正式 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

砧板上的微生物腸黏膜上分布的細(xì)菌微生物的實(shí)驗(yàn)室培育武陟一中東區(qū)高二生物組涼州詞王翰葡萄美酒夜光杯，欲飲琵琶馬上催。醉臥沙場(chǎng)君莫笑，古來征戰(zhàn)幾人回。微生物根底知識(shí)實(shí)驗(yàn)操作課題延伸微生物根底知識(shí)微生物的定義微生物的類群微生物培育基微生物的營(yíng)養(yǎng)無菌技術(shù)微生物的定義：

是一切肉眼看不見的或看不清的微小生物的總稱。球菌sphericalcoccus桿菌Rod-shapedbacillus螺旋菌spirallum細(xì)菌球菌(coccus)雙球菌(diplococcus)四聯(lián)球菌(tetrad)鏈球菌Streptococcus葡萄球菌Staphylococcus桿菌(bacillus)分枝桿菌雙歧桿菌螺菌螺旋菌(spiralbacterium)弧菌細(xì)菌的菌落⑴.定義：?jiǎn)蝹€(gè)或者少數(shù)細(xì)菌在固體培育基上大量繁衍時(shí)，會(huì)構(gòu)成一個(gè)肉眼可見的、具有一定形狀構(gòu)造的子細(xì)胞群體，叫做菌落。⑵.特征：大小、外形、光澤度、顏色、硬度、透明度等。(課本24頁(yè))⑶.功能：每種細(xì)菌在一定條件下所構(gòu)成的菌落，可以作為菌種鑒定的重要根據(jù)。幾種菌落及其形狀幾種菌落及其形狀細(xì)菌細(xì)胞的構(gòu)造根本構(gòu)造：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、擬核〔肽聚糖〕〔只需核糖體〕〔DNA所在〕特殊構(gòu)造：莢膜、鞭毛、菌毛、芽胞霉菌毛霉黃曲霉青霉酵母菌蕈類

病毒微生物的營(yíng)養(yǎng)Nutrient(營(yíng)養(yǎng)物)：凡可以滿足機(jī)體生長(zhǎng)、繁衍和完成種種生理活動(dòng)所需求的物質(zhì)通常稱為微生物的營(yíng)養(yǎng)物。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按照它們?cè)跈C(jī)體中的生理作用不同，可以將它們區(qū)分為：碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子、水水作用：①優(yōu)良的溶劑②可維持生物大分子構(gòu)造的穩(wěn)定，并參與某些重要的生物化學(xué)反響：提供碳元素的物質(zhì)。①無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3、CaCO3等②有機(jī)碳源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②有些碳源是異養(yǎng)微生物的主要能源物質(zhì)⑴.概念⑵.來源：⑶.作用：碳源氮源①無機(jī)氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮的代謝產(chǎn)物。⑵.來源：⑶.作用：提供氮元素的物質(zhì)。⑴.概念：無機(jī)鹽無機(jī)化合物⑵.來源：⑶.提供除碳源、氮源以外的各種重要元素。⑴.概念：⑶.常見的生長(zhǎng)因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生長(zhǎng)不可短少的微量有機(jī)物。酶和核酸的組成成分。維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。生長(zhǎng)因子⑷.來源：酵母膏、蛋白胨、動(dòng)植物組織提取液等。微生物培育基按化學(xué)成分不同天然培育基：合成培育基：含用化學(xué)成分還不明確的天然物質(zhì)。如牛肉膏蛋白胨培育基、麥芽汁培育基化學(xué)成分完全了解的物質(zhì)配制而成。如高氏1號(hào)培育基、查氏培育基半合成培育基：既有天然成分又有純化學(xué)試劑。如馬鈴薯蔗糖培育基液體培育基：外表生長(zhǎng)均勻混濁生長(zhǎng)沉淀生長(zhǎng)半固體培育基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)固體培育基：菌落按功能不同選擇培育基：根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)化學(xué)、物理要素的抗性而設(shè)計(jì)的培育基。鑒別培育基：培育基中加有能與某一菌的無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反響的指示劑，從而用肉眼就能使該菌菌落與外形類似的其他菌落相區(qū)分的培育基叫～。無菌技術(shù)泛指在培育微生物的操作中，一切防止雜菌污染的方法。無菌技術(shù)滅菌方法要求適用范圍灼燒滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌160－170℃1－2h100kPa121℃15-30min接種環(huán)的滅菌培育皿、玻璃棒的滅菌培育基、無菌水的滅菌實(shí)驗(yàn)操作儀器、設(shè)備制備培育基結(jié)果分析與評(píng)價(jià)純化、接種二.實(shí)驗(yàn)操作(以培育大腸桿菌為例)㈠.制備牛肉膏蛋白胨培育基1.計(jì)算2.稱量3.溶化4.滅菌:將錐形瓶放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。5.倒平板:待培育基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。2d后察看平板，無雜菌污染才可用來接種。倒平板操作答：可以用手觸摸盛有培育基的錐形瓶，覺得錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)展倒平板了。2.為什么需求使錐形瓶的瓶口經(jīng)過火焰？答：經(jīng)過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培育基。問題討論1.培育基滅菌后，需求冷卻到50℃左右時(shí)，才干用來倒平板。他用什么方法來估計(jì)培育基的溫度？3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，假設(shè)不小心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培育微生物嗎？為什么？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培育基外表的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培育基外表的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基，呵斥污染。答：空氣中的微生物能夠在皿蓋與皿底之間的培育基上繁殖，因此最好不要用這個(gè)平板培育微生物。㈡.純化大腸桿菌平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物的接種的常用接種方法有：1.平板劃線的操作方法平板劃線的操作一旦劃破，會(huì)呵斥劃線不均勻，難以到達(dá)分別單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法構(gòu)成規(guī)那么的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長(zhǎng)，會(huì)構(gòu)成一個(gè)條狀的菌落。答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上能夠存在的微生物污染培育物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終了后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而經(jīng)過劃線次數(shù)的添加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線終了后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。問題討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作終了時(shí)，依然需求灼燒接種環(huán)嗎？為什么？2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)展劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開場(chǎng)劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開場(chǎng)，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的添加而逐漸減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁衍而來的菌落。2.稀釋涂布平板的操作方法答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌〞。例如，酒精燈與培育皿的間隔要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。問題討論涂布平板的一切操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)展無菌操作？4.菌種的保管接種到固體斜面培育基，菌落長(zhǎng)成后置于4℃冰箱保管。3.微生物的恒溫培育⑵.長(zhǎng)期保管：甘油冷凍管藏法⑴.暫時(shí)保藏：三.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)㈠.培育基的制造能否合格假設(shè)未接種的培育基在恒溫箱中保溫1～2d后無菌落生長(zhǎng)，闡明培育基的制備是勝利的，否那么需求重新制備。㈡.接種操作能否符合無菌要求假設(shè)培育基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、外形、大小根本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，那么闡明接種操作是符合要求的；假設(shè)培育基上出現(xiàn)了其他菌落，那么闡明接種過程中，無菌操作還未到達(dá)要求，需求分析緣由，再次練習(xí)。㈢.能否進(jìn)展了及時(shí)細(xì)致的察看與記錄培育12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同，及時(shí)察看記錄的同窗會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)，并能察看到其他一些細(xì)微的變化。營(yíng)養(yǎng)類型能源氫的供體基本碳源微生物舉例代謝類型光能無機(jī)營(yíng)養(yǎng)(光能自養(yǎng)型)光能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)(光能異養(yǎng)型)化能無機(jī)營(yíng)養(yǎng)(化能自養(yǎng)型)化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)(化能異養(yǎng)型)光光無機(jī)物有機(jī)物無機(jī)物有機(jī)物無機(jī)物有機(jī)物二氧化碳二氧化碳及簡(jiǎn)單有機(jī)物二氧化碳有機(jī)物大多數(shù)知細(xì)菌和全部真核微生物硝化細(xì)菌氫細(xì)菌紫色非硫細(xì)菌藍(lán)細(xì)菌綠色硫細(xì)菌藻類本課題知識(shí)小結(jié):【典例解析】例:關(guān)于微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表達(dá)中，正確的選項(xiàng)是()A.是碳源的物質(zhì)不能夠同時(shí)是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也能提供能量解析：不同的微生物，所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對(duì)微生物的詳細(xì)情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng)，它的表達(dá)是不完好的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時(shí)是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同時(shí)是能源，如葡萄糖；有的碳源同時(shí)是氮源，也是能源，如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng)，除水以外的無機(jī)物種類繁多，功能也多樣。如二氧化碳，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHCO3，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽；而NaCl那么只能提供無機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng)，無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的，如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。D例2：下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的了解不正確的選項(xiàng)是()A.防止雜菌污染B.消滅雜菌C.培育基和發(fā)酵設(shè)備都必需滅菌D.滅菌