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人體組織學(xué)與解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)喜髮W(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院活體染色法顯示巨噬細(xì)胞定義:活體染色(vitalstaining)一般是指用無(wú)毒或毒性很小的染料,在不影響細(xì)胞的正常生命活動(dòng)的前提下而使活細(xì)胞的某些結(jié)構(gòu)著色的一種實(shí)驗(yàn)方法。最早進(jìn)行活體染色的是PaulEhrlich(1885)他把剛切下的新鮮組織浸泡在亞甲基藍(lán)(美藍(lán))溶液中,再用顯微鏡來(lái)觀察尚處在生活狀態(tài)下的活細(xì)胞結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、練習(xí)并掌握動(dòng)物組織活體染色方法。2、學(xué)習(xí)大鼠腸系膜鋪片制作方法。3、學(xué)習(xí)大鼠皮下結(jié)締組織鋪片制作方法。4、了解大鼠肝臟石蠟切片制片方法,觀察Kupffer細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)原理要顯示巨噬細(xì)胞多采用活體染色法,即將一種對(duì)動(dòng)物無(wú)毒害或毒性很小的染料,用注射器注入動(dòng)物體的腹膜腔或血管內(nèi),體內(nèi)有吞噬能力的細(xì)胞會(huì)將注入的活體染料吞噬入細(xì)胞內(nèi)。然后將動(dòng)物殺死取材,經(jīng)固定、浸洗、復(fù)染、脫水、透明、封固等手續(xù)制成玻片標(biāo)本?;铙w染色一般選用的燃料有臺(tái)盼藍(lán)、中性紅、鋰洋紅、墨汁等。實(shí)驗(yàn)材料與器材實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:成年大白鼠實(shí)驗(yàn)試劑與器材:1%臺(tái)盼藍(lán)染液,乙醚,福爾馬林,酒精(梯度),harris蘇木精染液、曙紅染液,二甲苯,中性樹膠;手術(shù)器械一套,5ml注射器,載玻片,蓋玻片,臥式染缸,單面刀片。2、取材動(dòng)物斷頭處死,取皮下結(jié)締組織、腸系膜、肝臟或大網(wǎng)膜為材料。取小塊結(jié)締組織或腸系膜,置于載玻片上,用解剖針盡量將其鋪平,干燥后浸入10%福爾馬林中固定。3、固定用10%福爾馬林固定12—24h。4、浸洗用70%酒精浸洗數(shù)小時(shí),中間更換數(shù)次新液,再用蒸餾水浸洗片刻,即可進(jìn)行染色。也可直接進(jìn)入70%酒精中保存。5、染色固定好的鋪片進(jìn)行常規(guī)HE染色(詳細(xì)過(guò)程見石
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