分子生物學(xué)試題庫匯總

染色體與DNA名詞解釋原癌基因：細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的正?；颍蔷S持機(jī)體正常生命活動(dòng)所必須的，在進(jìn)化上高等保守。當(dāng)原癌基因的結(jié)構(gòu)或調(diào)控區(qū)發(fā)生變異，基因產(chǎn)物增多或活性增強(qiáng)時(shí)，使細(xì)胞過度增殖，從而形成腫瘤。復(fù)制：以親代DNA或RNA為模板，根據(jù)堿基配對(duì)的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉(zhuǎn)座子(transposon或transposableelement)：位于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。包括插入序列和復(fù)合轉(zhuǎn)座子。半保留復(fù)制：以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補(bǔ)方式合成子代DNA，這樣新形成的子代DNA中，一條鏈來自親代DNA，而另一條鏈則是新合成的，這種復(fù)制方式叫半保留復(fù)制。染色體：染色體是遺傳信息的載體，由DNA、RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成，其形態(tài)和數(shù)目具有種系的特性。在細(xì)胞間期核中，以染色質(zhì)形式存在。在細(xì)胞分裂時(shí)，染色質(zhì)絲經(jīng)過螺旋化、折疊、包裝成為染色體，為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體：是構(gòu)成真核生物染色體的基本單位，是DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的緊密結(jié)構(gòu)形式，包括200bp左右的DNA和9個(gè)組蛋白分子構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。填空題1.真核細(xì)胞核小體的組成是DNA和蛋白2.天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接，這是因?yàn)樘烊蝗旧w末端存在端粒結(jié)構(gòu)。3.在聚合酶鏈反應(yīng)中，除了需要模板DNA外，還需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和鎂離子。4.引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學(xué)因素。5.DNA復(fù)制時(shí)與DNA解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)有拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白。6.參與DNA切除修復(fù)的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA連接酶、特異的核酸內(nèi)切酶。7.在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶。9.DNA的修復(fù)方式有錯(cuò)配修復(fù)、堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)、DNA的直接修復(fù)。選擇題1.真核生物復(fù)制起點(diǎn)的特征包括（B）A.富含G-C區(qū)B.富含A-T區(qū)C.Z-DNAD.無明顯特征2.插入序列（IS）編碼（A）A.轉(zhuǎn)座酶B.逆轉(zhuǎn)錄酶C.DNA合成酶D.核糖核酸酶3.紫外線照射對(duì)DNA分子的損傷主要是(D)A.堿基替換B.磷酸脂鍵斷裂C。堿基丟失D.形成共價(jià)連接的嘧啶二聚體4.自然界中以DNA為遺傳物質(zhì)的大多數(shù)生物DNA的復(fù)制方式（C）A.環(huán)式B.D環(huán)式C.半保留D.全保留5.原核生物基因組中沒有（A）A.內(nèi)含子B.外顯子C.轉(zhuǎn)錄因子D.插入序列6.關(guān)于組蛋白下列說法正確的是(D)A.為中性蛋白B.為酸性蛋白C.進(jìn)化上不具保守性D.染色體結(jié)合蛋白7.DNA聚合酶Ⅰ（C）A.是復(fù)制酶，但不是修復(fù)酶B.沒有模板依賴性C.有5′→3′外切酶活性D.5′→3′聚合酶活性極強(qiáng)簡(jiǎn)述DNA復(fù)制的過程DNA的復(fù)制過程可被分為3個(gè)階段，即復(fù)制的起始、延伸和終止。每個(gè)DNA復(fù)制的獨(dú)立單元主要包括復(fù)制起始位點(diǎn)和終止位點(diǎn)。DNA復(fù)制的起始包括預(yù)引發(fā)和引發(fā)兩個(gè)階段。在預(yù)引發(fā)階段，DNA解旋解鏈，形成復(fù)制叉，引發(fā)體組裝；在引發(fā)階段，在引發(fā)酶的催化下以DNA鏈為模板合成一段短的RNA引物。復(fù)制時(shí)DNA鏈的延伸由DNA聚合酶催化，以親代DNA鏈為模板，引發(fā)體移動(dòng)，從5′→3′方向聚合子代DNA鏈。當(dāng)子鏈延伸到達(dá)終止位點(diǎn)是，DNA復(fù)制就終止了，切除RNA引物，填補(bǔ)缺口，在DNA連接酶的催化下將相鄰的岡崎片段連接起來形成完整的DNA長(zhǎng)鏈。試述真原核生物的DNA復(fù)制的特點(diǎn)的不同之處①真核生物染色體有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，多復(fù)制眼，呈雙向復(fù)制，多復(fù)制子。原核生物的染色體只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，單復(fù)制子也呈雙向復(fù)制。②真核生物岡崎片段長(zhǎng)約200bp比原核生物略短。真核生物DNA復(fù)制速度比原核慢，速度為1000～3000bp/min(僅為原核生物的1/20～1/50）。③真核生物復(fù)制的終止在端粒處，原核生物的復(fù)制叉相遇時(shí)即終止。④真核生物染色體在全部復(fù)制完之前起點(diǎn)不再重新開始復(fù)制；而在快速生長(zhǎng)的原核生物染色體DNA復(fù)制中，起點(diǎn)可以連續(xù)發(fā)動(dòng)復(fù)制。真核生物快速生長(zhǎng)時(shí)，往往采用更多的復(fù)制起點(diǎn)。⑤真核生物有多種DNA聚合酶，DNA聚合酶δ是真正的復(fù)制酶，在PCNA存在下有持續(xù)的合成能力。PCNA稱為增殖細(xì)胞核抗原，相當(dāng)于大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ的β-夾子，RFC蛋白相當(dāng)于夾子裝配器。原核生物的DNA聚合酶有三種DNA聚合酶ⅢDNA的真正復(fù)制酶：多亞基酶，含十種亞基，該酶DNA合成的持續(xù)能力強(qiáng)。⑥真核生物線性染色體兩端有端粒結(jié)構(gòu)，它是由許多成串的重短復(fù)序列組成，端粒功能是穩(wěn)定染色體末段結(jié)構(gòu)，防止染色體間的末端連接，并可補(bǔ)償滯后鏈5’-末段在消除RNA引物后造成的空缺，使染色體保持一定長(zhǎng)度。端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶。⑦RPA：真核生物的單鏈結(jié)合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物，DNA聚合酶ε填補(bǔ)缺口。簡(jiǎn)述半保留復(fù)制的生物學(xué)意義DNA的復(fù)制過程（以大腸桿菌為例）復(fù)制起始：（1）、拓?fù)洚悩?gòu)酶解開超螺旋。（2）、DnaA蛋白識(shí)別并在ATP存在下結(jié)合于四個(gè)9bp的重復(fù)序列。（3）、在類組蛋白（HU、ATP參與下,DanA蛋白變性13個(gè)bp的重復(fù)序列,形成開鏈復(fù)合物。（4）、DnaB借助于水解ATP產(chǎn)生的能量在DnaC的幫助下沿5’→3’方向移動(dòng)，解開DNA雙鏈，形成前引發(fā)復(fù)合物。（5）、單鏈結(jié)合蛋白結(jié)合于單鏈。（6）、引物合成酶（DnaG蛋白）開始合成RNA引物。鏈的延長(zhǎng)（岡崎片段的合成）：在DNA聚合酶Ш的催化下，以四種5’-脫氧核苷三磷酸為底物，在RNA引物的3’端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。DNA鏈的延伸同時(shí)進(jìn)行前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成。兩條鏈方向相反。6、PCR的基本原理？PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機(jī)理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì)，人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度，以促使雙鏈DNA變成單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的。需要重復(fù)進(jìn)行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結(jié)合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸３個(gè)步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個(gè)循環(huán)，此循環(huán)的反復(fù)進(jìn)行，就可使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。DNA模板變性：模板雙鏈DNA?單鏈DNA，94℃。退火：引物＋單鏈DNA?雜交鏈，引物的Tm值。引物的延伸：溫度至70℃左右，TaqDNA聚合酶以４種dNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物３’末端為起點(diǎn)的5’→3’DNA鏈延伸反應(yīng)，形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR，就是如此反復(fù)循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴(kuò)增。第三章啟動(dòng)子：是一段位于結(jié)構(gòu)基因5，端上游區(qū)的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。指RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段特定的DNA序列。增強(qiáng)子：能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序列稱為增強(qiáng)子。轉(zhuǎn)錄：以DNA為模板，按照堿基配對(duì)原則合成RNA，即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA，形成一條與DNA鏈互補(bǔ)的RNA的過程。RNA的編輯：是某些RNA，特別是mRNA的一種加工方式，它導(dǎo)致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子(Exon)：真核細(xì)胞基因DNA中的編碼序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA并進(jìn)而翻譯為蛋白質(zhì)。內(nèi)含子(Intron)：真核細(xì)胞基因DNA中的間插序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA，但隨即被剪除而不翻譯。復(fù)制子：生物體的復(fù)制單位稱為復(fù)制子（replicon)，是在同一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)控制下的一段DNA序列。轉(zhuǎn)錄單元：是一段啟動(dòng)子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)：是與新生RNA鏈的第一個(gè)核苷酸相對(duì)應(yīng)的DNA鏈上的堿基，通常為一個(gè)嘌呤。轉(zhuǎn)錄開始時(shí)模板上的第一個(gè)堿基，在原核中常為A或G，而且位置固定。填空1轉(zhuǎn)錄的基本過程包括：模板識(shí)別，轉(zhuǎn)錄起始，轉(zhuǎn)錄的延伸，轉(zhuǎn)錄的終止。2基因表達(dá)包括：轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)階段。3RNA的編輯方式：堿基突變，尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中，-35區(qū)與-10區(qū)之間的距離大約是16~19bp5帽子結(jié)構(gòu)的功能：〔1〕在翻譯中起識(shí)別作用〔2〕使mRNA免遭核苷酸的破壞6原核生物只有一種RNA聚合酶而真核生物有三種，每一種都有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成rRNA,聚合酶Ⅱ合成mRNA，聚合酶Ⅲ合成tRNA和5srRNA。三種聚合酶都是具有多亞基的大的蛋白復(fù)合體。7轉(zhuǎn)錄因子通常具有兩個(gè)獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域：一個(gè)結(jié)合DNA，一個(gè)激活轉(zhuǎn)錄。8在真核細(xì)胞mRNA的修飾中，“帽子”結(jié)構(gòu)由甲基組成，“尾”由多聚腺嘌呤組成。9原核生物的絕大部分起啟動(dòng)子都存在共同的序列，即位于-10bp處的區(qū)和-35bp處的區(qū)，他們都是RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合的位點(diǎn)，能與σ因子相互識(shí)別而具高度親和性。真核生物中，在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游-25—-35bp處有區(qū)和位于-70--80bp處的區(qū)。選擇題1δ因子的結(jié)合依靠（A）A對(duì)啟動(dòng)子共有序列的長(zhǎng)度和間隔的識(shí)別B與核心酶的相互作用C翻譯起始密碼子的距離D轉(zhuǎn)錄單位的長(zhǎng)度2下列哪一項(xiàng)是對(duì)三元轉(zhuǎn)錄復(fù)合物的正確描述（C）Aδ因子、核心酶和雙鏈DNA在啟動(dòng)子形成的復(fù)合物B全酶、TFI和解鏈DNA雙鏈形成的復(fù)合物C全酶、模板DNA和新生RNA形成的復(fù)合物D三個(gè)全酶在轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)形成的復(fù)合物3δ因子和DNA之間相互的最佳描述是(C)A游離和與DNA結(jié)合的δ因子的數(shù)量是一樣的，而且δ因子合成的越多，轉(zhuǎn)錄起始的機(jī)會(huì)越大Bδ因子通常與DNA結(jié)合，且沿著DNA搜尋，直到在啟動(dòng)子碰到核心酶，他與DNA的結(jié)合不需要依靠核心酶Cδ因子通常與DNA結(jié)合，且沿著DNA搜尋，直到碰到啟動(dòng)子，再有核心酶存在時(shí)與之結(jié)合Dδ因子加入三元復(fù)合物而啟動(dòng)RNA合成4δ因子專一性表現(xiàn)在（B）Aδ因子修飾酶催化δ因子變構(gòu)，使其成為可識(shí)別應(yīng)激啟動(dòng)子的δ因子B不同基因編碼識(shí)別不同啟動(dòng)子的δ因子C不同細(xì)菌產(chǎn)生可互換的δ因子Dδ因子參與起始依靠特定的核心酶5在大腸桿菌的熱激反應(yīng)中，某些蛋白質(zhì)表達(dá)的開啟和關(guān)閉的機(jī)制是（C）A溫度升高使特定阻抑蛋白失活B編碼熱敏感蛋白的基因的啟動(dòng)子區(qū)域在較高溫度下發(fā)生變形C在高溫時(shí)合成新的δ因子，調(diào)節(jié)熱激基因的表達(dá)D高溫時(shí)，已存在的聚合酶δ因子與啟動(dòng)子的結(jié)合能力強(qiáng)6真核生物中rRNA包括（D）A28s,23s,5srRNAB23s,16s,5srRNAC23s,16s,5.8srRNAD28s,23s,5.8s,5srRNA7內(nèi)含子的剪切位點(diǎn)具有的特征（A）A5，—GU，3，—AGB5，—AG，3，—GUC5，—GA，3，—UGD5，—UG，3，—GA8部分原核基因的轉(zhuǎn)錄終止子在終止位點(diǎn)前均有（A）A回文序列B多聚T序列CTATA序列D多聚A序列9mRNA5，端帽子結(jié)構(gòu)為（C）ApppmGBGpppGCm7GpppGDGpppmG簡(jiǎn)答題1增強(qiáng)子的特點(diǎn)〔1〕有遠(yuǎn)距離效應(yīng)〔2〕無方向性〔3〕順勢(shì)調(diào)節(jié)〔4〕無物種和基因的特異性〔5〕具有組織的特異性〔6〕有相位性，其作用與DNA的構(gòu)象有關(guān)〔7〕有的增強(qiáng)子可以對(duì)外部信號(hào)產(chǎn)生反應(yīng)。2比較DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的異同點(diǎn)相同點(diǎn)：都以DNA鏈作為模板，合成方向均為5，端到3，端，聚合反應(yīng)均遵循堿基配對(duì)原則，通過核苷酸之間形成的3，，5，—磷酸二酯鍵使核苷酸鍵延長(zhǎng)。不同點(diǎn)：復(fù)制轉(zhuǎn)錄模板兩條鏈均被復(fù)制模板鏈轉(zhuǎn)錄（不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄）原料DntpNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶產(chǎn)物子代雙鏈DNA（半保留復(fù)制）mRNAtRNArRNA配對(duì)方式A-TG-CA-UA-TG-C引物RNA引物不需要引物DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的異同相同點(diǎn)：都需要模板都以三磷酸核苷酸為底物（NTP或dNTP）合成方向都是5→’3’不同點(diǎn)轉(zhuǎn)錄不需引物；只轉(zhuǎn)錄DNA分子中的一個(gè)片段（稱為轉(zhuǎn)錄單位或操縱子,operon)；雙鏈DNA中只有一條鏈具有轉(zhuǎn)錄活性（稱為模板鏈）；哪個(gè)基因被轉(zhuǎn)錄與特定的時(shí)間、空間、生理狀態(tài)有關(guān)。RNA聚合酶無校對(duì)功能。原核生物與真核生物mRNA的比較（1）、原核生物mRNA的半衰期短；（2）、許多原核生物mRNA以多順反子形式存在；（3）、原核生物5’端無帽子結(jié)構(gòu)，3’或只有短的poly(A)。（4）、真核生物mRNA5’端有帽子結(jié)構(gòu)，（5）、絕大多數(shù)真核生物mRNA3’具有poly(A)尾巴，是轉(zhuǎn)錄后加上的，是mRNA從核到質(zhì)轉(zhuǎn)移所必需的形式，提高mRNA的穩(wěn)定性。大腸桿菌的轉(zhuǎn)錄過程：（1）、識(shí)別階段：RNA聚合酶在σ亞基的引導(dǎo)下結(jié)合于啟動(dòng)子上；（2）、DNA雙鏈局部解開；（3）、起始階段：在模板鏈上通過堿基配對(duì)合成最初RNA鏈；（4）、延伸階段：核心酶向前移動(dòng)，RNA鏈不斷生長(zhǎng)；（5）、終止階段：RNA聚合酶到達(dá)終止子；（6）、RNA和RNA聚合酶從DNA上脫落。論述題1真核生物轉(zhuǎn)錄的前體hnRNA如何加工為成熟的mRNA？真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)組成：5，端存在帽子結(jié)構(gòu)，3，端通常具有poly(A)尾巴，無內(nèi)含子，部分堿基發(fā)生甲基化。①5，端加帽：當(dāng)RNA聚合酶Ⅱ聚合的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物達(dá)到25堿基長(zhǎng)時(shí)，在其5，端加上一個(gè)以5，→3，方向相連的7—甲基鳥苷帽，防止5，核苷酸外切酶的攻擊，有利于剪接、轉(zhuǎn)運(yùn)和翻譯的進(jìn)行；②3，端加尾：很多真核生物的hnRNA的3，端經(jīng)過剪切后再加上多聚A殘基即poly(A)尾巴，這有助于整個(gè)分子的穩(wěn)定；③剪接：在真核生物的mRNA加工過程中，內(nèi)含子序列被切除，兩側(cè)的外顯子片段連接。剪接反應(yīng)在核內(nèi)進(jìn)行，需要內(nèi)含子有5，—GU，AU—3，以及一段分支點(diǎn)序列。其過程是：內(nèi)含子先以一個(gè)具尾的環(huán)狀分子或套索狀分子形式被刪除，然后被降解，剪接包括snRNP與保守序列結(jié)合，形成剪接體，在其內(nèi)發(fā)生剪接與連接反應(yīng)；④編輯；⑤甲基化修飾：當(dāng)序列為5，—RRACX—3，時(shí)會(huì)在第6位N原子位置發(fā)生甲基化。2概括細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過程轉(zhuǎn)錄是通過RNA聚合酶的作用，以一條DNA鏈為模板產(chǎn)生一條單鏈RNA過程。步驟如下：⑴與RNA聚合酶全酶的結(jié)合：一個(gè)RNA聚合酶全酶分子與待轉(zhuǎn)錄的DNA編碼序列上游的啟動(dòng)子序列松弛的結(jié)合。⑵起始：RNA聚合酶往下游移動(dòng)了幾個(gè)核苷酸到達(dá)啟動(dòng)子的另一段短序列—Pribnow框，緊密地與DNA結(jié)合。DNA上的啟動(dòng)子區(qū)域解鏈，RNA便從Pribnow框下游的幾個(gè)核苷酸處開始合成，通常是DNA的反義鏈作為模板，合成幾個(gè)核苷酸后，δ因子被釋放并循環(huán)使用，以下步驟不再需要δ因子。⑶延伸：RNA聚合酶核心酶沿著DNA模板移動(dòng)，使DNA解鏈，與DNA模板的下一堿基互補(bǔ)核苷三磷酸聚合到鏈上。RNA聚合酶繼續(xù)在DNA上移動(dòng)，RNA鏈從模板鏈被釋放出來，DNA雙螺旋重新形成。⑷當(dāng)所有編碼序列被轉(zhuǎn)錄后，RNA聚合酶移動(dòng)一個(gè)終止序列，即終止子。轉(zhuǎn)錄復(fù)合體解體，RNA聚合酶和新形成的RNA從DNA模板上脫落下來。3、復(fù)雜轉(zhuǎn)錄單位的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工方式有幾種？分別是什么？（1）剪、利用多個(gè)5’端轉(zhuǎn)錄起始為點(diǎn)或接位點(diǎn)產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)。（2）、利用多個(gè)加poly（A）位點(diǎn)和不同的剪接方式產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)。（3）、雖無剪接，但有多個(gè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)或加poly（A）位點(diǎn)的基因。第四章.SD序列：在原核生物mRNA起始密碼AUG上游，存在4~9個(gè)富含嘌呤堿的一致性序列，如-AGGAGG-，稱為S-D序列。位于原核生物起始密碼子上游7-12個(gè)核苷酸處的保守區(qū)，該序列與16SrRNA3’端反向互補(bǔ)。又稱為核蛋白體結(jié)合位點(diǎn)（ribosomalbindingsite，RBS)正轉(zhuǎn)錄調(diào)控：負(fù)轉(zhuǎn)錄調(diào)控：填空題1．tRNA的種類有：起始tRNA和延伸tRNA，同工tRNA，校正tRNA。2.tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草型，三級(jí)結(jié)構(gòu)為倒L型。tRNA結(jié)構(gòu)3.原核生物蛋白質(zhì)合成的起始tRNA是甲酰甲硫氨酰—tRNA（fMet-tRNAfMet）,它攜帶的氨基酸是甲酰甲硫氨酸（fMet），而真核生物蛋白質(zhì)合成的起始tRNA是甲硫氨?！猼RNA（Met-tRNAMet），它攜帶的氨基酸是甲硫氨酸（Met）。4．新生肽鏈每增加一個(gè)氨基酸單位都要經(jīng)過AA-tRNA與核糖體的結(jié)合，肽鍵形成，移位三步反應(yīng)。5.核糖體的作用位點(diǎn)有：A位點(diǎn)、P位點(diǎn)、E位點(diǎn)。5．在真核生物中蛋白質(zhì)合成起始時(shí)先形成起始因子和起始tRNA復(fù)合物，再和40S亞基形成40S起始復(fù)合物。6．氨酰tRNA合成酶既能識(shí)別氨基酸，又能識(shí)別相應(yīng)的tRNA。7．多肽合成的起始密碼子是AUG，而UAA，UAG，UGA是終止密碼子。8．遺傳密碼的特點(diǎn)包括連續(xù)性，簡(jiǎn)并性，擺動(dòng)性，普遍性與特殊性。9．核酸復(fù)制時(shí)，DNA聚合酶沿模板鏈3’→5’方向移動(dòng)；轉(zhuǎn)錄時(shí)，RNA聚合酶沿模板鏈3’→5’方向移動(dòng)；翻譯時(shí)，核糖體沿模板鏈5’→3’方向移動(dòng)。10．原核生物蛋白質(zhì)合成形成起始復(fù)合物時(shí)，其mRNA先與核糖體的30S亞基結(jié)合，然后再與結(jié)合起始因子和GTP的甲酰甲硫氨酰—tRNA結(jié)合，形成30S起始復(fù)合物，然后再與50S形成70S起始復(fù)合物。選擇題1．在蛋白質(zhì)合成中催化肽鍵合成的是（D）A．延長(zhǎng)因子EF-TsB.延長(zhǎng)因子EF-TuC.啟動(dòng)因子IF3D.轉(zhuǎn)肽酶2．翻譯后加工過程的產(chǎn)物是（B）A．一條多肽鏈B.一條多肽鏈或一條以上的多肽鏈C．多條多肽鏈D.多肽鏈的降解產(chǎn)物3.已知某蛋白質(zhì)多肽鏈編碼序列為………GGA，則其mRNA轉(zhuǎn)錄本（A）A． 以5’………GGA………3’為模板，沿轉(zhuǎn)錄本5’→3’方向延長(zhǎng)B. 以5’………GGA………3’為模板，沿轉(zhuǎn)錄本3’→5’方向延長(zhǎng)C.以3’………GGA………5’為模板，沿轉(zhuǎn)錄本5’→3’方向延長(zhǎng)D. 以3’………GGA………5’為模板，沿轉(zhuǎn)錄本3’→5’方向延長(zhǎng)4.細(xì)菌核糖體RNA中大亞基由以下物質(zhì)組成（C）A．5SrRNA,18SrRNA,5.8SrRNA和49種蛋白質(zhì)B.5SrRNA,28SrRNA,5.8SrRNA和49種蛋白質(zhì)C．5SrRNA,23SrRNA和34種蛋白質(zhì)D.5SrRNA,16SrRNA和34種蛋白質(zhì)5.肽鏈生物合成時(shí)信號(hào)肽序列（B）A．決定糖類殘基的附著點(diǎn)B.將新生肽鏈導(dǎo)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)C.控制蛋白質(zhì)分子的最終構(gòu)象D.具有疏水性6.真核生物的翻譯起始復(fù)合物在何處形成（B）A.起始密碼子AUG處B.5’端的帽子結(jié)構(gòu)C．TATA框D.CAAT框7.蛋白質(zhì)生物合成的終止信號(hào)由（D）A．tRNA識(shí)別B.EF識(shí)別C.IF（或eIF）識(shí)別D.RF識(shí)別8.能編碼多肽鏈的最小DNA單位是（A）A．順反子B.操縱子C.啟動(dòng)子D.復(fù)制子9.參與原核生物肽鏈延長(zhǎng)的因子是（C）A．IF1B.IF2C.EF-TuD.RF110.參與真核生物肽鏈延長(zhǎng)的因子是（D）A．eRFB.eIF1C.EF-TuD.eEF1α簡(jiǎn)答題：1．簡(jiǎn)述核糖體的結(jié)構(gòu)及功能特點(diǎn)：答：核糖體的結(jié)構(gòu)：①真核生物：由60S大亞基和40S小亞基組成的80S的核糖體；②原核生物：由50S大亞基和30S小亞基組成的70S的核糖體功能特點(diǎn)：合成蛋白質(zhì)。在單個(gè)核糖體上，包括至少5個(gè)功能活性中心，在蛋白質(zhì)合成過程中，各有專一的識(shí)別作用和功能：mRNA的結(jié)合部位——小亞基，結(jié)合或接受AA-tRNA的部位——大亞基A位，結(jié)合或接受肽基tRNA部位——大亞基，肽基轉(zhuǎn)移部位——大亞基P位，形成肽鍵部位（轉(zhuǎn)肽酶中心）——大亞基E位。2.簡(jiǎn)述氨基酸的活化過程答：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量，才能參與蛋白質(zhì)的合成，活化反應(yīng)由氨酰tRNA合成酶催化?；罨謨刹剑孩倩罨篴a+ATP+E→氨基酰-AMP釋放出PPi②轉(zhuǎn)移：氨基酰-AMP轉(zhuǎn)移到tRNA并釋放出AMP。3、論述蛋白質(zhì)的翻譯過程。答：蛋白質(zhì)的翻譯即合成過程可分為四個(gè)階段：氨基酸的活化、肽鏈合成的起始、延伸和終止。氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量，才能參與蛋白質(zhì)的合成，活化反應(yīng)由氨酰tRNA合成酶催化，最終氨基酸連接在tRNA的3’端合成氨酰-tRNA。肽鏈合成的起始：核蛋白體大小亞基分離，mRNA在小亞基上定位結(jié)合，起始氨基酰tRNA與小亞基結(jié)合，核蛋白體大亞基結(jié)合。③肽鏈的延伸：肽鏈的延長(zhǎng)是在核蛋白體上連續(xù)性循環(huán)式進(jìn)行，每次循環(huán)增加一個(gè)氨基酸，分為以下三步：（一）進(jìn)位:根據(jù)mRNA下一組遺傳密碼指導(dǎo)，使相應(yīng)氨基酰-tRNA進(jìn)入核蛋白體A位。（二）成肽:肽酰轉(zhuǎn)移酶將相鄰的兩個(gè)氨基酸相連形成肽鍵，該過程不需要能量的輸入；（三）轉(zhuǎn)位：移位酶利用GTP水解釋放的能量使核糖體沿mRNA移動(dòng)一個(gè)密碼子，釋放出空載的tRNA并將新生肽鏈運(yùn)至P位點(diǎn)。肽鏈合成的的終止與釋放：釋放因子識(shí)別并與終止密碼子結(jié)合，水解P位上多肽鏈與tRNA之間的二脂鍵，接著，新生肽鏈和tRNA從核糖體上釋放，核糖體大、小亞基解體，蛋白質(zhì)合成結(jié)束。4、原核生物翻譯的起始過程（1）核糖體大小亞基分離（2）30s小亞基通過SD序列與mRNA模板相結(jié)合（3）在IF-2和GTP的幫助下fMet-tRNAfMet進(jìn)入小亞基的P位，tRNA的反密碼子與mRNA上密碼子配對(duì)。（4)帶有tRNA、mRNA和三個(gè)翻譯起始因子的小亞基起始復(fù)合物與50s的大亞基結(jié)合，GTP水解釋放翻譯起始因子。5、以大腸桿菌為例簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)合成的過程從以下四個(gè)方面詳細(xì)論述（1）氨基酸的活化：（2）肽鏈合成的起始：（3）肽鏈的延生：（4）肽鏈合成的終止：第六章乳糖操縱子模型內(nèi)容（1）Z、Y、A基因產(chǎn)物由同一條多順反子mRNA分子所編碼。（2）乳糖操縱子mRNA分子的啟動(dòng)區(qū)（P）位于阻遏基因（I）與操縱區(qū)（O）之間，不能單獨(dú)起始半乳糖苷酶和透過酶基因的高效表達(dá)。（3）乳糖操縱子的操縱區(qū)是DNA上的一小段序列（僅為26bp），是阻遏物的結(jié)合位點(diǎn)。（4）當(dāng)阻遏物與操縱區(qū)相結(jié)合時(shí)，lacmRNA的轉(zhuǎn)錄起始受到抑制。（5）誘導(dǎo)物通過與阻遏物結(jié)合，改變其三維構(gòu)象，使之不能與操縱區(qū)相結(jié)合，誘發(fā)lacmRNA的合成。色氨酸操縱子轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控通過核糖體與mRNA前導(dǎo)序列結(jié)合，對(duì)轉(zhuǎn)錄終止進(jìn)行調(diào)控。Attenuator(衰減子)：是位于轉(zhuǎn)錄單位開始區(qū)的一種內(nèi)部終止子，由核糖體在mRNA上的位置決定該終止發(fā)夾是否形成。若不形成發(fā)夾，RNA聚合酶通讀終止子，基因得以表達(dá)。當(dāng)缺乏色氨酸時(shí)，核糖體在trp密碼子上暫停，此密碼子是1區(qū)的一部分。所以1區(qū)被核糖體隔離，不能與2區(qū)堿基配對(duì)，這意味著在4區(qū)轉(zhuǎn)錄之前2區(qū)已和3區(qū)配對(duì)，迫使4區(qū)保持單鏈形式，不能形成終止子發(fā)夾，RNA聚合酶穿越衰減子繼續(xù)轉(zhuǎn)錄。核糖體可以合成前導(dǎo)肽，并延伸到mRNA上的UGA密碼子，UGA密碼子位于1區(qū)與2區(qū)之間。當(dāng)核糖體前進(jìn)到此點(diǎn)時(shí)，通過2區(qū)并阻止其形成堿基配對(duì)，導(dǎo)致3區(qū)與4區(qū)配對(duì)，產(chǎn)生終止子發(fā)夾。因此，在這種情況下，RNA聚合酶在衰減子處終止。乳糖操縱子(lacoperon)的結(jié)構(gòu)1、結(jié)構(gòu)基因（1）lacZ：編碼b－半乳糖苷酶（使乳糖水解）（2）lacY：編碼b－半乳糖苷透過酶（使b－半乳糖苷透過細(xì)胞壁、質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)）（3）lacA：編碼b－半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶（將乙?；D(zhuǎn)移到b－半乳糖苷上）2、調(diào)節(jié)基因（regulatorygene）（1）概念：其產(chǎn)物參與調(diào)控其他結(jié)構(gòu)基因表達(dá)的基因（2）特點(diǎn)：a、可在結(jié)構(gòu)基因群附近、也可遠(yuǎn)離結(jié)構(gòu)基因b、不僅對(duì)同一條DNA鏈上的結(jié)構(gòu)基因起作用，而且能對(duì)不同DNA鏈上的結(jié)構(gòu)基因起作用（3）調(diào)控蛋白：類型：a、阻遏蛋白（repressiveprotein）與操縱元件結(jié)合后能減弱或阻止所調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控蛋白b、激活蛋白（activatingprotein）：與操縱元件結(jié)合后能增強(qiáng)或啟動(dòng)所調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控蛋白3、操縱元件（operator）（1）與啟動(dòng)子鄰近或與啟動(dòng)子部分序列重疊（2）具有回文結(jié)構(gòu)，能形成十字形結(jié)構(gòu)。（3）與不同構(gòu)像的蛋白質(zhì)結(jié)合，可以分別起阻遏或激活基因表達(dá)的作用4、啟動(dòng)子(promoter)是指能被RNA聚合酶識(shí)別、結(jié)合并啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的一段DNA序列。（1）-10序列---Pribnow盒：TATAAT；（2）-35bp序列：TTGACA操縱子至少有一個(gè)啟動(dòng)子，一般在第一個(gè)結(jié)構(gòu)基因5’上游，控制整個(gè)結(jié)構(gòu)基因群的轉(zhuǎn)錄5、終止子（terminator）是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的DNA序列（1）不依賴ρ因子的終止子（2）依賴ρ因子的終止子在一個(gè)操縱元中至少在結(jié)構(gòu)基因群最后一個(gè)基因的后面有一個(gè)終止子大腸桿菌乳糖操縱子（lactoseoperon）包括3個(gè)結(jié)構(gòu)基因：Z、Y和A，以及啟動(dòng)子、控制子和阻遏子等。轉(zhuǎn)錄的調(diào)控是在啟動(dòng)區(qū)和操縱區(qū)進(jìn)行的。LacI——阻抑蛋白，LacZ——β-糖苷酶，LacY——透性酶，LacA——轉(zhuǎn)乙?；浮ＨN酶的功能：①.β-半乳糖酶：將乳糖分解成半乳糖和葡萄糖②.滲透酶：增加糖的滲透，易于攝取乳糖和半乳糖③.轉(zhuǎn)乙酰酶：β-半乳糖轉(zhuǎn)變成乙酰半乳糖lac操縱子小結(jié)通常情況（葡萄糖供應(yīng)正常）阻遏蛋白與操縱序列結(jié)合，基因不轉(zhuǎn)錄。細(xì)胞外的乳糖通過透性酶吸收到細(xì)胞內(nèi)；細(xì)胞內(nèi)的β-半乳糖苷酶將乳糖轉(zhuǎn)變?yōu)楫惾樘?。異乳糖結(jié)合到乳糖阻抑物上使之從操縱序列上脫離，聚合酶迅速開始lacZYA基因的轉(zhuǎn)錄。這就是負(fù)控誘導(dǎo)。然而，還需要細(xì)菌生長(zhǎng)系統(tǒng)中缺少葡萄糖，使cAMP含量增加，才有足夠量的cAMP與CRP結(jié)合形成CRP-cAMP復(fù)合物結(jié)合于Plac上游。使DNA雙螺旋發(fā)生彎曲，轉(zhuǎn)錄才可以有效地進(jìn)行。組氨酸操縱子：與His降解代謝有關(guān)的兩組酶類被稱為hut酶(histidineutilizingenzyme)，控制這些酶合成的操縱子被稱為hutoperon。由一個(gè)多重調(diào)節(jié)的操縱子控制，有兩個(gè)啟動(dòng)子，兩個(gè)操縱區(qū)及兩個(gè)正調(diào)控蛋白。轉(zhuǎn)錄后調(diào)控一、翻譯起始的調(diào)控遺傳信息的翻譯起始于mRNA上的核糖體結(jié)合位點(diǎn)（RBS）——起始密子AUG上游的一段非翻譯區(qū)。在RBS中有SD序列，與核糖體16SrRNA的3’端互補(bǔ)配對(duì)，促使核糖體與mRNA相結(jié)合。RBS的結(jié)合強(qiáng)度取決于SD序列的結(jié)構(gòu)及與AUG的距離。SD與AUG相距一般以4～10核苷酸為佳，9核苷酸最佳。二、mRNA穩(wěn)定性對(duì)轉(zhuǎn)錄水平的影響所有細(xì)胞都有一系列核酸酶，用來清除無用的mRNA。一個(gè)典型的mRNA半衰期為2-3min。mRNA分子被降解的可能性取決于其二級(jí)結(jié)構(gòu)。SD序列的微小變化，往往會(huì)導(dǎo)致表達(dá)效率成百上千倍的差異，這是由于核苷酸的變化改變了形成mRNA5’端二級(jí)結(jié)構(gòu)的自由能，影響了30S亞基與mRNA的結(jié)合，從而造成了蛋白質(zhì)合成效率上的差異。三、蛋白質(zhì)的調(diào)控作用細(xì)菌中有些mRNA結(jié)合蛋白可激活靶基因的翻譯。相反，mRNA特異性抑制蛋白則通過與核糖體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合mRNA分子來抑制翻譯的起始。大腸桿菌中的核糖體蛋白就存在翻譯抑制現(xiàn)象。四、反義RNA的調(diào)節(jié)作用RNA調(diào)節(jié)是原核基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)的另一種重要機(jī)制。細(xì)菌相應(yīng)環(huán)境壓力的改變，會(huì)產(chǎn)生一些非編碼小RNA分子，能與mRNA中的特定序列配對(duì)并改變其構(gòu)象，導(dǎo)致翻譯過程的開啟或關(guān)閉等作用。第七八章操縱子(operon)：是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)（包括啟動(dòng)子和操縱基因）以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單位，所轉(zhuǎn)錄的RNA為多順反子。在原核生物中，若干結(jié)構(gòu)基因可串聯(lián)在一起，其表達(dá)受到同一調(diào)控系統(tǒng)的調(diào)控，這種基因的組織形式稱為操縱子。反式作用因子（trans-actingfactor)：能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上，參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。弱化子：在trpmRNA5’端有一個(gè)長(zhǎng)162bp的mRNA片段被稱為前導(dǎo)區(qū)，其中123～150位堿基序列如果缺失，trp基因表達(dá)可提高6-10倍。mRNA合成起始以后，除非培養(yǎng)基中完全沒有色氨酸，轉(zhuǎn)錄總是在這個(gè)區(qū)域終止，產(chǎn)生一個(gè)僅有140個(gè)核苷酸的RNA分子，終止trp基因轉(zhuǎn)錄。這個(gè)區(qū)域被稱為弱化子，該區(qū)mRNA可通過自我配對(duì)形成莖-環(huán)結(jié)構(gòu)。順式作用元件(cis-actingelement)影響自身基因表達(dá)活性的非編碼DNA序列。斷裂基因（splitegene）：真核生物結(jié)構(gòu)基因，由若干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì)，這些基因稱為斷裂基因?；虻姆肿由飳W(xué)定義：產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所必需的全部核苷酸序列?；虮磉_(dá)的時(shí)間特異性：基因表達(dá)的空間特異性：填空題1、真核生物中反式作用因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域有：螺旋－轉(zhuǎn)角－螺旋，堿性－螺旋-環(huán)-螺旋，鋅指，堿性－亮氨酸拉鏈，同源域蛋白。2、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子按功能可以分為：基本轉(zhuǎn)錄因子和特異轉(zhuǎn)錄因子。3、真核生物有3類RNA聚合酶，負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄rRNA基因的RNA聚合酶是：RNA聚合酶I4、典型的原核啟動(dòng)子的四個(gè)特征是：轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，原核基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)通常是嘌呤，-10區(qū)，-35區(qū)。5、乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)基因有：lacZ，lacY，lacA。選擇題1、在什么情況下，乳糖操縱子的轉(zhuǎn)錄活性最高（A）A高乳糖，低葡萄糖B高乳糖，高葡萄糖C低乳糖，低葡萄糖D低乳糖，高葡萄糖2、在真核基因表達(dá)調(diào)控中，(B)調(diào)控元件能促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的速率。A弱化子B增強(qiáng)子CrepressorDTATABox3、外顯子是（D）A基因突變的表現(xiàn)BDNA被水解斷裂開的片段C不轉(zhuǎn)錄的DNAD真核生物基因的編碼序列4、關(guān)于外顯子和內(nèi)含子的敘述，正確的是（C）A僅外顯子在DNA模板上有相應(yīng)的互補(bǔ)序列BhnRNA上只有外顯子而無內(nèi)含子序列C除去內(nèi)含子及連接外顯子的過程稱為剪接D除去外顯子的過程稱為剪接5、不屬于轉(zhuǎn)錄后修飾的是（C）A腺苷酸聚合B5′端加帽子結(jié)構(gòu)C外顯子切除D內(nèi)含子切除6、AAUAAA序列是（D）A啟動(dòng)子的辨認(rèn)序列B真核生物的轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn)C真核生物的反式作用因子D真核生物轉(zhuǎn)錄終止修飾點(diǎn)7、下列哪項(xiàng)不是真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制（D）A5′端加帽和3′端多聚腺苷酸化BmRNA選擇性剪接CmRNA運(yùn)輸?shù)目刂艱外顯子切除問答題1、乳糖操縱子的作用機(jī)制。答：（1）乳糖操縱子的組成：大腸桿菌乳糖操縱子含Z，Y，A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶，透酶和半