替米考星腸溶微丸的制備及體外釋藥特性研究

替米考星腸溶微丸的制備及體外釋藥特性研究

季美沙是泰樂(lè)菌素處理產(chǎn)物的半合成。它對(duì)預(yù)防和治療由胸膜肺炎、巴氏桿菌和桿菌引起的肺炎、鳥(niǎo)類感染和乳頭生成的乳腺炎非常有效。由于替米考星在酸性環(huán)境中不穩(wěn)定,目前國(guó)內(nèi)外上市的替米考星劑型僅有替米考星預(yù)混劑、注射液等［２］,這些劑型不僅成本高,而且給藥不方便。微丸屬于口服多劑量劑型,不僅給藥方便,而且藥物的體內(nèi)吸收速度均勻且個(gè)體間生物利用度差異較?。郏常荨榱私鉀Q替米考星在酸性環(huán)境中不穩(wěn)定［４］口服在胃中易被破壞以及藥物味苦［１］的問(wèn)題,本實(shí)驗(yàn)將替米考星制備成腸溶微丸制劑,并對(duì)其進(jìn)行了表征和初步評(píng)價(jià)。1替米考星微丸的制備與釋放度測(cè)定1.1材料替米考星和花生殼粉(河南官渡獸藥制造有限公司)、微晶纖維素(安徽山河藥輔料股份有限公司)、藥用淀粉和藥用糊精(曲阜市藥用輔料有限公司)、十二烷基硫酸鈉(山東聊城安信藥用輔料有限公司)、歐巴代?腸溶薄膜包衣預(yù)混劑(上?？?lè)康包衣技術(shù)有限公司)。1.2儀器設(shè)備E-50擠出滾圓設(shè)備(重慶英格造粒包衣技術(shù)有限公司)、MiniDPL0.2型流化床(重慶精工機(jī)械)、RCZ-8B溶出儀(天大天發(fā)科技有限公司)、NikonEclipse80i型熒光顯微鏡(日本Nikon公司)、UV-2450紫外分光光度計(jì)(日本島津)、Nicolet380-紅外分光光度計(jì)(美國(guó)賽默飛世爾科技)、DSC-200F3差示掃描量熱儀(德國(guó)耐馳科學(xué)儀器貿(mào)易上海有限公司)。1.3制備方法1.3.1微丸的制備按處方量稱取藥物與輔料,過(guò)100目篩,混合均勻,以1%羥丙基甲基纖維素為粘合劑制軟材,用孔徑1.0mm的篩網(wǎng)以30r/min的擠出速度擠出,擠出后在滾圓機(jī)內(nèi)以800r/min的速度滾轉(zhuǎn)1.5min,微丸于60℃流化床干燥1h,篩分后取16~24目的微丸作為合格的微丸。1.3.2微丸的包衣用80%的乙醇配制濃度為10%的腸溶包衣液,磁力攪拌1h,使其充分溶解,過(guò)100目篩備用。將合格的微丸置于流化床中,設(shè)置進(jìn)風(fēng)溫度為70℃,物料溫度為60℃。風(fēng)機(jī)頻率25Hz,霧化壓力0.06MPa,蠕動(dòng)泵流速2mL/min,包衣結(jié)束后,固化30min［５］,得替米考星腸溶微丸。1.4替米考星含量測(cè)定紫外分光光度計(jì)掃描替米考星溶液,結(jié)果顯示其在292nm波長(zhǎng)處有最大吸收。在此波長(zhǎng)下測(cè)系列濃度的供試品溶液和各供試品溶液的吸光度［６］。以樣品吸光度(A)對(duì)濃度(C)進(jìn)行線性回歸,得直線方程A=0.0559C-0.0045(R２=0.9999)。結(jié)果顯示替米考星濃度在6~45μg/mL范圍內(nèi)與吸光度有良好的線性關(guān)系,可用于替米考星的含量測(cè)定。取替米考星微丸適量,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于替米考星25mg),置于100mL容量瓶中,加水至使其完全溶解,定容至刻度。量取10mL稀釋至100mL,作為供試品溶液。同法稱取原料藥適量,制得25μg/mL的替米考星作為對(duì)照品溶液,在292nm的波長(zhǎng)下,分別測(cè)定吸光度,計(jì)算得到替米考星微丸相對(duì)含藥量為103.00%。1.5替米考星微丸釋放度的測(cè)定參照2010版《中國(guó)藥典》附錄XD釋放度測(cè)定法第二法［７］,以900mL0.lmol/L鹽酸溶液作為溶出介質(zhì),設(shè)置溫度(37士0.5)℃,各取1g微丸投入溶出杯中,采用槳法,轉(zhuǎn)速100r/min,分別于20、40、60、80、100、120min取樣,取樣量2mL,10mL容量瓶定容。結(jié)束后,棄去酸液,立即加入pH6.8的磷酸鈉緩沖溶液繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn),分別于130、140、150、160min取樣,取1mL溶出液至10mL容量瓶定容,紫外測(cè)定吸光度,計(jì)算藥物的累積釋放量［８］。1.6替米考星微丸的確證將藥物、藥物與輔料的物理混合物和替米考星腸溶微丸進(jìn)行紅外掃描,比較其紅外光譜圖,可以判斷藥物在微丸中的變化,由替米考星主要官能團(tuán)的特征峰的變化,進(jìn)一步確定藥物在制劑中的存在狀態(tài)。另外,差示掃描量熱儀分別測(cè)3組物質(zhì)的熔點(diǎn),根據(jù)其熔點(diǎn)的變化,可以推斷藥物在制備的過(guò)程中藥物存在形式的變化。2替米考星微丸的表征根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和文獻(xiàn)報(bào)道［９］,影響微丸成型的因素主要是微晶纖維素的處方量,而包衣增重對(duì)微丸釋放度影響較大。因此,本文就這兩個(gè)因素進(jìn)行考察,結(jié)果如下。2.1不同處方量的微晶纖維素對(duì)微丸成型性的影響保持其他因素不變,通過(guò)改變填充劑花生殼粉和微晶纖維素的量來(lái)制備微丸。結(jié)果如圖1所示,微晶纖維素的處方量分別是15%、25%、30%時(shí),在電子顯微鏡下觀察,4倍鏡下微丸的形狀分別如圖1中A、B、C所示;40倍鏡下微丸的表面分別如圖1中D、E、F所示。2.2包衣增重量對(duì)微丸釋放度的影響腸溶微丸的溶出度主要受到腸溶包衣材料性質(zhì)的影響,腸溶包衣材料的厚度在一定程度上決定著微丸的釋放速率［１０］。固定處方中原輔料的量,考察不同包衣增重(5%、10%、15%)對(duì)藥物釋放的影響。由圖2可知,在酸性介質(zhì)中,包衣增重不同的微丸2h后釋放度分別達(dá)到67.46%、9.98%、5.97%。在pH6.8的磷酸緩沖鹽介質(zhì)中,最終累積釋放量分別達(dá)到94.00%、90.78%、69.60%。2.3替米考星微丸的確證2.3.1紅外分析替米考星、替米考星與輔料的物理混合物、替米考星微丸紅外光譜見(jiàn)圖3所示。根據(jù)參考文獻(xiàn)［１１］其中在特征區(qū)3450cm－１,指紋區(qū)1200cm－１是叔醇羥基的特征峰,2960cm－１、2920cm－１是甲基、亞甲基的伸縮振動(dòng)峰,1650cm－１是叔胺中碳氮鍵的伸縮振動(dòng)峰,1050~1100cm－１是六元單氧環(huán)中碳氧單鍵伸縮振動(dòng)峰。2.3.2差示掃描量熱分析替米考星、替米考星與輔料的物理混合物、替米考星微丸DSC圖譜見(jiàn)圖4所示。替米考星為單峰,熔點(diǎn)為101.2℃;替米考星和輔料物理混合物的熔點(diǎn)在105.1℃;替米考星微丸在100℃沒(méi)有固定的熔點(diǎn)。3不同藥物釋放量釋放的比較本實(shí)驗(yàn)考察微晶纖維素用量與替米考星微丸成型性的關(guān)系,15%的微晶纖維素成型性最差,滾圓后成不規(guī)則狀,表面粗糙;30%的微晶纖維素成型性相對(duì)較好,微丸粒徑也比較均勻,表面光滑。結(jié)果表明微晶纖維素用量越大,微丸越圓整、成型性越好、收率也越高。包衣膜增重對(duì)替米考星釋放的影響顯著,且隨著包衣增重的增加,藥物在酸性釋放介質(zhì)中的釋放度逐漸降低,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),在緩沖鹽釋放介質(zhì)中包衣膜出現(xiàn)不同程度的溶解,導(dǎo)致釋放速率增大。包衣增重5%的處方在酸中釋放較快,2h內(nèi)藥物釋放量達(dá)到60%以上,140min后在磷酸鹽中釋放量達(dá)到90%以上;包衣增重15%的處方在酸中釋放緩慢,在磷酸鹽中釋放不足70%;包衣增重10%的處方在酸中2h內(nèi)釋放不超過(guò)10%,在緩沖鹽介質(zhì)釋放實(shí)驗(yàn)中,藥物達(dá)到腸溶的效果,160min后藥物釋放達(dá)到90%以上。按照腸溶制劑的要求［７］,腸溶制劑在酸中釋放量不超過(guò)10%,在磷酸鹽中釋放不低于70%。因此包衣增重10%的微丸在腸道中溶解釋放的效果最好。擠出滾圓法是制備球形微丸一種比較理想的方法,其設(shè)備操作簡(jiǎn)單,生產(chǎn)能力強(qiáng)、成本低,制得的含藥微丸載藥量高［１２］。紅外圖譜結(jié)果顯示:A、B在3450cm－１的位置出現(xiàn)強(qiáng)的-OH伸縮振動(dòng)峰,但C中此特征峰消失,說(shuō)明藥物中的-OH被掩蓋起來(lái),同時(shí)在1050~1100cm－１處,A、B中有明顯的藥物中六元單氧環(huán)的特征峰,但在C中此官能團(tuán)的特征峰消失,初步證明了替米考星制成微丸后是以固體分散體的形成存在［１３］。結(jié)合差示掃描量熱分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,替米考星微丸圖C與物理混合物圖B相比,峰形發(fā)生比較大的變化,其中100℃左右的峰完全消失,也沒(méi)有形成新峰,進(jìn)一步證實(shí)替米考星以無(wú)定型固體共沉淀物的形式形成固體分