安徽省六安市金安區(qū)第一中學(xué)2024屆生物高二下期末綜合測(cè)試試題含解析_第1頁(yè)
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安徽省六安市金安區(qū)第一中學(xué)2024屆生物高二下期末綜合測(cè)試試題注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2.回答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑,如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其它答案標(biāo)號(hào)?;卮鸱沁x擇題時(shí),將答案寫在答題卡上,寫在本試卷上無效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.下面哪一項(xiàng)不是精子、卵細(xì)胞發(fā)生的區(qū)別A.發(fā)生的時(shí)間B.MI和MII的時(shí)間連續(xù)性C.是否經(jīng)過變形D.染色體的數(shù)目變化2.下列關(guān)于基因工程及轉(zhuǎn)基因食品安全性的敘述,正確的是A.基因工程經(jīng)常以抗生素抗性基因作為目的基因B.種植轉(zhuǎn)基因抗蟲作物可減少農(nóng)藥的使用量C.目的基因一定會(huì)轉(zhuǎn)入食用轉(zhuǎn)基因作物的動(dòng)物細(xì)胞D.轉(zhuǎn)入外源基因的煙草不存在安全性問題3.下列關(guān)于生物的統(tǒng)一性和差異性的說法,正確的是()A.細(xì)胞學(xué)說能說明所有生物在結(jié)構(gòu)上具有統(tǒng)一性B.細(xì)胞器種類數(shù)量的不同體現(xiàn)了真核細(xì)胞功能的差異性C.生物體的差異性表現(xiàn)在組成不同個(gè)體的元素種類和含量差異都很大D.原核細(xì)胞與真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)的統(tǒng)一性體現(xiàn)在都具有DNA、RNA、蛋白質(zhì)4.細(xì)胞分裂的方式中,有絲分裂和減數(shù)分裂過程中共有的特點(diǎn)是()①DNA復(fù)制②紡錘體出現(xiàn)③聯(lián)會(huì)④著絲點(diǎn)分裂A.①③ B.②③④ C.①③④ D.①②④5.下列有關(guān)變異與育種的敘述,錯(cuò)誤是A.四倍體西瓜與二倍體西瓜雜交,當(dāng)年可收獲到三倍體種子B.單倍體育種過程中,經(jīng)常先篩選F1花粉類型,再進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)C.誘變育種可提高突變率,在較短時(shí)間內(nèi)獲得更多的變異類型D.雜交育種只能利用已有基因的重組,按需選擇,并不能創(chuàng)造新的基因6.某小組探究不同濃度2,4-D溶液對(duì)迎春幼苗插條生根的影響,結(jié)果如下圖。有關(guān)敘述不正確的是A.10-11mol·L-1的2,4-D溶液促進(jìn)插條生根B.大于lO-10mol·L-1的2,4-D溶液抑制插條生根C.2,4-D溶液誘導(dǎo)生根的作用具有兩重性D.不同濃度的2,4-D溶液處理插條,生根數(shù)可能相同二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)極端耐熱淀粉酶在工業(yè)上具有廣泛的應(yīng)用,科研人員通過培養(yǎng)得到極端耐熱淀粉酶高產(chǎn)菌株,經(jīng)提取后獲得淀粉酶液,以淀粉為底物設(shè)置系列實(shí)驗(yàn)來研究該酶特性,回答下列問題:(1)極端耐熱淀粉酶能催化淀粉水解,但不能催化麥芽糖水解,這說明酶有________性;將該酶在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的NaOH溶液中處理一段時(shí)間后,再進(jìn)行分解淀粉的實(shí)驗(yàn),在其他條件適宜的情況下,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與不加此酶效果相同,原因是15%的NaOH溶液使酶_____遭到破壞而失活。(2)下表是一定濃度的Cl-(10-4mol/L)對(duì)酶活性(單位時(shí)間內(nèi)底物的減少量表示)的影響,已知該酶的適宜溫度值范圍為70℃~130℃,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表:溫度組別70℃80℃90℃100℃110℃120℃130℃對(duì)照組18.219.320.121.920.319.018.3實(shí)驗(yàn)組22.323.424.125.824.023.122.0①該實(shí)驗(yàn)的自變量是_______,從表格數(shù)據(jù)分析,Cl-所起的作用是_______。②若要進(jìn)一步探究酶的最適溫度,需在_________之間設(shè)立較小的溫度梯度再進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)。8.(10分)核糖體普遍存在于真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題:(1)在真核細(xì)胞中,核糖體的形成和_____________(細(xì)胞結(jié)構(gòu))有關(guān)。(2)將核糖體徹底水解,除蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物外,還包括_____________種小分子物質(zhì)。(3)在核糖體上可以完成中心法則的_____________過程,該過程中遺傳信息的流向是_____________。(4)請(qǐng)從細(xì)胞生命活動(dòng)的角度分析,真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中都含有核糖體的原因。9.(10分)長(zhǎng)跑比賽中,運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)多種生理過程發(fā)生了改變。(1)機(jī)體產(chǎn)熱大量增加,通過神經(jīng)調(diào)節(jié),引起皮膚________和汗腺分泌增強(qiáng),導(dǎo)致散熱加快以維持體溫的相對(duì)恒定。這一調(diào)節(jié)過程的中樞位于________。(2)機(jī)體大量出汗導(dǎo)致失水較多,刺激滲透壓感受器,引起垂體釋放_(tái)_______,繼而促進(jìn)________,以維持體內(nèi)的水鹽平衡。(3)機(jī)體血糖大量消耗的主要途徑是________,此時(shí)骨骼肌細(xì)胞的直接供能物質(zhì)是________,血糖含量降低時(shí),胰島A細(xì)胞分泌的胰島高血糖素增加,腎上腺髓質(zhì)分泌的________增加,使血糖快速補(bǔ)充。(4)比賽結(jié)束后,運(yùn)動(dòng)員可以適量補(bǔ)充水分以消除由于________中滲透壓升高引起的渴感,還可通過積極放松的方式緩解因肌肉細(xì)胞中________積累過多造成的肌肉酸痛。10.(10分)金屬硫蛋白(MT)是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白。某研究小組計(jì)劃通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增獲得目的基因,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌,用于重金屬?gòu)U水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過程示意圖圖像,請(qǐng)回答下列問題:(1)從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA,通過______________獲得cDNA用于PCR擴(kuò)增。(2)設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物(引物1和引物2),為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成______________,而造成引物自連。(3)圖中步驟1代表____________________,步驟2代表退火,步驟3代表延伸,這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。(4)PCR擴(kuò)增時(shí),退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會(huì)破______________的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān),長(zhǎng)度相同但______________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。(5)如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物,則可以采取的改進(jìn)措施有______________(填序號(hào):①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計(jì)引物)。11.(15分)(一)請(qǐng)回答果酒、果醋、腐乳、泡菜等發(fā)酵食品制作過程的相關(guān)問題:(1)在臭豆腐的制備過程中,常用的微生物主要是________,在此過程中,豆腐相當(dāng)于微生物生長(zhǎng)的__________________。(2)在腌制泡菜的過程中,起主要作用的微生物是乳酸菌,用水封壇的作用是_________,欲檢測(cè)泡菜在腌制過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量,使用檢測(cè)試劑后顏色變__________。(3)在果酒繼續(xù)發(fā)酵產(chǎn)生果醋過程中,依據(jù)的原理是_______________(用反應(yīng)式表達(dá))。(二)在胡蘿卜素的提取過程中既用到萃取裝置,又用到蒸餾裝置,請(qǐng)回答下列問題:(1)萃取時(shí)的加熱方式與蒸餾時(shí)的加熱方式有何不同:_____________________________。(2)萃取裝置中冷凝管的作用是_________________________________。

參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、D【解題分析】

哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn):

(1)精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的,場(chǎng)所唯一(MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸);而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的,場(chǎng)所不唯一(MⅠ場(chǎng)所在卵巢,MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中);

(2)精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同:精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退;多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的;MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的,MⅡ是在受精過程中完成的;

(3)精子的形成過程需要變形;卵細(xì)胞的形成過程不需要變形?!绢}目詳解】A、初級(jí)精母細(xì)胞是雄性動(dòng)物初情期開始后,才由精原細(xì)胞分裂形成的,而初級(jí)卵母細(xì)胞是在胎兒期性別分化后形成的,A錯(cuò)誤;B、精子的產(chǎn)生過程中,MⅠ和MⅡ是連續(xù)的,而卵細(xì)胞產(chǎn)生過程中,MⅠ和MⅡ是不連續(xù)的,B錯(cuò)誤;C、精子細(xì)胞形成后變形為蝌蚪狀,卵細(xì)胞不需要變形,C錯(cuò)誤;D、成熟的精子和卵細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂形成,都含有相當(dāng)于親本體細(xì)胞一半的染色體數(shù)目,D正確。故選:D。2、B【解題分析】

1、基因工程的工具:

(1)限制酶:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。(2)DNA連接酶:連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)運(yùn)載體:常用的運(yùn)載體:質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。2、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題:食物安全(滯后效應(yīng)、過敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變)、生物安全(對(duì)生物多樣性的影響)、環(huán)境安全(對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)。【題目詳解】A、基因工程經(jīng)常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因,A錯(cuò)誤;

B、通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)可獲得抗蟲糧食作物,從而增加糧食產(chǎn)量,減少農(nóng)藥使用,B正確;C、轉(zhuǎn)基因作物被動(dòng)物食用后,目的基因會(huì)被水解,不會(huì)轉(zhuǎn)入動(dòng)物細(xì)胞中,C錯(cuò)誤;

D、若轉(zhuǎn)入煙草中的外源基因來源于自然界,但生產(chǎn)出來的煙草也存在安全性問題,D錯(cuò)誤。故選B。【題目點(diǎn)撥】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題;了解基因工程技術(shù)的應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性問題,能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。3、B【解題分析】細(xì)胞學(xué)說揭示了一切動(dòng)植物結(jié)構(gòu)的統(tǒng)一性,A錯(cuò)誤;真核細(xì)胞中含有很多細(xì)胞器,不同的細(xì)胞器功能不同,因此細(xì)胞器種類、數(shù)量的不同體現(xiàn)了真核細(xì)胞功能的差異性,B正確;生物的統(tǒng)一性表現(xiàn)在組成不同個(gè)體的元素種類基本相同,生物體的差異性表現(xiàn)在組成不同個(gè)體的元素含量差異都很大,C錯(cuò)誤;原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)統(tǒng)一性體現(xiàn)在都具有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)等,D錯(cuò)誤?!绢}目點(diǎn)撥】解答本題關(guān)鍵能區(qū)分原核細(xì)胞與真核細(xì)胞,最根本的區(qū)別是原核細(xì)胞沒有被核膜包被的成形的細(xì)胞核,沒有核膜、核仁和染色體,原核細(xì)胞只有核糖體一種細(xì)胞器,原核生物含有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)等結(jié)構(gòu),也含有核酸和蛋白質(zhì)等物質(zhì)。4、D【解題分析】

有絲分裂和減數(shù)分裂過程的主要區(qū)別:比較項(xiàng)目有絲分裂減數(shù)分裂染色體復(fù)制間期減I前的間期同源染色體的行為聯(lián)會(huì)與四分體無同源染色體聯(lián)會(huì)現(xiàn)象、不形成四分體,非姐妹染色單體之間沒有交叉互換現(xiàn)象出現(xiàn)同源染色體聯(lián)會(huì)現(xiàn)象、形成四分體,同源染色體的非姐妹染色單體之間常常有交叉互換現(xiàn)象分離與組合也不出現(xiàn)同源染色體分離,非同源染色體自由組合出現(xiàn)同源染色體分離,非同源染色體自由組合著絲點(diǎn)的

行為中期位置赤道板減I在赤道板兩側(cè),減II在赤道板斷裂后期減II后期【題目詳解】在有絲分裂間期和減數(shù)第一次分裂間期都會(huì)發(fā)生DNA的復(fù)制,①正確;在有絲分裂和減數(shù)分裂過程中都會(huì)出現(xiàn)紡錘體,②正確;聯(lián)會(huì)只發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期,③錯(cuò)誤;

在有絲分裂后期和減數(shù)第二次分裂后期都會(huì)發(fā)生著絲點(diǎn)分裂,④正確,①②④符合題意,故選D。5、B【解題分析】

四種育種方法的比較如下表:雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法雜交→自交→選優(yōu)輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理基因重組基因突變?nèi)旧w變異(染色體組先成倍減少,再加倍,得到純種)染色體變異(染色體組成倍增加)【題目詳解】A.四倍體西瓜與二倍體西瓜雜交,獲得的是三倍體的種子,并當(dāng)年可收獲到,A正確;B.在單倍體育種過程中,先對(duì)F1的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng),后經(jīng)秋水仙素處理,長(zhǎng)成植株后再進(jìn)行篩選,B錯(cuò)誤;C.突變具有不定向性,誘變育種可提高突變率,在較短時(shí)間內(nèi)獲得更多的變異類型,C正確;D.雜交育種只能產(chǎn)生新的基因型,而不能產(chǎn)生新的基因,D正確。故選B。6、B【解題分析】

A、據(jù)圖可知,10-11mol·L-1的2,4-D溶液處理組插條生根數(shù)量比清水組多,說明10-11mol·L-1的2,4-D溶液促進(jìn)插條生根,A項(xiàng)正確;B、大于lO-10mol·L-1的2,4-D溶液不一定抑制插條生根,例如10-9mol·L-1的2,4-D溶液能促進(jìn)插條生根,B項(xiàng)錯(cuò)誤;C、據(jù)圖可知,低濃度的2,4-D溶液可促進(jìn)插條生根,高濃度的2,4-D溶液(如10-8mol·L-1的2,4-D溶液)可抑制插條生根,體現(xiàn)了2,4-D溶液誘導(dǎo)生根的作用具有兩重性,C項(xiàng)正確;D、2,4-D溶液誘導(dǎo)生根的作用具有兩重性,所以在最適濃度的左右兩側(cè),存在促進(jìn)生根效果相同的兩個(gè)不同2,4-D濃度,D項(xiàng)正確。故選B。二、綜合題:本大題共4小題7、專一性空間結(jié)構(gòu)溫度和Cl-提高了該酶的活性90-110℃【解題分析】

本題是關(guān)于酶的問題,大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),在條件適宜的情況下,酶在細(xì)胞內(nèi)外,生物體內(nèi)外都可以發(fā)揮作用,酶具有專一性、高效性、酶促反應(yīng)需要溫和條件的性質(zhì),高溫、酸堿、以及一些重金屬等都會(huì)破壞酶的空間結(jié)構(gòu)而使酶失活?!绢}目詳解】(1)題目中極端耐熱淀粉酶能催化淀粉水解,但不能催化麥芽糖水解,這說明酶有專一性的性質(zhì);如果將該酶在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的NaOH溶液中處理一段時(shí)間后,再進(jìn)行分解淀粉的實(shí)驗(yàn),在其他條件適宜的情況下,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與不加此酶效果相同,原因是NaOH溶液使酶空間結(jié)構(gòu)遭到破壞而失活。(2)表格中的實(shí)驗(yàn)探究的是Cl-對(duì)酶活性的影響,因此Cl-是自變量,實(shí)驗(yàn)中溫度是不斷變化的,因此溫度也是自變量,因此自變量是溫度和Cl-,由表中數(shù)據(jù)可知實(shí)驗(yàn)組都比對(duì)照組酶的活性高,因此Cl-在實(shí)驗(yàn)組的作用是提高了該酶的活性;表格中數(shù)據(jù)可知,100℃時(shí)酶的活性最強(qiáng),因此在如果想進(jìn)一步探究酶的最適溫度,在90-110℃的范圍內(nèi)設(shè)立較小的溫度梯度再進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)?!绢}目點(diǎn)撥】在探究酶的最適溫度時(shí),需要設(shè)計(jì)一系列的溫度梯度,做對(duì)照實(shí)驗(yàn),如果題目中有幾個(gè)溫度實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),需要在酶活性最高的溫度兩側(cè)的溫度之間縮小溫度梯度,繼續(xù)做實(shí)驗(yàn),如果沒有酶活性最高的點(diǎn),則選擇兩個(gè)相同活性對(duì)應(yīng)的溫度之間,縮小溫度梯度,繼續(xù)做實(shí)驗(yàn)。8、核仁6翻譯mRNA到蛋白質(zhì)(多肽鏈)(mRNA→蛋白質(zhì))①蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的承擔(dān)者(細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育、遺傳、代謝等生命活動(dòng)都離不開蛋白質(zhì)的參與);②核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所【解題分析】【試題分析】本題考查核糖體的相關(guān)知識(shí)。需要考生對(duì)課本上的有關(guān)核糖體的內(nèi)容進(jìn)行歸納綜合,然后再結(jié)合題目?jī)?nèi)容,回顧所學(xué)知識(shí),對(duì)各小題進(jìn)行分析作答。(1)核仁與某種RNA的合成以及核糖體的形成有關(guān),所以在真核細(xì)胞中,核糖體的形成和核仁有關(guān)。(2)核糖體由rRNA和蛋白質(zhì)組成,將核糖體徹底水解,除蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物外,還包括RNA的水解產(chǎn)物,即磷酸、核糖和四種含氮堿基共6種小分子物質(zhì)。(3)在核糖體上可以完成中心法則的翻譯過程,該過程中遺傳信息的流向是由mRNA到蛋白質(zhì)(多肽鏈)(mRNA→蛋白質(zhì))。(4)①蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的承擔(dān)者(細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育、遺傳、代謝等生命活動(dòng)都離不開蛋白質(zhì)的參與);②核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。因此真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中都含有核糖體。9、毛細(xì)血管舒張下丘腦抗利尿激素腎小管、集合管重吸收水氧化分解ATP腎上腺素細(xì)胞外液乳酸【解題分析】

(1)長(zhǎng)跑比賽中,由于產(chǎn)熱增加,機(jī)體會(huì)通過一系列調(diào)節(jié),加快散熱,從而維持體溫的相對(duì)恒定,主要調(diào)節(jié)途徑之一是下丘腦的體溫調(diào)節(jié)中樞通過傳出神經(jīng)作用于皮膚的毛細(xì)血管,使毛細(xì)血管舒張,加快散熱,同時(shí)汗腺分泌增加,散熱增強(qiáng)。(2)當(dāng)內(nèi)環(huán)境滲透壓升高時(shí),下丘腦合成分泌并由垂體釋放抗利尿激素增加,作用于腎小管和集合管,促進(jìn)對(duì)水的重吸收,以維持內(nèi)環(huán)境滲透壓平衡。(3)長(zhǎng)跑比賽中要消耗大量的能量,這些能量主要來自于血糖的的氧化分解,生命活動(dòng)所需能量直接來自ATP的水解;腎上腺髓質(zhì)分泌的腎上腺素能促進(jìn)肝糖原分解成葡萄糖。(4)運(yùn)動(dòng)過程中會(huì)丟失大量的水分,導(dǎo)致細(xì)胞外液滲透壓升高,經(jīng)滲透壓感受器通過神經(jīng)傳到大腦皮層,引起渴覺,從而主動(dòng)補(bǔ)充水分;劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí),耗氧增加,部分肌肉細(xì)胞會(huì)進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,乳酸積累過多會(huì)造成肌肉酸痛?!绢}目點(diǎn)撥】考查體溫調(diào)節(jié)、水平衡調(diào)節(jié)和血糖調(diào)節(jié)及能源物質(zhì)代謝的知識(shí)。學(xué)習(xí)過程中要牢固掌握內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)如體溫調(diào)節(jié)、水平衡調(diào)節(jié)和血糖調(diào)節(jié)的過程,結(jié)合相應(yīng)問題準(zhǔn)確作答。10、逆轉(zhuǎn)錄堿基互補(bǔ)配對(duì)變性引物與模板GC含量高②③【解題分析】

PCR技術(shù):

1、概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2、原理:DNA復(fù)制。

3、前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。

4、條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。

5、過程:①高溫變性:DNA解旋過程;②低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈;PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開?!绢}目詳解】(1)PCR擴(kuò)增目的基因,首先要有目的基因作為模板,所以從高表達(dá)MT

蛋白的生物組織中提取mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,從而用于PCR擴(kuò)增。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒,首先要用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適當(dāng)?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶位點(diǎn),設(shè)計(jì)的引物之間不能有堿基互補(bǔ)配對(duì),否則引物自連,而不能與模板相連。

(3)圖中步驟1、2、3分別代表變性、退火、延伸,這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。

(4)退火表示引物與模板相連,若退火溫度過高會(huì)破壞引物與模板的堿基配對(duì);由于G-C之間有三個(gè)氫鍵,A-T之間有兩個(gè)氫鍵,所以G-C含量越高的引物,退火溫度越高。

(5)PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物,可能是退火溫度過高,導(dǎo)致引物與模板不能相連或引物間相互配對(duì),引物自連,不能與模板相連,因此,可通過②降低退火溫度或③重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行改進(jìn)。【題

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