獸醫(yī)傳染病學(xué)：附紅細(xì)胞體病

附紅小體病

(Eperythrozoonosis)一、概述附紅細(xì)胞體病(Eperthrozoonsis，EH)是由附紅細(xì)胞體(簡稱附紅體)寄生于紅細(xì)胞表面、血漿、組織液及腦脊液中，引起貧血、黃疽、發(fā)熱等癥狀的一種人、畜、禽共患的疾病。特征:貧血、黃疸和發(fā)熱;對豬而言:引起豬生產(chǎn)性能下降、腸道和呼吸系統(tǒng)感染的增加，母豬繁殖力下降，育肥豬上市推遲等。歷史

本病最

發(fā)現(xiàn)于1928年，Schillig和Dingen等幾乎同時于1928年分別在嚙齒類動物中查到類球狀血蟲體

(E.coccoides)。我國于1981年首先在家兔中發(fā)現(xiàn)附紅體，隨后該病相繼在16種動物上出現(xiàn)，1986年在人群

中也證實了附紅體感染的存在。–國內(nèi)報道：豬、牛、犬、馬、人、兔、羊、驢、狐、雞國外報道：豬、牛、犬、馬、人、兔、羊、驢、騾、駱駝、貓、鳥類、鼠History&distribution1932年Dolye在印度首次報道了本病，稱“豬的一種類立克次氏體病或類微粒子孢子蟲病”1950年Splitter確認(rèn)為附紅細(xì)胞體病。我國1972年江南南部報道的“豬紅皮病”后被證實為豬附紅細(xì)胞體病。

中國羅杏芳等于1981-1983年先后在廣東省的廣州、順德等5個縣市病豬的血液中發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體；欒景輝等于1982年在河北省壽縣高熱病豬中發(fā)現(xiàn)豬的附紅細(xì)胞體。

近幾年世界各地從仔豬到懷孕母豬均有豬附紅細(xì)胞體病發(fā)生的大量報道。2000年前后感染調(diào)查199119931994199519971998199920002001上海湖北甘肅福建福建內(nèi)蒙福建福建湖北廣西內(nèi)蒙江蘇內(nèi)蒙山東福建江蘇山東江蘇河南江蘇山東河南河南新疆河南河南湖南新疆天津河北山西二、Pathogen附紅細(xì)胞體屬于典型的原核生物，無細(xì)胞壁，由單層界膜包裹著，無明顯的細(xì)胞器和細(xì)胞核。起初由于附紅細(xì)胞體病曾以“類邊蟲病”描述過，所以將其歸類為原蟲。1984年按照《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊》將其列為立克次氏體目(Rickettsiales)無漿體科(Anaplasmataceae)附紅細(xì)胞體屬(Eperythrozoon)。近年來，根據(jù)對附紅細(xì)胞體使用

16SrRNA基因序列分析法進(jìn)行重新分類，提議將其列入柔膜體綱支原體屬。二、Pathogen1、分類地位:Eperythrozoon

suis,以往認(rèn)為是一種原蟲，所引起的疾病稱之為“類邊蟲病”。后列入立克次體目（Rickettsiales）,Eperythrozoon,種：suis

&ovis；對16S

rRNA分析認(rèn)為，豬附紅細(xì)胞體無細(xì)胞壁，無鞭毛，對青霉素類不敏感，而對強(qiáng)力霉素敏感，宜列入柔膜體綱支原體屬（Mycoplasma

,Neimark.et

al,2001）,稱為Mycoplasmahaemosuis

.

It

has

the

specificity

of

species,and

only

infects

pigfor

E.s

.種名在不同動物中寄生的附紅體各有其名，實際上可認(rèn)為是種名，如牛的溫氏支原體(M.wenyoni)，綿陽的綿羊支原體(M.ovis)，豬的豬支原體(M.suis)和小支原體

(M.parvam)，鼠的球狀支原體(M.cocides)，貓的貓支原體(M.felis)，犬的犬支原體(M.perekropvi)，兔的兔支原體(M.lepus)，山羊的山羊支原體(M.hivci)，雞的雞支原體(M.gallinee)和人支原體(M.humanus)等。其

中，豬附紅細(xì)胞體和綿羊附紅細(xì)胞體的致病性較強(qiáng)，溫氏附紅細(xì)胞體的致病性較弱，小附紅細(xì)胞體基本上沒有致病性。2、形態(tài)

形態(tài)呈多樣形，一般多為球形、圓形和卵圓形，少數(shù)為短桿狀、半月狀或逗點形等。0.2~2μm，單獨或成鏈狀附著于紅細(xì)胞表面，或圍繞在整個紅細(xì)胞上，使紅細(xì)胞呈菠蘿形、鋸齒形、菜花狀、星狀、花環(huán)狀。旋動顯微鏡微調(diào)，可見附紅體折光性很強(qiáng)。在血漿中也可見自由的附紅細(xì)胞體。

小附紅細(xì)胞體實際是豬附紅細(xì)胞體的未成熟階段或前體3.染色

附紅細(xì)胞體是一種多形態(tài)微生物，多數(shù)為環(huán)形、球形和卵圓形，少數(shù)呈頓號形和桿狀，大小為0.3-1.3×0.5-2.6μm，平均直徑0.2～2.0μm，在紅細(xì)胞表面單個或成團(tuán)寄生，呈鏈狀或鱗片狀，也有在血漿中呈游離狀

態(tài)。附紅細(xì)胞體對苯胺色素易于著染，革蘭氏染色為陰性，姬姆薩染色

為紫紅色，瑞氏染色為淡藍(lán)色，吖啶橙染色為典型的黃綠色熒光，對碘

不著色。?由于附紅細(xì)胞體在宿主紅細(xì)胞上以直接分裂或出芽的方式進(jìn)行增殖，因此迄今還沒有發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)附紅細(xì)胞體的最佳方式。在56℃條件下水浴，可從紅細(xì)胞上解離下來，是獲取和研究附紅細(xì)胞體的最佳方式。5.抵抗力非常弱，對干燥和化學(xué)藥品敏感

紅細(xì)胞干燥后

3

min，附著的附紅細(xì)胞體可失去活性。一般常用消毒藥均可殺死病原，如在

0.5%的石炭酸

37℃經(jīng)3

h可殺死，在含氯消毒劑中作用

1

min即可全部滅活，對某些化學(xué)藥物如碘制劑、磷酸伯胺喹啉等作用

1min內(nèi)即可殺滅。對低溫的抵抗力強(qiáng)。

在4℃條件下，在檸檬酸鈉、EDTA等抗凝的無菌血液中可保存

15～30

d；

在-30℃冷凍條件下，附紅細(xì)胞體可保存

120

d，存活率在

80%以上；

感染的細(xì)胞中加入終濃度為6.7%聚乙烯吡珞烷酮，可保存于液氮中。凍干可存活2年。

在-70℃條件下，附紅細(xì)胞體在加甘油的血液中可保存數(shù)年之久。三、Epidemiology：

附紅細(xì)胞體寄生的宿主有人、嚙齒動物（包括鼠、兔）、草食動物（包括牛、綿羊、山羊、馬、驢、騾、駱駝、牦牛）、肉食動物（包括犬、貓、銀狐、貂）、野生動物（包括南美洲駝羊、北極馴鹿）及雜食動物豬、禽等。

不分種類、品種、年齡、性別都可以感染，但是幼齡動物較易感。三、Epidemiology：附紅細(xì)胞體有相對宿主特異性，感染牛的附紅體不能感染山羊、鹿和去脾的綿羊；綿羊附紅體只要感染一個紅細(xì)胞就能使綿羊得病，而山羊不很敏感。傳播至少有四種方式：1、血源性、2.接觸性、3.垂直性4.媒介昆蟲等；以吸血昆蟲中的蚊、蟄蠅、虱、蠓等為主要傳播媒介。

本病的發(fā)生與mosquitoes出沒相一致；用蚊進(jìn)行自然接種，可以復(fù)制出病例。通過胎盤的垂直傳播率可達(dá)100%；被血污染的精液可傳染給母豬；2、流行特點：1）隱性感染率高，可達(dá)95%，且本病易復(fù)發(fā)。2）誘發(fā)因素：自身、營養(yǎng)性、毒素（物）、藥物、環(huán)境應(yīng)激、病原混合感染；分娩、長途運輸、飼養(yǎng)管理不良、并群、密集飼養(yǎng)方式等，均有助于病的發(fā)生。3）夏秋多發(fā)：高溫濕熱、吸血昆蟲滋生叮咬；4）醫(yī)源性（血源）傳播：污染的注射針頭、手術(shù)器械，仔豬剪尾、斷牙、打耳號等，可能促進(jìn)感染發(fā)病。四、Pathogenesis

1、紅細(xì)胞參與免疫調(diào)節(jié)，附紅體呈潛伏狀態(tài)，紅細(xì)胞感染達(dá)一定比例，機(jī)體抵抗力下降，才表現(xiàn)出發(fā)病狀態(tài)。2、急性感染，病原體的大量的繁殖致嚴(yán)重血液凝固障礙，引起出血，機(jī)體的糖代謝大量增加，出現(xiàn)低血糖?；疾游锿捎谘褐腥樗岷捅岷可仙鴮?dǎo)致酸中毒，被感染的紅細(xì)胞攜帶氧氣的能力降低，影響肺臟的氣體交換，常導(dǎo)致機(jī)體的呼吸困難。3.紅細(xì)胞膜發(fā)生改變，被遮蔽的抗原暴露，免疫系統(tǒng)視為異物，致自身免疫溶血性貧血；感染導(dǎo)致紅細(xì)胞體表面結(jié)構(gòu)的改變，變形、脾臟清除并引起溶血。紅細(xì)胞大量破壞，導(dǎo)致免疫抑制。（自身抗體為M型冷凝集素，溫度高時會從紅細(xì)胞表面脫離

）五、Clinical

signs1、急性：首先出現(xiàn)pneumonia，表現(xiàn)highfever、皮膚、黏膜蒼白，四肢特別是耳廓邊緣cyanopathy、壞死，有時可見有jaundice、diarrhea；以斷奶仔豬特別是閹割后幾周多見。育肥豬日增重下降，易發(fā)生急性haemolyticanaemia。后期常繼發(fā)腸炎而下痢。2、慢性：病豬表現(xiàn)貧血、消瘦，常常成為僵豬。豬附紅體可長期存在于豬體內(nèi)，病愈豬可終生帶菌。3、母豬（1））急性感染：食欲不振，持續(xù)高熱、呼吸急促、貧血、皮膚蒼白，少乳或無乳，以產(chǎn)后多見；（2）慢性感染：母豬還可出現(xiàn)繁殖障礙，如受孕率降低、發(fā)情推遲、流產(chǎn)、死產(chǎn)、弱仔等，但少有或無木乃伊。牛潛伏期9～40d，病牛精神沉郁，食欲不振，消瘦，喜臥；

眼結(jié)膜、口腔黏膜蒼白，嚴(yán)重貧血。鼻鏡干燥；咳嗽、體溫升高至40~41.5℃，呼吸加快；瘤胃蠕動音減弱、反芻下降或停止，消化不良，前胃遲緩；不愿走動、腹瀉。便秘與腹瀉交替，后期有的病牛排出血便。少數(shù)牛出現(xiàn)血尿。奶牛產(chǎn)奶量下降或停止，懷孕牛流產(chǎn)。兔

病兔精神萎頓，被毛粗亂無光，眼結(jié)膜蒼白。有時黃染，耳靜脈管欠充盈。病兔耳朵發(fā)涼，啃咬籠框。吃食緩慢，糞球變小，尿色深黃。病兔生長緩慢，瘦弱，發(fā)育不良。成年兔很少發(fā)病，主要表現(xiàn)為繁殖障礙，發(fā)情率、受孕率、受胎率下降，流產(chǎn)率升高，消瘦、貧血。病理變化主要以體腔積液，貧血黃疸，實質(zhì)器官腫大為特征色淡、血凝不良，皮下組織及肌間水腫，黃疸；全身肌肉顏色蒼白，多數(shù)胸腔、腹腔積液，呈淡黃色，胸膜脂肪、心冠脂肪輕度黃染。部分病豬心包積水，心外膜有出血，心肌松弛呈熟肉樣，質(zhì)地脆弱，肺臟水腫或萎縮，肝臟不同程度腫大、出血、黃染，表面有輕微黃色條紋或灰白色病灶；膽囊膨脹，膽汁濃稠；脾臟腫大，呈暗黑色，質(zhì)地柔軟，切面結(jié)構(gòu)模糊，邊緣增厚；腎輕微腫大，部分豬腎臟有一半或部分血色素沉著，呈暗黑色；個別豬有微細(xì)出血或黃色斑。腸段有不同程度的炎性變化。六、病理變化

貧血和黃疸：發(fā)熱病豬血液呈水樣，色淡、血凝不良，稀薄，不黏附試管壁；全身脂肪和臟器顯著黃染。皮下組織及肌間水腫、心包、胸腔、腹腔積液，呈淡黃色。肺水腫，全身淋巴結(jié)腫大，肝脾和膽囊腫大，膽汁充盈。

將試管中含抗凝劑的血液冷卻至室溫倒出，可見管壁上有粒狀微凝血，將血液冷卻，這種現(xiàn)象更明顯，當(dāng)血液加熱到37℃時這種現(xiàn)象幾乎消失。對附紅體病，具有特異性。病死牛尸體消瘦，可視黏膜蒼白；血液較稀薄，不易凝固；胸腹腔及心包囊內(nèi)積有液體；肩前、腋下、腸系膜淋巴結(jié)充血、腫大；肝臟腫大，呈棕黃色；膽囊腫大，膽汁濃稠；腎臟水腫，有少量出血點；瘤胃黏膜有多處出血點。病兔

全身皮膚黃染，血液稀薄，凝固不良；心肌變薄，顏色變淡；胸腔有淡紅色滲出液，肺表面有小出血點。尤以尖葉為重，肺臟表面呈深褐色；膽囊大，膽內(nèi)充滿膽汁；胃內(nèi)容物無異常變化，胃粘膜脫落；脾臟腫大、質(zhì)地變軟，被膜上常有大小不等的暗紅色或鮮紅色出血點；腎臟腫大變性，表面有出血斑點；切面可見有皮質(zhì)部和髓質(zhì)部分界模糊，腎盂積水；膀胱黏膜黃染并有出血點。七、Diagnosis1、查找病原在急性發(fā)熱期間作顯微鏡檢查效果最好。

（1）鮮血壓片鏡檢采耳靜脈末梢血，將血樣在水浴鍋內(nèi)加熱至38℃，或血液1滴與1滴生理鹽水混合，制成血液抹片（再壓蓋玻片/經(jīng)姬姆薩染色），油鏡下觀察，若在紅細(xì)胞表面見到卵圓形或圓形的、或完全將紅細(xì)胞包圍的鏈狀附紅細(xì)胞體。判定：在1000×顯微鏡下觀察20個視野，發(fā)現(xiàn)附紅體者為陽性。

血漿中有無多量卵圓形、逗點狀、短桿狀及月牙形，折光性強(qiáng)的蟲體，蟲體不停地翻轉(zhuǎn)、搖擺或做不規(guī)則運動；附著于紅細(xì)胞表面的附紅體呈單個或成團(tuán)寄生，呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則變形。（2）血涂片鏡檢：對附紅細(xì)胞體的染色方法主要有瑞氏染色(Wright

Stain)法、姬姆薩染色(Giemsa

Stain)法及吖啶橙(Acridine

Orange)染色法。后者需要熒光顯微鏡及暗室環(huán)境才可觀察，這三種方法

的特異性和敏感性都不是很高。誤診很嚴(yán)重，一些所謂確實就是的病例，查不出附紅細(xì)胞體。多種病、健動物血檢壓片均為陽性。發(fā)現(xiàn)有，也不一定就發(fā)生疾病。七、Diagnosis采集血樣時，宜用檸檬酸鹽作抗凝劑，不宜用EDTA或肝素（分別對感染性或PCR有干擾）

豬紅細(xì)胞壓積從39.6%降到24%，Hb從10~15g/100ml降到3~7g/100ml；?2、動物試驗

用可疑動物血液接種健康試驗動物（小鼠、兔、雞等）或雞胚，接種后觀察其表現(xiàn)并采血查附紅體。此法費時較長，但有一定輔助診斷意義。

切除疑為感染的豬脾臟或?qū)⒁蔀楦腥矩i的血液輸給切除脾臟的豬。如若人工感染豬呈急性發(fā)病，此時可通過查找血涂片中的蟲體進(jìn)行診斷。3、血清學(xué)檢查（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗：1958年Spliter率先用該方法診斷豬附紅細(xì)胞體病。病豬出現(xiàn)癥狀后的1～7d呈陽性反應(yīng)，但2～3周后即可轉(zhuǎn)為陰性。但該法難以診斷慢性附紅細(xì)胞體攜帶者。

（2）間接血凝試驗：滴度大于1:40定為陽性，并證實該方法有很好的特異性，可檢測隱性感染。用異種動物的紅細(xì)胞并經(jīng)醛化、鞣酸化后致敏，進(jìn)行IHA試驗，效果較好。該法簡便、快速、準(zhǔn)確敏感，能檢出陽性耐過豬和隱性帶附紅細(xì)胞體的豬（張守發(fā)等，2004）。（3）熒光抗體試驗：熒光抗體試驗最早用于診斷牛附紅細(xì)胞體病，抗體在第4d出現(xiàn)，隨感染率上升，28d達(dá)到高峰。該法也可用于豬、羊附紅細(xì)胞體病診斷，效果較好。?（4）酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)：1986年Lang等用去掉紅細(xì)胞的綿羊附紅細(xì)胞體抗原對羊進(jìn)行ELISA，認(rèn)為此法比間接血凝試驗的敏感性高8倍。有人用此法檢查豬，認(rèn)為比補(bǔ)體結(jié)合試驗敏感，

而且豬附紅體抗原與豬其他疾病感染的血清無交叉反

應(yīng)，但不適應(yīng)小豬和公豬的診斷，也不適于急性診斷。5、分子診斷：Oberst等取豬附紅細(xì)胞體感染高峰期的血液分離附紅體，提取DNA，以32P標(biāo)記制成探針，可以區(qū)分豬附紅體感染的豬和非感染豬，并且不與豬感染其他疾病血清中的DNA發(fā)生雜交反應(yīng)。1993年Gwaltney等報道了檢測豬附紅細(xì)胞體的PCR方法，感染

24h就可以出現(xiàn)PCR陽性，特異性強(qiáng)、敏感性高、檢測速度快、結(jié)果可靠。在此基礎(chǔ)上還建立有半巢式PCR方法與巢式PCR等方法

診斷方法，進(jìn)一步提高了敏感性。Hoelzle等利用保守的msg1基因建立了熒光定量PCR檢測方法，敏感性較常規(guī)PCR方法顯著提高，熒光定量PCR不僅快速、準(zhǔn)確、

特異性高，還有可實時監(jiān)測、線性范圍廣、定量以及自動化程度高的優(yōu)點。?八、治療原則上要早期用藥，同時要進(jìn)行輔助性對癥治療和做好消毒工作。常用的藥物有四環(huán)素、土霉素、卡那霉素、慶大霉素。金霉素、強(qiáng)力霉素、卡那霉素、慶大霉素等抗生素類藥物和血蟲凈、貝尼兒、黃色素、阿散酸（arsanilicacid），納加諾爾(Napanol）等抗血液原蟲類藥物及中藥治療動物附紅細(xì)胞體病，療效較好。馬增軍等進(jìn)行的藥敏試驗表明血蟲凈和鹽酸土霉素混合液對體外附紅體最為敏感，用此兩種藥物組合用于治療豬附紅細(xì)胞體病的效果明顯。姜代勛等運用白頭翁四君子湯治療羊附紅細(xì)胞體病，療效顯著。實際治療過程中，除了使用上述藥物外，還應(yīng)配合強(qiáng)心、補(bǔ)液、健胃、導(dǎo)瀉等對癥輔助性綜合治療。舉例：1、可用滅菌注射用水或生理鹽水或5%葡萄糖注射液

將血蟲凈配成3～5%的濃度，按4

mg/kg體重肌肉注射。

血蟲凈外粉，每10mg/Kg體重，肌肉注射，每日1次，連用3天；2、新胂凡納明注射15~45mg/Kg體重,2~24h后附紅體從血流中消失；3、土霉素或四環(huán)素肌肉注射，3mg/kg,注射后6min附紅體從血流中消失；4、黃色素注射液，3