蟲(chóng)隆和茚蟲(chóng)威(不包括氟蟲(chóng)腈)。此外，本研究中啶蟲(chóng)隆和茚蟲(chóng)威的試驗(yàn)有效濃度分別為28.0、27.6mg/L，兩藥劑對(duì)3齡小菜蛾幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)效果只有90.0%、67.5%，但這2種藥劑防治小菜蛾時(shí)的登記濃度為25～50mg/L(農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所，1991)和30～54mg/L(任璐等，2009)，