反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜免疫關(guān)鍵基因篩選及免疫浸潤(rùn)分析

反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜免疫關(guān)鍵基因篩選及免疫浸潤(rùn)分析反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜免疫關(guān)鍵基因篩選及免疫浸潤(rùn)分析

概述：

輔助生殖技術(shù)，如體外受精-胚胎移植已成為不孕不育患者實(shí)現(xiàn)生育的一種重要選擇。然而，部分患者經(jīng)歷了多次胚胎移植循環(huán)后仍未能成功妊娠，這可能與子宮內(nèi)膜免疫異常相關(guān)。本文旨在通過(guò)篩選反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中的免疫關(guān)鍵基因，并對(duì)免疫細(xì)胞浸潤(rùn)情況進(jìn)行分析，以期探索其對(duì)妊娠成功的影響。

方法：

患者選擇：納入近年來(lái)經(jīng)歷多次胚胎移植循環(huán)但未能成功妊娠的患者，共計(jì)50例。

組織采集：在子宮內(nèi)膜脫落期，經(jīng)經(jīng)驗(yàn)醫(yī)生操作，取得子宮內(nèi)膜組織，分別對(duì)病變部位和正常部位進(jìn)行采集。

總RNA提取與定量：使用RNA提取試劑盒將組織樣本中的總RNA提取出來(lái)，并通過(guò)納米比色計(jì)測(cè)定RNA的濃度。

逆轉(zhuǎn)錄與實(shí)時(shí)熒光定量PCR：使用逆轉(zhuǎn)錄試劑將總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后，通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR儀檢測(cè)免疫關(guān)鍵基因表達(dá)水平。

組織免疫組化：免疫組織化學(xué)染色法使用抗體標(biāo)記免疫細(xì)胞，觀(guān)察其在子宮內(nèi)膜中的分布與數(shù)量。

統(tǒng)計(jì)分析：通過(guò)SPSS軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用t檢驗(yàn)或方差分析進(jìn)行差異比較，以p<0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的顯著性水平。

結(jié)果：

1.免疫關(guān)鍵基因篩選：根據(jù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果，篩選出一批顯著差異表達(dá)的免疫關(guān)鍵基因，如調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化的CTLA-4和FOXP3基因、細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞標(biāo)記物GranzymeB基因等。

2.免疫細(xì)胞浸潤(rùn)分析：免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，在反復(fù)種植失敗患者的子宮內(nèi)膜中，T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞、單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)量較正常部位增加。

討論：

通過(guò)篩選反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中的免疫關(guān)鍵基因和免疫細(xì)胞浸潤(rùn)情況，我們發(fā)現(xiàn)在失敗的胚胎移植過(guò)程中，子宮內(nèi)膜的免疫功能可能發(fā)生異常。特別是調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化的CTLA-4和FOXP3基因在反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中表達(dá)下調(diào)，而細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞標(biāo)記物GranzymeB基因表達(dá)上調(diào)，提示免疫失調(diào)與胚胎著床障礙相關(guān)。此外，免疫細(xì)胞浸潤(rùn)分析結(jié)果也進(jìn)一步確認(rèn)了免疫異常的存在。

結(jié)論：

本研究篩選出反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中的免疫關(guān)鍵基因，并分析了免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)情況，結(jié)果表明免疫異?？赡苁菍?dǎo)致胚胎移植失敗的一個(gè)重要原因。這為個(gè)性化治療和改善患者子宮內(nèi)膜免疫環(huán)境提供了理論依據(jù)，進(jìn)一步揭示了胚胎著床障礙的機(jī)制，為不孕不育患者的生育問(wèn)題提供了新思路。然而，由于樣本數(shù)量有限，研究結(jié)論還需進(jìn)一步驗(yàn)證和探索。未來(lái)的研究中應(yīng)加大樣本量，并研究子宮內(nèi)膜免疫調(diào)節(jié)的機(jī)制，以提高胚胎移植成功率和生育成功率在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)反復(fù)種植失敗患者子宮內(nèi)膜中免疫功能存在異常。特別是調(diào)節(jié)T細(xì)胞活化的CTLA-4和FOXP3基因表達(dá)下調(diào)，而細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞標(biāo)記物GranzymeB基因表達(dá)上調(diào)。此外，在子宮內(nèi)膜中的T淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)量也明顯增加。這些結(jié)果表明免疫失調(diào)可能與胚胎移植失敗有關(guān)。通過(guò)進(jìn)一步研究子宮內(nèi)膜免疫調(diào)節(jié)的機(jī)制，我們可以為個(gè)性化治療和改善患者子宮內(nèi)膜免疫環(huán)境提供理論依據(jù)，從而提高胚