凝膠滲透色譜與多角度激光光散射聯(lián)用儀（GPC－MALLS）的使用和維護(hù)

凝膠滲透色譜與多角度激光光散射聯(lián)用儀(GPC-MALLS)的使用和維護(hù)陳健英;周秋璇;胡麗華【摘要】光散射與凝膠滲透色譜聯(lián)用技術(shù)在高分子分析領(lǐng)域應(yīng)用日益廣泛，本文結(jié)合實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，介紹了儀器使用和日常維護(hù)中應(yīng)注意的問(wèn)題，以達(dá)到延長(zhǎng)儀器使用壽命的目的。%GPC-MALLSiswidelyusedinthefieldofpolymeranalysis.Combinedourexperiences,someproblemslikedailymaintenancewereintroducedtoachievetheobjectiveofextendingthelifeoftheinstrument.【期刊名稱】《分析儀器》【年(卷)，期】2015(000)002【總頁(yè)數(shù)】2頁(yè)(P94-95)【關(guān)鍵詞】多角度激光光散射儀;凝膠滲透色譜儀;使用;維護(hù)【作者】陳健英;周秋璇湖麗華【作者單位】蘇州大學(xué)分析測(cè)試中心，蘇州215123;蘇州大學(xué)分析測(cè)試中心，蘇州215123;蘇州大學(xué)分析測(cè)試中心，蘇州I215123【正文語(yǔ)種】中文近年來(lái)，光散射技術(shù)在高分子分析領(lǐng)域的應(yīng)用得到了快速發(fā)展，不僅能夠測(cè)得大分子的重均絕對(duì)分子量、分子旋轉(zhuǎn)半徑與第二維利系數(shù)，將光散射技術(shù)與凝膠滲透分析技術(shù)(GPC-MALLS)聯(lián)用，還可測(cè)得分子量分布［1-3］。目前，GPC-MALLS聯(lián)用技術(shù)已成為測(cè)定聚合物分子量一種非常有效的工具，該技術(shù)測(cè)定分子量時(shí)受聚合物結(jié)構(gòu)及分子量的限制較小，操作非常簡(jiǎn)單，有較高的精度。與傳統(tǒng)GPC相比，無(wú)需標(biāo)樣校正，無(wú)需建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，能直接測(cè)出絕對(duì)分子量及其分布，因而受到越來(lái)越多的關(guān)注。我們實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際情況配備了Model500紫外檢測(cè)器，美國(guó)Wyatt公司DAWNHELEOS-H光散射檢測(cè)器，OptilabT-rEX示差檢測(cè)器和ViscoStar-H粘度檢測(cè)器，以及Waters公司的1515單元泵和2707自動(dòng)進(jìn)樣器，組合成GPC-MALLS聯(lián)用系統(tǒng)。本文參照儀器說(shuō)明書(shū)，結(jié)合實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)，簡(jiǎn)單介紹GPC-MALLS聯(lián)用儀的使用與日常維護(hù)的一些心得體會(huì)，供同行們參考。儀器對(duì)溫度、濕度、電源等有一定的要求。室溫壓要控制在20-25°C，濕度不大于85%，儀器周圍不能有強(qiáng)烈的機(jī)械振動(dòng)、電磁波、強(qiáng)磁場(chǎng)等干擾源；室內(nèi)要有良好的通風(fēng)設(shè)備。電源最好要有穩(wěn)壓電源供電，且有良好的接地措施。由于儀器流路系統(tǒng)和流通池管路直徑較小，微粒和粉塵會(huì)導(dǎo)致流路堵塞和柱污染，流動(dòng)相需要經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的過(guò)濾，流動(dòng)相盡量使用HPLC等級(jí)溶劑，一般采用孔徑為0.45頃的微孔濾膜過(guò)濾2~3次，并盡量使用柱前在線過(guò)濾器。流動(dòng)相液體內(nèi)都會(huì)溶解一定量的氧氣，氣體進(jìn)入流路后，會(huì)影響流量的穩(wěn)定性，也會(huì)在色譜圖上出現(xiàn)尖銳的峰，影響測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性，所以流動(dòng)相需要先超聲脫氣，條件許可的話，使用在線脫氣機(jī)。在進(jìn)樣之前要充分平衡儀器系統(tǒng)和GPC色譜柱，最好以較小的流速例如0.1mL/min過(guò)夜。待基線穩(wěn)定后，才可進(jìn)樣。光散射檢測(cè)器使用時(shí)，需要把90°的原始電壓值轉(zhuǎn)換為散射光強(qiáng)度，需用甲苯校正儀器常數(shù)［4］。把過(guò)濾后的色譜純甲苯注入光散射檢測(cè)器流通池，ASTRA軟件自動(dòng)計(jì)算儀器常數(shù)。正常狀態(tài)下，大約1年做一次儀器校正，長(zhǎng)時(shí)間不用或者儀器經(jīng)過(guò)維修以后最好也做一下儀器校正。稱取一定量的樣品配成溶液，用相應(yīng)的溶劑稀釋后，配制成不同濃度的溶液，然后將溶液按濃度從稀到高的順序注入樣品池中，進(jìn)行測(cè)量和數(shù)據(jù)的收集，用ASTRA軟件處理相應(yīng)的數(shù)據(jù)，得到樣品的dn/dc值。聯(lián)機(jī)模式下，重均分子量隨dn/dc值的增加而減少，因而dn/dc值的正確測(cè)量非常重要，會(huì)影響重均分子量的測(cè)試結(jié)果，dn/dc值10%的誤差將引起分子量計(jì)算的10%的誤差。在dn/dc值的測(cè)試過(guò)程中應(yīng)盡量避免和減少各種原因造成的誤差，通常要測(cè)試2次以上，以保證數(shù)據(jù)的重復(fù)性。聯(lián)機(jī)模式下，ASTRA軟件也能在線檢測(cè)估算dn/dc，但是其前提是樣品經(jīng)過(guò)GPC色譜柱后100%被洗脫出來(lái)。相對(duì)來(lái)說(shuō)，單機(jī)測(cè)定dn/dc更精確，但如果樣品量較少，聯(lián)機(jī)模式下估算dn/dc也是一個(gè)很實(shí)用的方法。GPC-MALLS聯(lián)用時(shí)，首先需要檢查儀器工作是否正常，還需要使用一個(gè)單分散的標(biāo)樣來(lái)測(cè)定歸一化系數(shù)、延時(shí)體積等儀器常數(shù)，并把它作為一個(gè)模板測(cè)定其它待測(cè)樣品。同時(shí)，單分散的標(biāo)樣的測(cè)定也可以檢驗(yàn)儀器是否正常工作，排除儀器潛在問(wèn)題。當(dāng)樣品的分子量較小或溶液折光指數(shù)增量dn/dc值較小時(shí)，散射光強(qiáng)度較弱，受噪音干擾大，與之對(duì)應(yīng)的激光信號(hào)也較弱，會(huì)導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果誤差增大，可以適當(dāng)增大進(jìn)樣量或者提高樣品濃度來(lái)提高散射光強(qiáng)度。儀器必須由專人管理及維護(hù)，并建立專門的技術(shù)檔案。上機(jī)操作人員必須經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)，充分了解儀器后，經(jīng)上機(jī)考核合格后才能操作使用。在使用過(guò)程中，操作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。當(dāng)儀器出現(xiàn)故障時(shí)，需先退出檢測(cè)狀態(tài)，并及時(shí)向儀器負(fù)責(zé)人報(bào)告，查明故障原因，及時(shí)修理。平時(shí)要注意保持儀器室整潔，保持儀器外殼干凈，儀器風(fēng)扇處空氣過(guò)濾網(wǎng)需要定時(shí)清洗。儀器要定時(shí)開(kāi)機(jī)，避免電器元件因?yàn)槌睗癯霈F(xiàn)故障。有機(jī)相與水相體系置換時(shí)需要溶劑逐漸過(guò)渡，先用與流動(dòng)相互溶的溶劑進(jìn)行沖洗，一般按照以下步驟進(jìn)行：四氫呋喃、無(wú)水乙醇或者甲醇、純水、水相緩沖液，嚴(yán)禁直接從有機(jī)相置換成水相緩沖液，可能會(huì)導(dǎo)致儀器流路系統(tǒng)和流通池管路堵塞。沖洗時(shí)間一定要足夠，每換一種液體，需要在1.0mL/min的流速下沖洗30min以上。紫外和激光光散射檢測(cè)器的光源都有一定的壽命，控制好檢測(cè)器的開(kāi)關(guān)時(shí)間。在進(jìn)樣前30min打開(kāi)紫外檢測(cè)器，激光檢測(cè)器處于“Laseron”狀態(tài)。檢測(cè)完畢，應(yīng)立即關(guān)閉紫外和激光光散射檢測(cè)器。要注意示差檢測(cè)器的光強(qiáng)度，更換溶劑時(shí)，光強(qiáng)度會(huì)發(fā)生顯著變化，需Purgeon/off進(jìn)行多次切換，如果仍顯示lowLight，也可使用“OptimizeLEDPower”進(jìn)行優(yōu)化。粘度檢測(cè)器流通池也容易堵塞，當(dāng)Diagnostics不在normal狀態(tài)時(shí)，需要以較小的流速，IP和DP都處于purge狀態(tài)，直至沖洗至Diagnostics處于normal狀態(tài)，然后再逐步提高流速，逐步purgeIP和DP，最終達(dá)到測(cè)定樣品所需的流速。程廣文，范曉東，周志勇，等.凝膠滲透色譜-多角度激光散射測(cè)定聚乙二醇分子量[J].高分子材料科學(xué)與工程，2008，24(