生姜凝膠貼劑的制備及體外透皮性能研究

生姜凝膠貼劑的制備及體外透皮性能研究

生姜是生姜科生姜的一種新鮮根。它是中國傳統(tǒng)藥物和用途。它是歷代“醫(yī)生止吐甲骨文”的“金石方”?！按蠖鄶?shù)嘔吐患者都吃姜，這是嘔吐家族的圣藥。”。”民間亦有單用生姜片穴位貼敷發(fā)揮抗運動病作用的記載。現(xiàn)代研究表明,生姜中的有效成分姜辣素能有效防止暈車、妊娠及化療等原因引起的惡心、嘔吐,其止吐的作用機制主要與調(diào)整胃腸機能,抑制胃運動因素有關(guān)。近年來,雖對生姜止吐作用的相關(guān)物質(zhì)基礎(chǔ)及藥效作用機制的研究已取得不少成就,但在制劑研制方面,尚存在很大差距,臨床應(yīng)用仍以服用原藥材及將生姜片貼內(nèi)關(guān)穴和神闕穴為主,存在劑型落后、使用不便等缺點。為拓展生姜的藥用價值,提高療效及患者順應(yīng)性,開發(fā)現(xiàn)代化中藥制劑,筆者以卡波姆為主要組分,配以增稠劑(聚丙烯酸鈉)、交聯(lián)劑(三氯化鋁)等,研制了生姜凝膠貼劑并對其體外透皮吸收進行了研究,為開發(fā)中藥新劑型提供依據(jù)?，F(xiàn)報道如下:1儀器和試劑盒1.1透皮擴散試驗1200型高效液相色譜儀(Agilent公司);TK-12B型透皮擴散試驗儀(上海鍇凱科技貿(mào)易有限公司);AE240電子天平(METTlER公司);貼劑黏附力測定儀(自制)等。1.2地方主義與金屬酶學(xué)中“日常規(guī)劃”的-200706生姜(購于南昌灣里區(qū)市場)經(jīng)江西中醫(yī)學(xué)院中藥鑒定組曹嵐老師鑒定為姜科植物姜(ZiniberofficinaleRose)的新鮮根莖,6-姜酚對照品(6-gingerol,上海同田生物技術(shù)有限公司,批號:241-200706);丙二醇(汕頭市光華化學(xué)品廠)卡波姆U10(CarbopolUhrez10,美國諾譽化工公司),聚丙烯酸7S(PAS7,美國諾譽化工公司),甘油(丙三醇,天津市標準科技有限公司),氮酮(Azone,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司),三氯化鋁(Aluminiumtrichloride,河北益達化工有限公司)、檸檬酸(citricacid,蘇州虹陽化工有限公司),無紡布(南昌衛(wèi)生材料廠),背襯(南昌衛(wèi)生材料廠)乙腈為色譜純,其他試劑均為分析純雄性SD大鼠,體重(200±20)g,江西中醫(yī)學(xué)院動物實驗室,合格證號:SCXK(贛):2005-0001,JZDWNO:2007-236。2方法2.1整理前的c、c兩相混合物的制備將處方量的卡波姆撒在適量去離子水中,待聚合物潤濕后將分散液以300r/min攪拌30min作為A相,將聚丙烯酸鈉粉末加入甘油,低速攪拌6min,混合均勻后作為B相,三氯化鋁粉末與檸檬酸溶于適量去離子水中低速攪拌均勻后作為C相。充分攪拌下將C相加入B相,然后在250r/min攪拌下將A相加入到B、C相的混合物中混勻,最后加入藥物流浸膏混合均勻。將此混合物超聲脫氣15min,于40℃迅速均勻涂布于無紡布上,控制涂布厚度為(1.5±0.1)mm。室溫放置,覆背襯,沖切成面積為70cm2的方形貼劑,用紙鋁塑袋塑封保存。2.2游離經(jīng)皮穿刺測試方法的建立2.2.1流動相、檢測波長色譜柱:依利特C18(4.6mm×250mm,5μm);流動相:乙腈-水(38∶62);流速1.0ml/min;檢測波長:280nm;柱溫:30℃。2.2.2峰面積及峰面積精密吸取6-姜酚對照品溶液(110μg/ml)1、2、4、6、8、10μl進樣,測定峰面積。以峰面積(X)為橫坐標,進樣量(Y,μg)為縱坐標,得線性回歸方程:Y=0.0001X+0.0605(r=0.9999)6-姜酚在1.39～13.9μg/ml與峰面積具有良好的線性關(guān)系。2.2.3組織和脂肪浸提液的制備將SD大鼠腹部長毛剪去,刮除絨毛后,剝離皮下組織和脂肪,0.1%的新潔爾滅浸泡0.5小時,用生理鹽水洗凈,置冰箱內(nèi)4℃冷藏備用。2.2.4-姜酚的測定取出備用大鼠皮,將皮膚固定于Franz擴散池上部,取生姜凝膠貼劑,揭去防粘保護層,貼于皮膚的角質(zhì)層面,以100mL去離子脫氣水為擴散介質(zhì),溫度為(37±0.5)℃水浴保溫,磁力攪拌速度為100r/min,分別于1、2、4、6、8、12、16小時取樣2ml,立即補加等量的新鮮擴散介質(zhì)。接收液以0.45μm微孔濾膜濾過,棄去初濾液,收集續(xù)濾液1ml,樣品用HPLC法測定擴散液中6-姜酚的含量,再按下列公式計算單位面積(cm2)累積滲透量:Q=[Cn×V+?Σi=1n?1×2]/SQ=[Cn×V+-Σi=1n-1×2]/S式中,Q為藥物累積經(jīng)皮滲透量(μg/cm2),S為有效皮膚滲透面積(cm2),V為接收室中接收液體積,Ci為第i(i≤n-1)個取樣點測得的藥物濃度(μg/ml),Cn:第n個取樣點測得的藥物濃度(μg/ml)。對藥物滲透曲線(藥物累積經(jīng)皮滲透量-時間曲線)的穩(wěn)態(tài)部分做切線,切線的斜率即為藥物經(jīng)皮滲透速率。3結(jié)果3.1透皮接收液的hplc測定將不含藥物的空白貼劑安裝在Franz擴散池上,操作同“2.2.4”,空白貼劑和生姜凝膠貼劑的透皮接收液的HPLC圖。結(jié)果表明,在供試品色譜圖中,在與6-姜酚對照品溶液色譜圖相應(yīng)保留時間(約19.2分鐘)處有相應(yīng)的6-姜酚峰出現(xiàn),6-姜酚峰與皮膚滲出物峰、溶劑峰等雜質(zhì)峰分離良好,處方成分對含量測定無干擾。3.2不同促滲劑作用下6-姜酚的滲透試驗在貼劑的基本處方固定后,為考察促滲劑對6-姜酚在皮膚角質(zhì)層的積累是否有促進作用,分別在貼劑中加入常用的單一及復(fù)合促滲劑4%冰片(質(zhì)量百分含量,下同)、4%氮酮、4%薄荷腦、2%丙二醇+2%氮酮促滲劑,按制備工藝制成貼劑后,以不含促滲劑的生姜凝膠貼劑為對照,按“2.2.4”項下方法進行離體經(jīng)皮滲透試驗。由藥物滲透曲線計算可知,不同促滲劑作用下6-姜酚的經(jīng)皮滲透速率分別為4%氮酮(37.2μg×cm-2×h-1)>2%丙二醇+2%氮酮(34.26μg×cm-2×h-1)>4%薄荷腦(28.76μg×cm-2×h-1)>4%冰片(25.15μg×cm-2×h-1)>對照(21.32μg×cm-2×h-1)。結(jié)果表明:各類促滲劑對6-姜酚的經(jīng)皮滲透有不同程度的促進作用,其中氮酮的促滲作用最為顯著。3.3不同促滲劑作用下6-姜酚經(jīng)皮滲透速率的比較根據(jù)上述實驗結(jié)果,選擇氮酮為生姜凝膠貼劑的促滲劑,由于氮酮用量影響藥物的透皮吸收。本實驗以不含促滲劑的貼劑為對照,考察了氮酮的用量對6-姜酚透皮吸收的影響。由藥物滲透曲線計算可知,不同促滲劑作用下6-姜酚的經(jīng)皮滲透速率分別為6%氮酮(36.78μg×cm-2×h-1)>4%氮酮(35.51μg×cm-2×h-1)>2%氮酮(27.92μg×cm-2×h-1)>1%氮酮(24.73μg×cm-2×h-1)>對照(21.32μg×cm-2×h-1)。結(jié)果表明:隨著凝膠貼劑中氮酮含量的增加,6-姜酚的經(jīng)皮滲透速率也隨之增加,但氮酮含量在4%～6%范圍內(nèi)藥物的滲透速率相近,考慮到長期應(yīng)用氮酮的毒副作用,故將生姜凝膠貼劑中促滲劑氮酮的用量定為4%。3.4皮膚多次釋放試驗按優(yōu)化復(fù)合透皮吸收促進劑制備3批貼劑(批號為:20080729、20080801、20080807)進行驗證試驗和重復(fù)性考察,所用皮膚均取自同一只大鼠背部。批間藥物體外釋放度和透皮擴散相應(yīng)時間點數(shù)據(jù)依次進行方差齊性檢驗,批間各指標兩次比較用Dunnett檢驗。結(jié)果表明,3批透皮貼劑均具較佳的外觀和物理特性,批間藥物經(jīng)皮滲透性差異均無顯著性(P>0.05)。4新型中藥含銅的凝膠貼劑生姜凝膠貼劑有抗運動病的作用,相對其它抗運動病的作用藥物相比,不會引起口干、昏睡、血壓降低等副作用,且生姜凝膠貼劑抗運動病藥效發(fā)揮更加持久是一種新型運動病預(yù)防藥物,值得在臨床上試驗推廣。一個好的貼布需要滿足兩種自相矛盾的需求:對藥用部位具有良好的生物黏附性,而在除去時在應(yīng)用部位沒有藥物殘留。目前在以傳統(tǒng)膏藥和橡皮膏為主的中藥外用劑型使用中存在各種問題,如:膏藥基質(zhì)中含鉛量過高,長期使用有造成鉛中毒的危險;橡皮膏基質(zhì)吸水性和水氣透過性差,長期使用會造成皮膚泛白、過敏及因黏結(jié)強度過大易造成剝離疼痛;反復(fù)揭貼性差及載藥量偏低等缺點。本實驗制備的凝膠貼劑采用具有良好生物相容性的卡波姆U10為主要組分,配以增稠劑(聚丙烯酸鈉)、交聯(lián)劑(三氯化鋁)等,具有優(yōu)良的黏結(jié)性能,作為貼劑基質(zhì)材料還可以避免污染、剝離殘留等現(xiàn)象,該凝膠貼劑作為新型外用制劑具有良