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大腸桿菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)原理轉(zhuǎn)化（Transgormation）是將外源DNA分子引入受體細(xì)胞，使受體細(xì)胞獲得新的遺傳性狀的過(guò)程。感受態(tài)細(xì)胞在0℃，CaClz的低滲溶液中，菌細(xì)胞膨脹成球形，而轉(zhuǎn)化混合物中的DNA形成抗DNase（DNA酶）的羥基-鈣磷酸復(fù)合物，并黏附于細(xì)胞表面，經(jīng)42℃短時(shí)間熱沖擊處理，可促使細(xì)胞迅速收縮，吸收DNA復(fù)合物，完成轉(zhuǎn)化。實(shí)驗(yàn)流程1、在無(wú)菌工作臺(tái)內(nèi)，向各管含質(zhì)粒的感受態(tài)中，加入500微升新鮮的LB培養(yǎng)液（無(wú)抗性）；

2、放置于搖床中，在37℃的條件下，培養(yǎng)一個(gè)小時(shí)；

3、在等待培養(yǎng)的時(shí)候，我們可以對(duì)涂布器進(jìn)行滅菌處理；

4、一小時(shí)后，培養(yǎng)完成，取出感受態(tài)，對(duì)其進(jìn)行一個(gè)短暫的離心；（從搖床中取出感受態(tài)）（對(duì)感受態(tài)進(jìn)行離心）

5、將前面準(zhǔn)備好的培養(yǎng)皿進(jìn)行標(biāo)記，用移液器吸取100μl菌液，相應(yīng)抗性（kana30-50μg/ml，amp50-100μg/ml）的固體培養(yǎng)基上，用涂布器旋轉(zhuǎn)涂抹均勻，在超凈工作臺(tái)中進(jìn)行風(fēng)干；

（給培養(yǎng)皿做好標(biāo)記）

（吸取100μl菌液）

（借助涂布器涂抹均勻）

6、用酒精棉對(duì)涂抹器進(jìn)行擦拭，再次進(jìn)行高溫滅菌；

7、密封培養(yǎng)皿后，將培養(yǎng)皿倒置，在37℃的恒溫孵育箱中，進(jìn)行培養(yǎng)12-16小時(shí)；8、次日，對(duì)菌落的生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀察。

注意事項(xiàng)1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)穿著專用工作服和使用一次性手套；2、用酒精棉對(duì)涂布器進(jìn)行擦拭時(shí)，要注意，涂布器上的酒精熄滅后要稍等

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