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豬病實驗室快速診斷技術(shù)四川省川龍動科藥業(yè)豬病越來越多、越來越復雜如何診斷?病理剖檢變化、流行病學資料、
實驗室診斷、生產(chǎn)記錄等判定疑似疾病細菌的染色↓形態(tài)學觀察↓培養(yǎng)基的制備↓細菌別離培養(yǎng)↓移植↓細菌的生化試驗↓藥物敏感試驗病豬的現(xiàn)場剖檢病豬病料的采集、保存總RNA的提取↓反轉(zhuǎn)錄↓聚合酶鏈式反響〔PCR〕豬瘟病毒抗體豬偽狂犬病病毒gPI抗體(野毒)豬流感血凝抑制試驗豬細小病毒病乳膠凝集試驗〔LAT〕豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體↓DNA提取↓PCR血清學檢測分子診斷細菌別離↓結(jié)果分析一、細菌學檢查及藥敏試驗病料采集、包存、運輸細菌的別離培養(yǎng)細菌的染色顯微鏡下細菌的形態(tài)學觀察藥物敏感試驗指導臨床用藥病料的采集、保存和運輸無菌取樣供細菌學檢驗的樣品,必須無菌操作采樣,采樣用具、容器均須滅菌處理。典型采樣選取病癥最典型或病變最明顯的樣品。
低溫保存運輸。細菌別離培養(yǎng)
普通瓊脂血液瓊脂
EMB培養(yǎng)基大腸桿菌、沙門氏菌麥康凱培養(yǎng)基大腸桿菌、沙門氏菌SS培養(yǎng)基……沙門和志賀菌篩選溶血反響,如鏈球菌EMB培養(yǎng)基--大腸桿菌呈紫黑色金屬光澤的菌落細菌的染色
革蘭氏染色法:G+細菌、G-細菌芽孢染色法:梭菌、芽孢桿菌抗酸染色法鞭毛染色法
莢膜染色法顯微鏡下細菌形態(tài)學觀察桿菌球菌梭菌芽孢放線菌鞭毛、菌毛革蘭氏染色法-G+細菌革蘭氏染色法-
G-細菌傳統(tǒng)細菌學檢查耗時周期長、操作步驟多
細菌病的快速診斷--快速藥敏試驗快速篩選治療細菌感染的敏感藥物無菌操作取一小塊病料組織,涂布于普通瓊脂平板和血平板上,加藥敏紙片培養(yǎng)14-18小時,或采用鋼管法參加待篩選藥液。結(jié)果判斷
抑菌圈直徑大于14mm表示極敏感抑菌圈直徑12-14mm表示敏感抑菌圈直徑10-12mm表示中度敏感抑菌圈直徑小于8mm表示不敏感。選擇敏感度高的即抑菌圈大的藥物進行臨床治療二、PCR和血清學診斷病毒性疾病傳統(tǒng)實驗室診斷方法PCR結(jié)合瓊脂電泳、ELASA〔酶聯(lián)免疫吸附法〕、紅細胞凝集抑制試驗、LAT(乳膠凝集試驗)、免疫組化等。傳統(tǒng)PCR需要提取純化DNA、RNA,耗時耗資,手動操作步驟多,易受干擾。
直接PCR技術(shù)病毒性疾病的快速診斷-2小時出結(jié)果直接PCR方法使PCR可以直接從樣本開始,為DNA擴增帶來前所未有的便捷。未經(jīng)DNA純化而直接使用微量原始樣本做模板,為PCR實驗節(jié)約大量的時間和本錢。
采集血液樣品或組織樣品組織樣經(jīng)裂解液預處理〔血清不處理〕,與特定的引物及反響體系〔DNA聚合酶、堿基、熒光染料等〕混合均勻,直接放入熒光
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