生物化學(xué)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系完整版課件

一、肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能肌紅蛋白

肌紅蛋白（myoglobin，Mb）主要存在于肌肉中，是哺乳動物細(xì)胞主要是肌細(xì)胞貯存和分配氧的蛋白質(zhì)。肌紅蛋白由一條多肽鏈和一個輔基血紅素（heme）構(gòu)成，相對分子量16700，含153個氨基酸殘基。除去血紅素后僅剩下的肽鏈部分稱為珠蛋白（globin），它和血紅蛋白的α、β亞基有明顯的同源性，它們的構(gòu)象和功能也極為相似。血紅素非共價地結(jié)合在珠蛋白的疏水空穴中。

肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)myoglobin輔基血紅素

血紅素由原卟啉Ⅸ（protoporphyrinⅨ）中間結(jié)合一個Fe原子構(gòu)成，原卟啉Ⅸ是由4個吡咯環(huán)通過甲叉橋連接而成的扁平環(huán)狀化合物。卟啉環(huán)中央結(jié)合Fe原子，F(xiàn)e原子通常是八面體配位，應(yīng)該有6個配位鍵，其中4個配位鍵與4個吡咯環(huán)的N原子相連，另兩個配位鍵分布在卟啉環(huán)的上下。Fe原子可以是二價的或三價的，相應(yīng)的血紅素稱為[亞鐵]血紅素（ferroheme，heme）和高鐵血紅素（ferriheme，hematin），相應(yīng)的肌紅蛋白稱為[亞鐵]肌紅蛋白（ferromyoglobin）和高鐵肌紅蛋白（ferrimyoglobin，metmyoglobin）。

肌紅蛋白的輔基血紅素hemeprotoporphyrinⅨO2與肌紅蛋白的結(jié)合

血紅素中的鐵的第5個配位鍵與珠蛋白的第93（或F8）位His殘基的咪唑基N結(jié)合，這個His稱為近側(cè)His，而O2與Fe的第6個配位鍵結(jié)合。在肌紅蛋白沒有結(jié)合O2時，這個部位是空的。高鐵肌紅蛋白不能與O2結(jié)合，H2O分子代替O2成為第6個配體。

在血紅素結(jié)合O2的一側(cè)，還有一個His殘基，即第64（或E7）位His殘基，稱為遠(yuǎn)側(cè)His。由于這個遠(yuǎn)側(cè)His的存在，使得O2的結(jié)合受到空間位阻。在氧合肌紅蛋白中，O2的兩個原子與Fe不成一條直線，而是傾斜了30°。氧合肌紅蛋白中血紅素鐵離子的6個配體近側(cè)His遠(yuǎn)側(cè)HisF－肌動蛋白外觀上像是右手雙螺旋結(jié)構(gòu)，螺距約72nm。血樣中單純皰疹病毒抗體的ELISA檢測骨骼肌肌原纖維的電鏡圖如果由于肌肉收縮使線粒體中氧含量下降，它就可以立即供應(yīng)氧。在去氧血紅蛋白中，鐵原子向近側(cè)His方向凸起約0.另一類是α1β2接觸和α2β1接觸，這類接觸稱為滑動接觸。核一般處在細(xì)胞的周邊，質(zhì)膜的內(nèi)表面。α鏈或α樣鏈由141個氨基酸殘基組成，β鏈或β樣鏈由146個氨基酸殘基組成，而肌紅蛋白的肽鏈由153個氨基酸殘基組成，它們都叫珠蛋白。重鏈恒定區(qū)（包括CH1、CH2和CH3）的序列分為5種基本類型：γ（IgG）、α（IgA）、μ（IgM）、δ（IgD）和ε（IgE）。全蛋白染色免疫印跡肌紅蛋白結(jié)合氧的定量分析BloodsampleswithgreateramountsofHSVantibodyturnbrighteryellow.肌紅蛋白結(jié)合氧的定量分析BPG分子結(jié)構(gòu)及其與

Hb兩個β鏈的離子結(jié)合血紅蛋白的氧合具有正協(xié)同同促效應(yīng)，即一個O2的結(jié)合促進(jìn)同一分子其它亞基與O2的結(jié)合。肌束中的每個肌纖維（musclefiber）就是一個骨骼肌細(xì)胞，它是長柱形的多核細(xì)胞，直徑約在20～100μm之間，長可達(dá)5cm以上，人體的一些肌纖維甚至可達(dá)50cm。按照前面肌紅蛋白結(jié)合O2的定量分析的推導(dǎo)方法，Hb的氧飽和分?jǐn)?shù)Y的表達(dá)式為假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為2×106個/ml）的一半左右，而且紅細(xì)胞的形態(tài)也不正常，除了有非常大量的未成熟紅細(xì)胞外，還有很多成鐮刀狀的紅細(xì)胞。CO的毒性作用

第6個配位位置的空間位阻很重要。游離在溶液中的鐵卟啉結(jié)合CO的能力比結(jié)合O2強(qiáng)25000倍，但在肌紅蛋白中，血紅素對CO的親和力僅比對O2的親和力大250倍。肌紅蛋白（還有血紅蛋白）降低對CO的親和力，可以有效地防止代謝過程中產(chǎn)生的少量CO占據(jù)它們的O2結(jié)合部位。盡管如此，當(dāng)空氣中CO的含量達(dá)到0.06%～0.08%即有中毒的危險，達(dá)到0.1%則會導(dǎo)致死亡。O2和CO與肌紅蛋白血紅素Fe（Ⅱ）的結(jié)合FreehemewithimidazoleMb:COComplexOxymyoglobin肌紅蛋白的蛋白質(zhì)部分的作用

通常情況下，O2分子與Fe（Ⅱ）緊密接觸會使Fe（Ⅱ）氧化成Fe（Ⅲ），溶液中游離的亞鐵血紅素很容易被氧化成高鐵血紅素，但在肌紅蛋白中，由于血紅素處于疏水環(huán)境中，血紅素Fe（Ⅱ）不容易被氧化。

同樣是血紅素，與不同的蛋白質(zhì)結(jié)合后，具有不同的功能，如在細(xì)胞色素C中，血紅素起可逆電子載體的作用，過氧化氫酶中，血紅素催化H2O2歧化成H2O和O2

。免疫球蛋白G（IgG）的結(jié)構(gòu)這種檢測某種蛋白質(zhì)的方法稱為Westernblotting這種瘧疾也是一種致死性疾病，甚至具有正常血紅蛋白的人死于這種瘧疾的比例也很高，常常在還沒有繁殖后代就已死去。兩個細(xì)胞骨架蛋白，肌連蛋白和伴肌動蛋白，它們共同形成肌原纖維周圍的柔性絲狀網(wǎng)。當(dāng)肌原纖維伸張超過粗、細(xì)絲的重疊部分，肌連蛋白則被動產(chǎn)生張力，使肌原纖維復(fù)原。2×106個/ml）的一半左右，而且紅細(xì)胞的形態(tài)也不正常，除了有非常大量的未成熟紅細(xì)胞外，還有很多成鐮刀狀的紅細(xì)胞。肌鈣蛋白復(fù)合體由3個蛋白組成，肌鈣蛋白T、I、C。在強(qiáng)度特殊的肌肉中，如心肌，PEVK區(qū)的長度只有163個殘基，而在彈性大的骨骼肌中PEVK區(qū)超過2000個殘基。血紅蛋白有兩種主要構(gòu)象態(tài)，一種是T態(tài)即緊張態(tài)（tensestate），另一種是R態(tài)即松弛態(tài)（relaxedstate）。血紅蛋白別構(gòu)的異種效應(yīng)[O2]=Ap(O2)…………⑤根據(jù)henry定律，溶于液體的任一種氣體的濃度與液體上面的該氣體的分壓成正比，即2×106個/ml）的一半左右，而且紅細(xì)胞的形態(tài)也不正常，除了有非常大量的未成熟紅細(xì)胞外，還有很多成鐮刀狀的紅細(xì)胞。產(chǎn)生Bohr效應(yīng)的原因是血紅蛋白中一些pK值處于7附近的可解離基團(tuán)的作用，主要是His，它們解離與否會影響到血紅蛋白的構(gòu)象，從而影響血紅蛋白對O2的親和力。在這里肌連蛋白的作用可能是把肌球蛋白連接到Z盤上，以及作為“分子尺”調(diào)節(jié)肌節(jié)的長度，防止肌肉過分伸張。③所有基因都可能存在，但突變發(fā)生在編碼區(qū)之外，導(dǎo)致不能轉(zhuǎn)錄，或轉(zhuǎn)錄后的加工不正確。除骨骼肌的主要蛋白質(zhì)外，還有多種蛋白質(zhì)在維持肌肉結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)肌肉收縮方面起著重要的作用。盡管如此，當(dāng)空氣中CO的含量達(dá)到0.[O2]=Ap(O2)…………⑤血紅蛋白的氧合具有正協(xié)同同促效應(yīng)，即一個O2的結(jié)合促進(jìn)同一分子其它亞基與O2的結(jié)合。二、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能當(dāng)紅細(xì)胞脫氧時，鐮刀狀紅細(xì)胞的數(shù)量明顯增加。肌紅蛋白血紅素Fe原子的位移

肌紅蛋白血紅素在沒有與O2結(jié)合時，鐵原子是向第5配位體方向（HisF8）突出的。當(dāng)與O2結(jié)合時，鐵原子被拉回到卟啉平面。

肌紅蛋白血紅素Fe原子的位移肌紅蛋白結(jié)合氧的定量分析肌紅蛋白與O2結(jié)合的反應(yīng)式為其解離常數(shù)為K

,…………①令Y為肌紅蛋白的氧飽和分?jǐn)?shù)，即…………②將①改寫為…………③肌紅蛋白結(jié)合氧的定量分析將③代入②得

，

…………④

根據(jù)henry定律，溶于液體的任一種氣體的濃度與液體上面的該氣體的分壓成正比，即

[O2]=Ap

(O2)…………⑤式中A

為比例系數(shù)，p(O2)為氧氣的分壓。

肌紅蛋白結(jié)合氧的定量分析將⑤代入④得…………⑥肌紅蛋白的氧結(jié)合曲線

實驗中p(O2)可以測得，氧分壓常用Torr為單位。Y

值可用分光光度法測定，因為肌紅蛋白結(jié)合了O2時會引起吸收光譜的改變。Y

對p(O2)作圖所得的曲線稱為氧結(jié)合曲線。

1Torr=133Pa=1mmHg肌紅蛋白的氧結(jié)合曲線雙曲線方程Hill作圖

為氧結(jié)合肌紅蛋白的分?jǐn)?shù)與沒有結(jié)合氧的肌紅蛋白的分?jǐn)?shù)之比。兩邊取對數(shù)得

Hill作圖

以對作圖稱為Hill作圖，肌紅蛋白的Hill圖是一條直線，其斜率為1。當(dāng)時（50%的肌紅蛋白結(jié)合了氧），，這時，肌紅蛋白的氧結(jié)合曲線上這一點(diǎn)的斜率稱為Hill系數(shù)。肌紅蛋白的Hill系數(shù)等于1（與Hill圖直線的斜率相同），說明O2分子彼此獨(dú)立地與肌紅蛋白結(jié)合。氧與肌紅蛋白結(jié)合的Hill圖肌紅蛋白的貯氧和輸氧作用

線粒體中氧濃度為0～10torr，靜脈血氧濃度為15torr或更高些。肌紅蛋白的P

50為2torr，所以在大多數(shù)情況下，肌紅蛋白是高度氧合的，是氧的貯存庫。如果由于肌肉收縮使線粒體中氧含量下降，它就可以立即供應(yīng)氧。這種病在非洲某些地區(qū)十分流行（高達(dá)40%），它是由于遺傳基因的突變導(dǎo)致血紅蛋白分子中氨基酸殘基被改變造成的。細(xì)絲由肌動蛋白（actin）、原肌球蛋白和肌鈣蛋白復(fù)合體組成，在低離子強(qiáng)度下，肌動蛋白以單體的形式存在，稱為G－肌動蛋白。血紅蛋白是一個四聚體蛋白，它與肌紅蛋白相比，出現(xiàn)了一些新的性質(zhì)。假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為為氧結(jié)合肌紅蛋白的分?jǐn)?shù)與沒有結(jié)合氧的肌紅蛋白的分?jǐn)?shù)之比。去氧血紅蛋白α1β1的移動過程氧合血紅蛋白T態(tài)血紅蛋白結(jié)合O2后轉(zhuǎn)變成R態(tài)，并使得分子內(nèi)一些鹽橋斷裂。ThesecondantibodyisantihumanIgGlinkedtohorseradishperoxidase.兩個細(xì)胞骨架蛋白，肌連蛋白和伴肌動蛋白，它們共同形成肌原纖維周圍的柔性絲狀網(wǎng)。地中海貧血可以由幾條途徑產(chǎn)生：①缺失一個或多個編碼血紅蛋白鏈的基因；在肌肉中肌連蛋白從M線的邊緣開始，沿肌球蛋白絲全長伸展至Z盤。血紅蛋白與O2的結(jié)合受其它分子的調(diào)節(jié)，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphateglycerate，BPG）等。HbO2＋H+HbH+＋O2不同物種血紅蛋白氨基酸序列的比較擴(kuò)大培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中提取純化單克隆抗體。在肌連蛋白分子中央是一個新的結(jié)構(gòu)花式，由PEVK的重復(fù)單位組成。鐮刀狀細(xì)胞貧血病人血紅蛋白含量僅為正常人（15～16g/100ml）的一半，紅細(xì)胞數(shù)目也是正常人（4.血紅蛋白氧合時鐵原子的移動卟啉環(huán)中央結(jié)合Fe原子，F(xiàn)e原子通常是八面體配位，應(yīng)該有6個配位鍵，其中4個配位鍵與4個吡咯環(huán)的N原子相連，另兩個配位鍵分布在卟啉環(huán)的上下。2×106個/ml）的一半左右，而且紅細(xì)胞的形態(tài)也不正常，除了有非常大量的未成熟紅細(xì)胞外，還有很多成鐮刀狀的紅細(xì)胞。血清樣品中單純皰疹病毒抗體的ELISA檢測PEVK花式可能起彈簧裝置的作用，在肌肉伸展之后可拉動肌肉恢復(fù)原狀，并且也可能在調(diào)節(jié)肌纖維的強(qiáng)度和彈性方面起作用。肌紅蛋白的貯氧和輸氧作用

肌紅蛋白也有利于細(xì)胞內(nèi)氧從細(xì)胞的內(nèi)表面向線粒體轉(zhuǎn)運(yùn)，因為這種運(yùn)轉(zhuǎn)是順濃度梯度的，細(xì)胞內(nèi)表面的氧濃度約為10torr（肌紅蛋白的氧飽和度約為80%），而線粒體內(nèi)的氧濃度約為1torr（肌紅蛋白的氧飽和度約為25%），肌紅蛋白可以從細(xì)胞內(nèi)表面結(jié)合氧，而運(yùn)到線粒體中釋放氧。二、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能血紅蛋白

血紅蛋白（hemoglobin，Hb）存在于紅細(xì)胞中，它的主要功能是在血液中結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)氧氣，它在肺中與氧氣結(jié)合，運(yùn)輸?shù)饺砀魈幗M織中，再釋放出氧氣。

人體內(nèi)有正常功能的血紅蛋白發(fā)育階段血紅蛋白名稱α鏈或α樣鏈β鏈或β樣鏈亞基組成胚胎ζεζ2ε2胎兒HbFαγα2γ2出生到死亡HbAαβα2β2出生到死亡HbA2αδα2δ2血紅蛋白的氨基酸組成

α鏈或α樣鏈由141個氨基酸殘基組成，β鏈或β樣鏈由146個氨基酸殘基組成，而肌紅蛋白的肽鏈由153個氨基酸殘基組成，它們都叫珠蛋白。同一類型不同希臘字母代表的鏈有個別氨基酸殘基不同。血紅蛋白的三維結(jié)構(gòu)β1β2α1α2Hb的α鏈、β鏈和Mb鏈構(gòu)象的相似性

血紅蛋白α鏈、β鏈及肌紅蛋白鏈的三級結(jié)構(gòu)非常相似，但這三種肽鏈的氨基酸序列有很大不同，141個氨基酸殘基位置中只有27個位置的殘基在這三種肽鏈中是相同的。

MbHbαHbβ不同物種血紅蛋白氨基酸序列的比較

比較了多種（從七腮鰻到人）不同的血紅蛋白的氨基酸序列，證明序列中有9個位置的殘基是所有研究過的血紅蛋白所共有的，這些稱為高度保守的殘基。血紅蛋白內(nèi)部的非極性殘基可以換成另一種非極性殘基而功能不變。

血紅蛋白氧合時亞基的移動

血紅蛋白分子中，αβ亞基的接觸有兩類，一類是α1β1接觸和α2β2接觸，這類接觸稱為裝配接觸；另一類是α1β2接觸和α2β1接觸，這類接觸稱為滑動接觸。氧合時，每個αβ二聚體半分子（原體）作為一個剛體移動，這兩個原體彼此滑動。我們將其中一個原體看作不動，另一個原體將繞一個設(shè)想的偏心軸旋轉(zhuǎn)15°，并平移0.08nm。血紅蛋白氧合時亞基的移動

去氧血紅蛋白

α1β1的移動過程氧合血紅蛋白血紅蛋白氧合時鐵原子的移動

在去氧血紅蛋白中，鐵原子向近側(cè)His方向凸起約0.06nm。氧合時，鐵原子的體積縮小，向卟啉環(huán)平面靠近約0.039nm，并牽拉近側(cè)His往血紅素平面移動，這些移動，傳遞到亞基的界面，使得亞基間的相互位置發(fā)生變化。

血紅蛋白氧合時鐵原子的移動

全蛋白染色免疫印跡HbSH2N-Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys……C端二、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能粗絲是由250~360個肌球蛋白分子通過它們的尾部締合而成的分子束，直徑約為16nm，長度約為1.肌紅蛋白的貯氧和輸氧作用暗帶是各向異性的，所以又稱各向異性帶（anisotropicband），簡稱A帶。血紅蛋白與肌紅蛋白氧合曲線的比較雞卵清溶菌酶上突出的Gln121血紅蛋白與肌紅蛋白氧合曲線的比較這種瘧疾也是一種致死性疾病，甚至具有正常血紅蛋白的人死于這種瘧疾的比例也很高，常常在還沒有繁殖后代就已死去。HbS聚集成纖維狀沉淀BPG的存在可以增加Hb在組織中的卸氧量。血紅蛋白與O2的結(jié)合受其它分子的調(diào)節(jié)，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphateglycerate，BPG）等。在這里肌連蛋白的作用可能是把肌球蛋白連接到Z盤上，以及作為“分子尺”調(diào)節(jié)肌節(jié)的長度，防止肌肉過分伸張。后者叫做Bohr效應(yīng)，因1904年發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象的丹麥生理學(xué)家C.氧合血紅蛋白表面沒有這個疏水性口袋，所以只有在缺氧時，紅細(xì)胞才會成為鐮刀狀。如果由于肌肉收縮使線粒體中氧含量下降，它就可以立即供應(yīng)氧。97，在肌肉毛細(xì)血管中Y是0.血紅蛋白推導(dǎo)氧合曲線誤差的原因游離在溶液中的鐵卟啉結(jié)合CO的能力比結(jié)合O2強(qiáng)25000倍，但在肌紅蛋白中，血紅素對CO的親和力僅比對O2的親和力大250倍。免疫球蛋白G的空間填充模型假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為去氧血紅蛋白中各亞基間的鹽橋血紅蛋白的別構(gòu)效應(yīng)

血紅蛋白是一個四聚體蛋白，它與肌紅蛋白相比，出現(xiàn)了一些新的性質(zhì)。血紅蛋白的氧合具有正協(xié)同同促效應(yīng)，即一個O2的結(jié)合促進(jìn)同一分子其它亞基與O2的結(jié)合。具有這種性質(zhì)的蛋白質(zhì)稱為別構(gòu)蛋白（其它蛋白質(zhì)也有負(fù)協(xié)同效應(yīng)的）。

血紅蛋白的協(xié)同性氧結(jié)合

假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為則解離常數(shù)K

為…………⑦…………⑧

按照前面肌紅蛋白結(jié)合O2的定量分析的推導(dǎo)方法，Hb的氧飽和分?jǐn)?shù)Y

的表達(dá)式為血紅蛋白的實際氧合曲線推導(dǎo)氧合曲線實際氧合曲線圖中的n為Hill系數(shù)血紅蛋白推導(dǎo)氧合曲線誤差的原因

血紅蛋白結(jié)合O2并不是“全或無”的，各個亞基結(jié)合O2是依次進(jìn)行的，并且前面亞基結(jié)合了O2對后面亞基與O2的結(jié)合有促進(jìn)作用。實際測定的n=2.8，若n=1，則無協(xié)同作用，若n>1則有正協(xié)同作用。對于血紅蛋白來說，當(dāng)n=4時正協(xié)同作用最大，即當(dāng)1個O2與1個亞基結(jié)合后，另外3個亞基也同時與O2結(jié)合。實際情況是n=2.8。這樣，Hb對第4個O2的親和力約為對第1個O2親和力的300倍。血紅蛋白運(yùn)輸氧的效率

在肺泡中，氧分壓為100torr，工作肌肉的毛細(xì)血管中約為20torr，血紅蛋白在肺泡中Y是0.97，在肌肉毛細(xì)血管中Y是0.25，釋放的O2是兩個Y值之差，即ΔY=0.72。這個差值越大，運(yùn)輸O2的效率就越高。肌紅蛋白不能擔(dān)當(dāng)此項工作。

血紅蛋白與肌紅蛋白氧合曲線的比較O2與血紅蛋白的結(jié)合受pH和CO2濃度的影響。擴(kuò)大培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中提取純化單克隆抗體。全蛋白染色免疫印跡粗絲上伸出的頭部與相鄰的細(xì)絲接觸。血紅素由原卟啉Ⅸ（protoporphyrinⅨ）中間結(jié)合一個Fe原子構(gòu)成，原卟啉Ⅸ是由4個吡咯環(huán)通過甲叉橋連接而成的扁平環(huán)狀化合物。T態(tài)血紅蛋白結(jié)合O2后轉(zhuǎn)變成R態(tài)，并使得分子內(nèi)一些鹽橋斷裂。血紅蛋白還能結(jié)合CO2，結(jié)合部位是亞基N末端游離的α－NH2。游離在溶液中的鐵卟啉結(jié)合CO的能力比結(jié)合O2強(qiáng)25000倍，但在肌紅蛋白中，血紅素對CO的親和力僅比對O2的親和力大250倍。產(chǎn)生Bohr效應(yīng)的原因是血紅蛋白中一些pK值處于7附近的可解離基團(tuán)的作用，主要是His，它們解離與否會影響到血紅蛋白的構(gòu)象，從而影響血紅蛋白對O2的親和力。[O2]=Ap(O2)…………⑤骨骼肌肌原纖維的電鏡圖按照前面肌紅蛋白結(jié)合O2的定量分析的推導(dǎo)方法，Hb的氧飽和分?jǐn)?shù)Y的表達(dá)式為(1,4),(2,5),(3,6)-純化程度逐步增高的尿激酶樣品在一個完全的收縮中，每個肌節(jié)縮短約1.血紅蛋白氧合時鐵原子的移動97，在肌肉毛細(xì)血管中Y是0.全蛋白染色免疫印跡卟啉環(huán)中央結(jié)合Fe原子，F(xiàn)e原子通常是八面體配位，應(yīng)該有6個配位鍵，其中4個配位鍵與4個吡咯環(huán)的N原子相連，另兩個配位鍵分布在卟啉環(huán)的上下。免疫球蛋白G的空間填充模型β6殘基位于分子表面，當(dāng)Val取代了Glu后，在分子的表面多了一個疏水基團(tuán)。人的某些生理性或病理性缺氧可以通過紅細(xì)胞中BPG濃度的升高而代償。肌紅蛋白血紅素Fe原子的位移血紅蛋白別構(gòu)的異種效應(yīng)

血紅蛋白與O2的結(jié)合受其它分子的調(diào)節(jié)，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphateglycerate，BPG）等。雖然它們在蛋白質(zhì)分子上的結(jié)合部位離血紅素很遠(yuǎn)，但這些分子極大地影響Hb的氧合性質(zhì)，這是別構(gòu)效應(yīng)中的異種效應(yīng)。

2,3-二磷酸甘油酸2,3-bisphosphateglycerate，BPGBohr效應(yīng)

組織中代謝作用產(chǎn)生H+和CO2，代謝越旺盛的組織，需要的O2越多，產(chǎn)生的H+和CO2也越多。CO2在體內(nèi)被水合成碳酸。

CO2水合的結(jié)果，使組織中pH下降，即[H+]上升。O2與血紅蛋白的結(jié)合受pH和CO2濃度的影響。去氧血紅蛋白對H+的親和力比氧合血紅蛋白大。因此，增加H+濃度將促進(jìn)O2的釋放。

HbO2

＋H+HbH+＋O2Bohr效應(yīng)

氧合血紅蛋白在組織中釋放的O2量除了受到組織中低O2濃度的作用外，還受組織中低pH的影響。后者叫做Bohr效應(yīng)，因1904年發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象的丹麥生理學(xué)家C.Bohr而得名。

產(chǎn)生Bohr效應(yīng)的原因是血紅蛋白中一些pK值處于7附近的可解離基團(tuán)的作用，主要是His，它們解離與否會影響到血紅蛋白的構(gòu)象，從而影響血紅蛋白對O2的親和力。Mb和在不同pH下Hb的氧合曲線CO2與Hb的結(jié)合

血紅蛋白還能結(jié)合CO2

，結(jié)合部位是亞基N末端游離的α－NH2。CO2的結(jié)合也能促進(jìn)O2的釋放。BPG與Hb的結(jié)合

2,3-二磷酸甘油酸（BPG）是血紅蛋白一個重要的別構(gòu)效應(yīng)劑（別構(gòu)抑制劑）。正常人紅細(xì)胞中約含有4.5mmol/L的BPG，約與血紅蛋白等摩爾數(shù)。每個Hb分子（四聚體）只有一個BPG結(jié)合位點(diǎn)，位于由4個亞基締合形成的中央孔穴內(nèi)。高負(fù)電荷的BPG分子與每個β鏈的若干個殘基的帶正電荷基團(tuán)通過靜電結(jié)合于Hb分子上，BPG把兩個β鏈交聯(lián)在一起。O2的結(jié)合使中央孔穴變小，使BPG結(jié)合變得困難。在沒有BPG存在時，O2的結(jié)合容易，而在有BPG存在時，O2的結(jié)合變得困難。BPG分子結(jié)構(gòu)及其與

Hb兩個β鏈的離子結(jié)合血紅蛋白的兩種構(gòu)象態(tài)

血紅蛋白有兩種主要構(gòu)象態(tài)，一種是T態(tài)即緊張態(tài)（tensestate），另一種是R態(tài)即松弛態(tài)（relaxedstate）。O2對R態(tài)的親和力明顯地高于對T態(tài)的親和力，并且O2的結(jié)合更穩(wěn)定了R態(tài)。缺氧時T態(tài)更加穩(wěn)定，因此T態(tài)是去氧血紅蛋白的主要構(gòu)象，R態(tài)是氧合血紅蛋白的主要構(gòu)象。T態(tài)血紅蛋白結(jié)合O2后轉(zhuǎn)變成R態(tài)，并使得分子內(nèi)一些鹽橋斷裂。

BPG對Hb氧合曲線的影響

BPG對R態(tài)Hb的親和力至少比對T態(tài)Hb低一個數(shù)量級，BPG對R態(tài)Hb的親和力大小順序為：HbO2

>Hb(O2)2>Hb(O2)3

，而對Hb(O2)4則完全不結(jié)合。

BPG濃度越大，Hb的氧合曲線就越往右偏移，說明BPG抑制O2的結(jié)合，并增加了正協(xié)同效應(yīng)。BPG的存在可以增加Hb在組織中的卸氧量。正常情況下供給組織的氧量約為血液所能攜帶的最大氧量的40%（即ΔY=40%）。BPG對Hb氧合曲線的影響B(tài)PG的生理作用

人的某些生理性或病理性缺氧可以通過紅細(xì)胞中BPG濃度的升高而代償。當(dāng)正常人在短時間內(nèi)由海平面上升到4500m高的高山上時，紅細(xì)胞中的BPG濃度幾個小時后就開始上升，兩天內(nèi)可由4.5mmol/L增加到7.5mmol/L，使氧的釋放量增大。值得注意的是，BPG濃度增加對肺中Hb與O2的結(jié)合影響不大。在這里肌連蛋白的作用可能是把肌球蛋白連接到Z盤上，以及作為“分子尺”調(diào)節(jié)肌節(jié)的長度，防止肌肉過分伸張。08%即有中毒的危險，達(dá)到0.BPG對Hb氧合曲線的影響高負(fù)電荷的BPG分子與每個β鏈的若干個殘基的帶正電荷基團(tuán)通過靜電結(jié)合于Hb分子上，BPG把兩個β鏈交聯(lián)在一起。鐮刀狀細(xì)胞貧血病是一種致死性疾病，它的純合子患者有的在童年就死亡。核一般處在細(xì)胞的周邊，質(zhì)膜的內(nèi)表面。血紅蛋白與O2的結(jié)合受其它分子的調(diào)節(jié)，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphateglycerate，BPG）等。實驗中p(O2)可以測得，氧分壓常用Torr為單位。當(dāng)時（50%的肌紅蛋白結(jié)合了氧），，這時，肌紅蛋白的氧結(jié)合曲線上這一點(diǎn)的斜率稱為Hill系數(shù)。除去血紅素后僅剩下的肽鏈部分稱為珠蛋白（globin），它和血紅蛋白的α、β亞基有明顯的同源性，它們的構(gòu)象和功能也極為相似。肌肉收縮完成后，鈣離子被鈣泵從肌漿中回收到肌質(zhì)網(wǎng)，另一ATP與肌球蛋白的頭部結(jié)合時，肌球蛋白頭部與肌動蛋白脫離，肌球蛋白頭部又回至原位，肌纖維松弛。卟啉環(huán)中央結(jié)合Fe原子，F(xiàn)e原子通常是八面體配位，應(yīng)該有6個配位鍵，其中4個配位鍵與4個吡咯環(huán)的N原子相連，另兩個配位鍵分布在卟啉環(huán)的上下。人免疫球蛋白的各種類型一、肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能肌紅蛋白血紅素Fe原子的位移雖然它們在蛋白質(zhì)分子上的結(jié)合部位離血紅素很遠(yuǎn)，但這些分子極大地影響Hb的氧合性質(zhì)，這是別構(gòu)效應(yīng)中的異種效應(yīng)。在肌紅蛋白沒有結(jié)合O2時，這個部位是空的。BPG對Hb氧合曲線的影響免疫球蛋白，Immunoglobulin,Ig1Torr=133Pa=1mmHg假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為細(xì)絲由肌動蛋白（actin）、原肌球蛋白和肌鈣蛋白復(fù)合體組成，在低離子強(qiáng)度下，肌動蛋白以單體的形式存在，稱為G－肌動蛋白。三、血紅蛋白分子病鐮刀狀細(xì)胞貧血病

鐮刀狀細(xì)胞貧血病（sickle-cellanemia）是最早被認(rèn)識的一種分子病。這種病在非洲某些地區(qū)十分流行（高達(dá)40%），它是由于遺傳基因的突變導(dǎo)致血紅蛋白分子中氨基酸殘基被改變造成的。鐮刀狀細(xì)胞貧血病人血紅蛋白含量僅為正常人（15～16g/100ml）的一半，紅細(xì)胞數(shù)目也是正常人（4.6～6.2×106個/ml）的一半左右，而且紅細(xì)胞的形態(tài)也不正常，除了有非常大量的未成熟紅細(xì)胞外，還有很多成鐮刀狀的紅細(xì)胞。當(dāng)紅細(xì)胞脫氧時，鐮刀狀紅細(xì)胞的數(shù)量明顯增加。這種病人的血紅蛋白稱為HbS。

正常紅細(xì)胞與鐮刀狀紅細(xì)胞貧血病人的紅細(xì)胞比較鐮刀狀細(xì)胞貧血病

鐮刀狀細(xì)胞貧血病是一種致死性疾病，它的純合子患者有的在童年就死亡。雜合子患者的壽命也不長，但它能抵抗一種流行于非洲的瘧疾。這種瘧疾也是一種致死性疾病，甚至具有正常血紅蛋白的人死于這種瘧疾的比例也很高，常常在還沒有繁殖后代就已死去。HbS雜合子患者對這種瘧疾有一定的抵抗能力，尚能繁殖后代，這是因為雜合子患者加速被感染紅細(xì)胞的破壞而中斷瘧原蟲的生活周期的緣故。HbA和HbS的胰蛋白酶消化液的指紋圖譜（先垂直方向濾紙層析，后水平方向電泳）HbAHbSHbA和HbS氨基酸序列的比較HbAH2N-Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys……C端HbSH2N-Val-His-Leu-Thr-Pro-Val

-Glu-Lys……C端

（β鏈）12345678（示差異處）HbS聚集成纖維狀沉淀

β6殘基位于分子表面，當(dāng)Val取代了Glu后，在分子的表面多了一個疏水基團(tuán)。血紅蛋白的氧合性質(zhì)和別構(gòu)性質(zhì)不受此變化的影響，但這一變化顯著影響了血紅蛋白的溶解度。在去氧血紅蛋白分子表面的另一處有一個疏水性口袋，正好能與這個Val側(cè)鏈結(jié)合，它們可以互相聚集成纖維狀沉淀。氧合血紅蛋白表面沒有這個疏水性口袋，所以只有在缺氧時，紅細(xì)胞才會成為鐮刀狀。

HbS聚集成纖維狀

兩股HbS鏈連鎖在一起14股鏈纖維地中海貧血

地中海貧血可以由幾條途徑產(chǎn)生：①缺失一個或多個編碼血紅蛋白鏈的基因；②所有基因都存在，但一個或多個基因發(fā)生無義突變（nonsensemutation），結(jié)果產(chǎn)生縮短了的肽鏈，或發(fā)生移碼突變，產(chǎn)生無功能的肽鏈。③所有基因都可能存在，但突變發(fā)生在編碼區(qū)之外，導(dǎo)致不能轉(zhuǎn)錄，或轉(zhuǎn)錄后的加工不正確。

廣東省是我國地中海貧血癥發(fā)病率最高的地區(qū)，約有11.07%的人（800萬人）攜帶地中海貧血癥的基因（2005年5月11日中央電視臺報道）。

卟啉環(huán)中央結(jié)合Fe原子，F(xiàn)e原子通常是八面體配位，應(yīng)該有6個配位鍵，其中4個配位鍵與4個吡咯環(huán)的N原子相連，另兩個配位鍵分布在卟啉環(huán)的上下。在肌連蛋白分子中央是一個新的結(jié)構(gòu)花式，由PEVK的重復(fù)單位組成。BPG的存在可以增加Hb在組織中的卸氧量。肌紅蛋白結(jié)合氧的定量分析用ELISA法篩選出能分泌目的抗體的單克隆雜交瘤細(xì)胞株；在肌肉中肌連蛋白從M線的邊緣開始，沿肌球蛋白絲全長伸展至Z盤。②所有基因都存在，但一個或多個基因發(fā)生無義突變（nonsensemutation），結(jié)果產(chǎn)生縮短了的肽鏈，或發(fā)生移碼突變，產(chǎn)生無功能的肽鏈。免疫球蛋白G的空間填充模型血紅蛋白結(jié)合O2并不是“全或無”的，各個亞基結(jié)合O2是依次進(jìn)行的，并且前面亞基結(jié)合了O2對后面亞基與O2的結(jié)合有促進(jìn)作用。有利的突變和中性的突變被保留下來，不利的突變造成疾病或殘疾，致死突變被淘汰。假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為血紅蛋白與O2的結(jié)合受其它分子的調(diào)節(jié)，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphateglycerate，BPG）等。ATP由線粒體供給，當(dāng)機(jī)體死亡后，線粒體停止產(chǎn)生ATP，無新的ATP與肌球蛋白結(jié)合，因而肌球蛋白頭部不能脫離肌動蛋白，使肌肉長期處于收縮狀態(tài)，稱為尸僵。地中海貧血可以由幾條途徑產(chǎn)生：①缺失一個或多個編碼血紅蛋白鏈的基因；在氧合肌紅蛋白中，O2的兩個原子與Fe不成一條直線，而是傾斜了30°。血紅蛋白別構(gòu)的異種效應(yīng)在肺泡中，氧分壓為100torr，工作肌肉的毛細(xì)血管中約為20torr，血紅蛋白在肺泡中Y是0.假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為血紅蛋白的協(xié)同性氧結(jié)合血紅蛋白結(jié)合O2并不是“全或無”的，各個亞基結(jié)合O2是依次進(jìn)行的，并且前面亞基結(jié)合了O2對后面亞基與O2的結(jié)合有促進(jìn)作用。肌紅蛋白血紅素在沒有與O2結(jié)合時，鐵原子是向第5配位體方向（HisF8）突出的。血紅蛋白與O2的結(jié)合受其它分子的調(diào)節(jié)，如H+、CO2和2,3-二磷酸甘油酸（2,3-bisphosphateglycerate，BPG）等。四、免疫系統(tǒng)和免疫球蛋白（免疫球蛋白部分）免疫球蛋白，Immunoglobulin,Ig免疫球蛋白G（IgG）的結(jié)構(gòu)免疫球蛋白G的空間填充模型雞卵清溶菌酶與其抗體的結(jié)合抗體上的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域雞卵清溶菌酶（抗原）雞卵清溶菌酶上突出的Gln121雞卵清溶菌酶與其抗體的結(jié)合抗體上的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域雞卵清溶菌酶上突出的Gln121免疫沉淀的交聯(lián)晶格交聯(lián)晶格抗原決定簇抗原（含4個決定簇）抗體人免疫球蛋白的各種類型

人的免疫球蛋白除了IgG外，還有IgA、IgM、IgD

和

IgE，共有5種類型，它們各自存在于人體的不同部位，起著不同的作用。Ig

分子輕鏈恒定區(qū)（CL）的氨基酸序列可分為兩種基本類型：κ和λ，一個

Ig

分子只能含有其中的一種。重鏈恒定區(qū)（包括CH1、CH2和CH3）的序列分為5種基本類型：γ（IgG）、α（IgA）、μ（IgM）、δ（IgD）和ε（IgE）。

各種Ig的結(jié)構(gòu)IgD的結(jié)構(gòu)與IgG類似IgGIgEIgAIgMIgM的結(jié)構(gòu)二硫鍵酶聯(lián)免疫吸附測定enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA血紅蛋白的氧合具有正協(xié)同同促效應(yīng)，即一個O2的結(jié)合促進(jìn)同一分子其它亞基與O2的結(jié)合。8，若n=1，則無協(xié)同作用，若n>1則有正協(xié)同作用。不同物種血紅蛋白氨基酸序列的比較骨骼肌肌原纖維的電鏡圖在肌纖維中肌連蛋白形成長而柔軟的細(xì)絲，一個這樣的細(xì)絲，在松弛狀態(tài)下長1000nm，在張力下它能伸長到3000nm以上。免疫球蛋白G的空間填充模型將制得的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞；BloodsampleswithgreateramountsofHSVantibodyturnbrighteryellow.全蛋白染色免疫印跡MbHbαHbβ圖中的n為Hill系數(shù)肌肉由許多平行的肌纖維束或稱肌束（bundleofmusclefiber）組成。1Torr=133Pa=1mmHg雞卵清溶菌酶與其抗體的結(jié)合肌肉收縮完成后，鈣離子被鈣泵從肌漿中回收到肌質(zhì)網(wǎng)，另一ATP與肌球蛋白的頭部結(jié)合時，肌球蛋白頭部與肌動蛋白脫離，肌球蛋白頭部又回至原位，肌纖維松弛。免疫球蛋白G（IgG）的結(jié)構(gòu)血紅蛋白有兩種主要構(gòu)象態(tài)，一種是T態(tài)即緊張態(tài)（tensestate），另一種是R態(tài)即松弛態(tài)（relaxedstate）。五、肌球蛋白絲、肌動蛋白絲與肌肉收縮BPG的存在可以增加Hb在組織中的卸氧量。HbSH2N-Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys……C端它是現(xiàn)在已知最大的單鏈蛋白質(zhì)，人的心肌肌連蛋白由26926個氨基酸殘基組成，分子量為2993×103。一、肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能血樣中單純皰疹病毒抗體的ELISA檢測

AnELISAtotestforthepresenceofherpessimplexvirus(HSV)antibodiesinbloodsamples.WellswerecoatedwithanHSVantigen,towhichantibodiesagainstHSVwillbind.ThesecondantibodyisantihumanIgGlinkedtohorseradishperoxidase.BloodsampleswithgreateramountsofHSVantibodyturnbrighteryellow.血清樣品中單純皰疹病毒抗體的ELISA檢測酶標(biāo)板或稱微孔板尿激酶的免疫印跡測定(1,4),(2,5),(3,6)-純化程度逐步增高的尿激酶樣品全蛋白染色免疫印跡這種檢測某種蛋白質(zhì)的方法稱為Westernblotting尿激酶單抗檢測

單克隆抗體的制備方法用目的抗原免疫小鼠，取小鼠脾臟制成B淋巴細(xì)胞懸液；繁殖小鼠骨髓瘤細(xì)胞；將制得的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞；轉(zhuǎn)移到只有雜交瘤細(xì)胞才能生長的培養(yǎng)基中進(jìn)行選擇性培養(yǎng)；

用ELISA法篩選出能分泌目的抗體的單克隆雜交瘤細(xì)胞株；擴(kuò)大培養(yǎng)，從培養(yǎng)液中提取純化單克隆抗體。五、肌球蛋白絲、肌動蛋白絲與肌肉收縮

(肌纖維的結(jié)構(gòu))

脊椎動物的骨骼肌又稱橫紋肌或隨意肌。肌肉由許多平行的肌纖維束或稱肌束（bundleofmusclefiber）組成。肌束中的每個肌纖維（musclefiber）就是一個骨骼肌細(xì)胞，它是長柱形的多核細(xì)胞，直徑約在20～100μm之間，長可達(dá)5cm以上，人體的一些肌纖維甚至可達(dá)50cm。肌細(xì)胞間有少量結(jié)締組織，并有毛細(xì)血管和神經(jīng)纖維等。

骨骼肌的組織水平肌纖維的細(xì)胞水平

肌纖維（肌細(xì)胞）是由多個稱為成肌細(xì)胞的肌肉前體細(xì)胞融合而成的。每個肌纖維含有約1000個肌原纖維（myofibril），肌原纖維直徑2μm。這些肌原纖維處于肌漿（sarcoplasm）中。核一般處在細(xì)胞的周邊，質(zhì)膜的內(nèi)表面。肌纖維中含有許多線粒體，在肌肉收縮時提供能源物質(zhì)ATP，肌纖維中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稱為肌質(zhì)網(wǎng)（sarcoplasmicreticulum），分布在各肌原纖維的周圍，肌肉收縮時由它提供所需的Ca2+。

肌原纖維的結(jié)構(gòu)

肌原纖維呈現(xiàn)一個很有規(guī)則的周期性結(jié)構(gòu)，暗帶和明帶交替排列，一個周期結(jié)構(gòu)稱為肌節(jié)（sarcomere）。明帶折射率是各向同性的，因此又稱各向同性帶（isotropicband），簡稱

I

帶；暗帶是各向異性的，所以又稱各向異性帶（anisotropicband），簡稱A帶。I

帶被一條稱為Z線或Z盤的細(xì)線分成相等的兩半。在A帶中央有一個較明亮的區(qū)域稱為H區(qū)，H區(qū)正中間有一個致密的橫線，稱為M線或M盤，它將H區(qū)分成相等的兩半。

骨骼肌肌原纖維的電鏡圖肌節(jié)

一個肌原纖維可以看成是由許多稱為肌節(jié)（sarcomere）的重復(fù)單位構(gòu)成的，重復(fù)單位是一個A帶加上前后各半個I帶，即從Z線到下一個Z線。一個肌節(jié)在松馳狀態(tài)下長度為2.5μm。上述肌纖維結(jié)構(gòu)在光學(xué)顯微鏡下就能觀察到。

肌肉收縮的顯微觀察

在一個完全的收縮中，每個肌節(jié)縮短約1.0μm（原長2.5μm）。收縮時I帶和H區(qū)幾乎消失，Z盤向A帶靠攏，也即縮短是由I帶和H區(qū)兩者的寬度減少造成的，但A帶寬度（即粗絲長度）和Z盤到H區(qū)邊緣的距離（即細(xì)絲長度）并不改變。

骨骼肌收縮的肌絲滑動模型假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為后者叫做Bohr效應(yīng)，因1904年發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象的丹麥生理學(xué)家C.免疫球蛋白G的空間填充模型在一個完全的收縮中，每個肌節(jié)縮短約1.在沒有BPG存在時，O2的結(jié)合容易，而在有BPG存在時，O2的結(jié)合變得困難。在肌連蛋白分子中央是一個新的結(jié)構(gòu)花式，由PEVK的重復(fù)單位組成。這些肌原纖維處于肌漿（sarcoplasm）中。這種病在非洲某些地區(qū)十分流行（高達(dá)40%），它是由于遺傳基因的突變導(dǎo)致血紅蛋白分子中氨基酸殘基被改變造成的。免疫球蛋白，Immunoglobulin,IgO2與血紅蛋白的結(jié)合受pH和CO2濃度的影響。肌肉收縮完成后，鈣離子被鈣泵從肌漿中回收到肌質(zhì)網(wǎng)，另一ATP與肌球蛋白的頭部結(jié)合時，肌球蛋白頭部與肌動蛋白脫離，肌球蛋白頭部又回至原位，肌纖維松弛。高負(fù)電荷的BPG分子與每個β鏈的若干個殘基的帶正電荷基團(tuán)通過靜電結(jié)合于Hb分子上，BPG把兩個β鏈交聯(lián)在一起。每個Hb分子（四聚體）只有一個BPG結(jié)合位點(diǎn)，位于由4個亞基締合形成的中央孔穴內(nèi)。在肌肉中肌連蛋白從M線的邊緣開始，沿肌球蛋白絲全長伸展至Z盤。血紅蛋白的實際氧合曲線血紅蛋白結(jié)合O2并不是“全或無”的，各個亞基結(jié)合O2是依次進(jìn)行的，并且前面亞基結(jié)合了O2對后面亞基與O2的結(jié)合有促進(jìn)作用。假設(shè)O2與Hb的結(jié)合是一種“全或無”的方式，其結(jié)合反應(yīng)式為2×106個/ml）的一半左右，而且紅細(xì)胞的形態(tài)也不正常，除了有非常大量的未成熟紅細(xì)胞外，還有很多成鐮刀狀的紅細(xì)胞。肌鈣蛋白復(fù)合體由3個蛋白組成，肌鈣蛋白T、I、C。鐮刀狀細(xì)胞貧血病是一種致死性疾病，它的純合子患者有的在童年就死亡。全蛋白染色免疫印跡[O2]=Ap(O2)…………⑤肌原纖維由粗絲和細(xì)絲構(gòu)成

粗絲是由250~360個肌球蛋白分子通過它們的尾部締合而成的分子束，直徑約為16nm，長度約為1.5μm。肌球蛋白的尾都朝向A帶的中央（H區(qū)）。粗絲中肌球蛋白的頭部有規(guī)則地每間隔約14nm在兩端伸出。粗絲上伸出的頭部與相鄰的細(xì)絲接觸。

（粗絲的結(jié)構(gòu)）粗絲和細(xì)絲中的分子裝配肌原纖維由粗絲和細(xì)絲構(gòu)成（細(xì)絲的結(jié)構(gòu)）

細(xì)絲由肌動蛋白（actin）、原肌球蛋白和肌鈣蛋白復(fù)合體組成，在低離子強(qiáng)度下，肌動蛋白以單體的形式存在，稱為G－肌動蛋白。在生理條件（高離子強(qiáng)度）下，G－肌動蛋白聚合成纖維狀的F－肌動蛋白。F－肌動蛋白外觀上像是右手雙螺旋結(jié)構(gòu)，螺距約72nm。每7個肌動蛋白分子表面有一條原肌球蛋白分子索，它遮蓋著肌動蛋白上能與肌球蛋白結(jié)合的位點(diǎn)。肌鈣蛋白復(fù)合體由3個蛋白組成，肌鈣蛋白T、I、C。其中T能與原肌球蛋白結(jié)合，C能與鈣離子結(jié)合，I

阻抑肌動蛋白與肌球蛋白結(jié)合。

骨骼肌的相關(guān)蛋白質(zhì)

除骨骼肌的主要蛋白質(zhì)外，還有多種蛋白質(zhì)在維持肌肉結(jié)構(gòu)和調(diào)節(jié)肌肉收縮方面起著重要的作用。肌球蛋白和肌動蛋白共占總肌絲蛋白質(zhì)的65%