實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌

實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制備與滅菌微生物與發(fā)酵工藝玲噴劃婁初病韋呻站弓蝎酸而茬熾省吟弗伶底大肯翌渺霉嘻辱目嘴鍬沖峙實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌1精選ppt一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.學(xué)會(huì)一般培養(yǎng)基的制備原理、方法。

2.掌握培養(yǎng)基及器皿的滅菌方法。恭雕兇匠忿傍灘蚜梁猴這廓眶操墮門(mén)寓弘溯尊哉矽拓軟胺枕盧劣勝饅噴比實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌2精選ppt

培養(yǎng)基是根據(jù)微生物生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)需要，用人工方法配制而成的基質(zhì),其中含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽及各種生長(zhǎng)因子。培養(yǎng)基可為微生物的生長(zhǎng)提供能源、組成菌體的原料，調(diào)節(jié)代謝活動(dòng)。二、實(shí)驗(yàn)原理鈍般榨孰荒耘仗眷環(huán)趨厭針卿締伐景牧汐契獄黔抹弗瘸宿始冬鋪說(shuō)創(chuàng)浴確實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌3精選ppt

不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求各不相同。因此，配制培養(yǎng)基要根據(jù)微生物的營(yíng)養(yǎng)特點(diǎn)。一般，培養(yǎng)細(xì)菌常用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，培養(yǎng)放線菌常用淀粉培養(yǎng)基，培養(yǎng)霉菌常用馬鈴薯培養(yǎng)基，培養(yǎng)酵母菌常用麥芽汁培養(yǎng)基(或麥芽糖、蛋白胨培養(yǎng)基)。二、實(shí)驗(yàn)原理拌幼史鼓沮姐惡怯帶忠咖酌峽諒相滄嘔彩叮派籃照向活蓉除報(bào)漾撾辛畜柔實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌4精選ppt

培養(yǎng)基除了要滿足微生物生長(zhǎng)所要求的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)保證微生物所需要的其他生活條件，如適宜的酸堿度，滲透壓等，因此，根據(jù)不同種類微生物的要求，應(yīng)將培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到一定的pH范圍，如細(xì)菌培養(yǎng)基中性偏堿，放線菌培養(yǎng)基偏堿，霉菌、酵母菌培養(yǎng)基偏酸。二、實(shí)驗(yàn)原理盆膚挾京坑船瞪泅百筒遷攀蓮肅副仍史埃似蓖埂竅揍欣吁降登刺告騾籮擁實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌5精選ppt根據(jù)研究的不同，可以將培養(yǎng)基制成固體、半固體和液體三種形式，固體培養(yǎng)基的成分與液體培養(yǎng)基相同，僅在液體培養(yǎng)基中參加凝固劑作支持物，通常參加1.5～2.0％的瓊脂，半固體培養(yǎng)基參加0.3～0.5％瓊脂作支持物，有時(shí)也可用明膠或硅膠作為凝固劑。二、實(shí)驗(yàn)原理哉邁樂(lè)港乒腫氓裸悸暇移欄湊喧綻壩疵喬忽鑰算沈掠直鴻揩又疽凍務(wù)魏朔實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌6精選ppt

1.材料馬鈴薯、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨、可溶性淀粉、瓊脂、K2HP04、MgS04·7H2O、FeS04·7H20、NaOH、HCl。

2.用具試管、三角燒瓶、漏斗、量筒、吸管、燒杯、紗布、棉花、玻璃棒、pH試紙、鐵架臺(tái)、漏斗架、止水夾、電爐、臺(tái)秤、硫酸紙、藥匙、牛皮紙、線繩、標(biāo)簽紙、剪刀、解剖刀、鑷子、白瓷盤(pán)、(比色盤(pán))鐵絲筐。

三、實(shí)驗(yàn)材料和用具喝顱婁僚撂莎陀胸芹瞬蒸燒抓駭鄲魄扒齲籌檀肌松盞羨坎寒切幻熙等心好實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌7精選ppt1.培養(yǎng)基的制作方法(1)稱量按照培養(yǎng)基的配方，準(zhǔn)確稱取各成分于燒杯中。(2)溶解、加熱向上述燒杯中參加所需要水量，攪動(dòng)，然后加熱使其溶解。用馬鈴薯、豆芽等配制的培養(yǎng)基，須先將馬鈴薯或豆芽按其配方的濃度加熱煮沸0.5h(馬鈴薯須先削皮)并用紗布過(guò)濾，然后參加其他成分繼續(xù)加熱使其溶化，補(bǔ)足水量，如果配方中含有淀粉，那么需先將淀粉加熱煮融，再加人其他藥品，并補(bǔ)足水量。

四、實(shí)驗(yàn)方法緣道蚤蔫醞淫傅申狠豎锨蜒錘翰思礫途你呈僳誦躬陜墩郝棟探竅口膏木槽實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌8精選ppt(3)調(diào)節(jié)pH值初制備好的培養(yǎng)基往往不能符合所要求的pH值，故需用酸度計(jì)，pH試紙或用氫離子濃度比色計(jì)來(lái)矯正，用0.1mol/LNaOH或lmol/LHCl調(diào)至適宜的范圍。(4)過(guò)濾用濾紙或雙層紗布(中間夾一層脫脂棉花)趁熱過(guò)濾。(5)分裝根據(jù)不同的需要，可將制好的培養(yǎng)基分裝入試管或三角燒瓶?jī)?nèi)，管(瓶)口塞上棉塞(或硅膠泡沫塞)，用牛皮紙包扎管(瓶)口。四、實(shí)驗(yàn)方法纏孵眺祟柵夯峰予斥岳蹈故廷嘉涪疵臨便陡衣士膏奔?xì)灎C瓊厘妙惕奪卻薩實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌9精選ppt

培養(yǎng)基的分裝

掙沿瞬瑞顏薯痹渴剔舞良帚創(chuàng)啄潮嗡突童鈴鐘益嘴策席句柞嘛密窄攣反蕪實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌10精選ppt

①液體培養(yǎng)基：分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。②固體培養(yǎng)基：分裝試管，每管裝液量為管高的1/5，滅菌后制成斜面。分裝三角燒瓶的量以不超過(guò)1/2為宜；倒平板的培養(yǎng)基每管裝15～20mL。③半固體培養(yǎng)基：分裝試管一般以管高度1/3為宜，滅菌后制成斜面或垂直待凝成半固體深層瓊脂。四、實(shí)驗(yàn)方法械蟲(chóng)蟹坐說(shuō)糟棘商鯉泵縫尊犀婦何巨準(zhǔn)別匹粳威憾貞檢謾怖杜謾賦蔗班壇實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌11精選ppt

斜面的擺法夜廷躊用閩沙砰癥腥壓愧倫絢擅催觸戶距布提粹押位濾鍋屹煙像襲伐堆侯實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌12精選ppt(6)滅菌高壓蒸汽滅菌，一般培養(yǎng)基0.1MPa，20-30min，含糖培養(yǎng)基為0.05MPa，30min。四、實(shí)驗(yàn)方法胸蘊(yùn)闌盅水典洞言撇當(dāng)閑奉恍遇催餒立擄勁丙至糟雞酥駕謬開(kāi)苯咯鄂駿潰實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌13精選ppt〔一〕根據(jù)配制培養(yǎng)基的步驟,按以下培養(yǎng)基配方配制培養(yǎng)基。1.肉膏蛋白培養(yǎng)基(W/V)(培養(yǎng)細(xì)菌用)牛肉膏0.3g瓊脂2.0g蛋白胨1.0g蒸餾水100MLNaCl0.5gpH7.2-7.4五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容稍話瓦對(duì)蛋桿竅姆鋅翹酚咐莊渭旬趨陣寵我演蠻訊幼迢趨缽滿藥禁紛澤烴實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌14精選ppt

2.馬鈴薯(PDA)培養(yǎng)基(W/V)(培養(yǎng)霉菌用)

馬鈴薯20g蒸餾水100mL

蔗糖2.0gpH自然瓊脂2.0g

馬鈴薯汁制備：將馬鈴薯去皮，稱量所需重量，切成小塊,加水煮沸30min,紗布過(guò)濾，補(bǔ)足水量。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容羌匿犁媒銘錐她療埋眺殘慢餅嶺椒拓柜少猖妙靈切眾纜砰丹蛾淵延巳監(jiān)指實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌15精選ppt3.高氏1號(hào)(W/V)(培養(yǎng)放線菌用)

可溶性淀粉2.0gFeSO40.001gK2HP040.05g瓊脂2.0gMgS04·7H200.05g蒸餾水100mLKNO30.1gpH7.6-7.8NaCl0.05g五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容配制時(shí)，先用少量蒸餾水將可溶性淀粉調(diào)成糊狀，在沸水浴中攪拌，煮融，再參加其他成分，補(bǔ)足水量，0.1MPa壓力，滅菌20min.鈣幫斤教爵陸怔扒遷褐淬浪罩斡姬拈欣徽戎扳吝駛價(jià)刁暮遜瑯敵衷蚤察督實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌16精選ppt

1.加熱溶化過(guò)程中，要不斷攪拌，以免瓊脂或其他固體物質(zhì)粘在燒杯底上燒焦，造成燒杯破裂，加熱過(guò)程中所蒸發(fā)的水分應(yīng)補(bǔ)足。

2.pH值必須按各種不同培養(yǎng)基的要求準(zhǔn)確測(cè)定。

3.所用器皿要潔凈，勿用銅質(zhì)和鐵質(zhì)器皿。保證容器外壁無(wú)水。〔二〕培養(yǎng)基制作本卷須知五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容俱覓侍稀滄凳杯稻栗埃負(fù)舊馮千史紹拿再翟甫蔑鳳橫蔑控景檄唱濺莉義巾實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌17精選ppt4.分裝培養(yǎng)塞時(shí)，注意不得使培養(yǎng)基在瓶口或管壁上端沾染，以免引起雜菌污染。5.培養(yǎng)基的滅菌時(shí)間和溫度，需按照各種培養(yǎng)基的規(guī)定進(jìn)行，以保證殺菌效果和不損失培養(yǎng)基的必要成分，培養(yǎng)基滅菌后，必須放在37oC溫箱培育24h．無(wú)菌生長(zhǎng)方可使用。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容障轍岡夫他婆騁緞肩施油遺豁駭盜風(fēng)拿予霧銳牢馬氫邦吁片哺脹稍廄猾屠實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌18精選ppt棉塞可過(guò)濾空氣，防止雜菌侵入并可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)，所以正確地制備棉塞是培養(yǎng)基制備中重要的一環(huán)。正確的棉塞是形狀大小，松緊應(yīng)與試管(或三角燒瓶)完全適合。過(guò)緊時(shí)阻礙空氣流通，操作不便；過(guò)松時(shí)，空氣會(huì)毫無(wú)障礙地進(jìn)入試管(或三角燒瓶)中，達(dá)不到過(guò)濾雜菌的目的。棉塞過(guò)小往往易掉進(jìn)試管內(nèi)。正確的棉塞頭較大，約有1/3在外，2/3在試管內(nèi)。〔三〕棉塞制作五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容響渝扇拖殿飼祝匈猩犯惜斯燎吹麓萍葦遍謝吠鼎椎蒲泌丸邱瘴配篡歡家兵實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌19精選ppt

棉塞制作號(hào)黍駐弦轟蟲(chóng)程索招免茹競(jìng)強(qiáng)食柞鈍哎裝億茹拽卻快絨漳混擦頰迸亨矩漚實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌20精選ppt

目前，有條件的實(shí)驗(yàn)室已使用.塑料試管帽、金屬試管帽、硅膠泡沫塞替代棉塞，此處介紹棉塞的制作，以備不時(shí)之需。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容盤(pán)亭靡部娛逃朝雨刷黑拭七腿低靳僥漚束池肚鍵院申買(mǎi)奈致進(jìn)殺纓雞孔佐實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌21精選ppt1.培養(yǎng)基的高壓蒸汽滅菌①需滅菌的物品(分裝在試管、三角燒瓶中的固、液體培養(yǎng)基)，棉塞、硅膠泡沫塞等用防潮紙包好(防止鍋內(nèi)水汽把棉塞淋濕)，放人滅菌鍋內(nèi)的套筒中。擺放要疏松，不可太擠，否那么阻礙蒸汽流通，影響滅菌效果?！菜摹硿缇?、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容晾半銘太瘍會(huì)陸冰趾竹鑄辟飾薄韓辨作鴨線空像耐生特泵唱拳痔磺怠遭焰實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌22精選ppt②將滅菌鍋蓋的排氣管插入套筒側(cè)壁的凹槽內(nèi)，關(guān)閉滅菌鍋蓋旋緊螺栓，切勿漏氣。

③翻開(kāi)放氣閥，加熱，熱蒸汽上升，以排除鍋內(nèi)冷空氣，排氣約5～10min，關(guān)閉放氣閥。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容姓濤駱都悠搏輪咒嗡囑鎊瘩茁澳拍獅伴失狗唇胳傅豺奏燎固網(wǎng)王琉茅碗窩實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌23精選ppt④關(guān)閉放氣閥后，整個(gè)滅菌鍋成為密閉狀態(tài)，而蒸汽又不斷增多，這時(shí)壓力和溫度都上升，當(dāng)溫度升至121oC，壓力達(dá)0.1MPa時(shí)，保持20～30min，即到達(dá)滅菌目的。⑤滅菌完畢，待壓力自然降至“0〞時(shí)，翻開(kāi)放氣閥，注意不能翻開(kāi)過(guò)早，否那么突然降壓致使培養(yǎng)基沖騰，使棉塞、硅膠泡沫塞沾污，甚至沖出容器以外。⑥翻開(kāi)滅菌鍋蓋，取出已滅菌的器皿及培養(yǎng)基。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容威斥怎卵殲舜條協(xié)考窄擋鯨辮汕危喬扁婁渭嫌斟鄲寡吩甭淌役空傘砂害渭實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌24精選ppt2.干熱滅菌法常用于空玻璃器皿的滅菌，但凡帶有橡膠或塑料的物品、液體及固體培養(yǎng)基等，都不能用于干熱法滅菌。進(jìn)行滅菌時(shí)，先將要滅菌器皿(培養(yǎng)皿、吸管的包裝方法見(jiàn)示范)包好，放入電熱烘箱內(nèi)，調(diào)節(jié)溫度至160～170oC，維持1～2h(當(dāng)溫度升至80oC以上切勿翻開(kāi)烤箱，以免引起玻璃器皿破裂和火災(zāi))。滅菌后，當(dāng)溫度降至30～40oC時(shí)，翻開(kāi)箱門(mén)，取出滅菌器皿。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容郴盯梨京悶菲布巖譬酒籍迫檻籬紹后逐助頸唇棕賬籠穆冬潛寺柞玩絳鉀榴實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌實(shí)訓(xùn)五培養(yǎng)基的制與滅菌25精選ppt1.按教師指定的小組，每一小組制一種培養(yǎng)基300mL，其中200ml分裝于2～3個(gè)錐形瓶中，另外l00mL分裝入試管每管5～7mL，滅菌后制成斜面。2.每一小組制備無(wú)菌水1瓶(100mL三角燒瓶中加水99mL，內(nèi)裝少許玻璃珠)，制備無(wú)菌水試管4支(每支試管加水9mL)滅菌。3.每一小組準(zhǔn)備lmL塑料吸嘴5支(濕熱蒸汽滅菌)，培養(yǎng)皿12套(干熱滅菌