保健食品用原料制大黃

保健食品用原料制大黃1范圍本文件適用于保健食品用原料制大黃。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。下列文件中所包含的部分條款通過相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的部分內(nèi)容。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）適用于本文件。GB2761食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中真菌毒素限量GB2762食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限量GB2763食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測定GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測定GB16740食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)保健食品《中華人民共和國藥典》一部《中華人民共和國藥典》四部3技術(shù)要求3.1來源制大黃為凈大黃片照酒炙法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0213方法）炒干而成。3.2感官要求應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1感官要求項(xiàng)目要求檢驗(yàn)方法色澤表面深棕黃色，有的可見焦斑在日光下觀察顏色；如斷面不易觀察，可削平后觀察滋味、氣味微有酒香氣滋味可取少量直接口嘗，或加熱水浸泡后嘗浸出液；氣味可直接嗅聞，或在折斷、破碎或搓揉時(shí)進(jìn)行形態(tài)形如大黃片。呈類圓柱形、圓錐形、卵圓形或不規(guī)則塊狀，長3~17cm，直徑3~10cm在日光下觀察；長度、寬度及厚度測量時(shí)應(yīng)用毫米刻度尺；質(zhì)地是指用手折斷時(shí)的感官感覺3.3理化指標(biāo)應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2理化指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法水分，%≤13.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則0832第二法灰分，%≤10.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2302方法浸出物（水），%≥25.0《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2201熱浸法（用水作溶劑）鉛（以Pb計(jì)），mg/kg≤5.0GB5009.12總砷（以As計(jì)），mg/kg≤1.0GB5009.11總汞（以Hg計(jì)），mg/kg≤0.3GB5009.17硝磺草酮，（mg/kg）≤0.01GB2763規(guī)定的方法土大黃苷供試品色譜中，在與土大黃苷對照品色譜相應(yīng)的位置上，不得顯相同的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)附錄A注：其他未列污染物限量應(yīng)符合GB2762相應(yīng)食品類別（名稱）的規(guī)定或有關(guān)規(guī)定；其他未列農(nóng)藥最大殘留限量應(yīng)符合GB2763相應(yīng)食品類別/名稱的規(guī)定或國家有關(guān)規(guī)定。3.4標(biāo)志性成分指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3標(biāo)志性成分指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢驗(yàn)方法游離蒽醌（以干燥品計(jì)），%≥0.50附錄B總蒽醌（以干燥品計(jì)），%≥1.5附錄C3.5真菌毒素限量真菌毒素限量應(yīng)符合GB2761中相應(yīng)食品類別（名稱）的規(guī)定或有關(guān)規(guī)定。4其他保健食品所用原料為本品的炮制加工品，其炮制加工前的原料應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)。炮制方法為凈制、切制的，除另有規(guī)定外，炮制加工品應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn)。炮制方法為其他炮制工藝的，炮制加工品應(yīng)符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。

附錄A（規(guī)范性附錄）土大黃苷檢驗(yàn)方法A.1一般規(guī)定本文件所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純試劑和GB/T6682規(guī)定的三級水。實(shí)驗(yàn)中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。A.2方法提要本品經(jīng)甲醇超聲提取后，采用薄層色譜法，以土大黃苷對照品為對照對樣品進(jìn)行鑒別分析。A.3儀器A.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。A.3.2超聲波清洗儀。A.3.3紫外光燈：波長365nm。A.4試劑和耗材A.4.1甲醇。A.4.2甲苯。A.4.3甲酸乙酯。A.4.4丙酮。A.4.5甲酸。A.4.6聚酰胺薄膜。A.4.7對照品土大黃苷對照品英文名稱、CAS號、分子式和相對分子量見表A.1。表A.1化學(xué)對照品（標(biāo)準(zhǔn)品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量土大黃苷Rhaponticin155-58-8C21H24O9420.41A.5薄層色譜條件薄層板：聚酰胺薄膜；點(diǎn)樣量：對照品溶液和供試品溶液各5μL；展開劑：甲苯-甲酸乙酯-丙酮-甲醇-甲酸（3：5：5：20：0.1）；展開距離：6~8cm；A.6操作方法A.6.1對照品溶液的制備取土大黃苷對照品，加甲醇制成每1mL含10μg的溶液，搖勻，作為對照品溶液，備用。A.6.2供試品溶液的制備取供試品粉碎，取粉末約0.1g，加甲醇10mL，超聲處理20分鐘，濾過，取濾液1mL，加甲醇至10mL，作為供試品溶液，備用A.6.3供試品溶液的測定照薄層色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0502）試驗(yàn)，分別吸取供試品溶液和對照藥材溶液各5μL點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上（A.4.6），以甲苯-甲酸乙酯-丙酮-甲醇-甲酸（3：5：5：20：0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈（365nm）下檢視。A.7結(jié)果判別供試品色譜中，在與土大黃苷對照品色譜相應(yīng)的位置上，不得顯相同的亮藍(lán)色熒光斑點(diǎn)。附錄B（規(guī)范性附錄）標(biāo)志性成分游離檢驗(yàn)方法B.1一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純試劑和GB/T6682規(guī)定的三級水。實(shí)驗(yàn)中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。B.2方法提要本品經(jīng)甲醇加熱回流提取后，采用反相高效液相色譜法測定，以外標(biāo)法測定游離蒽醌的含量。游離蒽醌的含量以蘆薈大黃素（C15H10O5）、大黃酸（C15H8O6）、大黃素（C15H10O5）、大黃酚（C15H10O4）和大黃素甲醚的（C16H12O5）總量計(jì)算。B.3儀器B.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。B.3.2超聲波清洗儀。B.3.3高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。B.4試劑和耗材B.4.1甲醇。B.4.2甲醇：色譜純。B.4.3磷酸。B.4.4水。B.4.50.45μm微孔濾膜（有機(jī)相）。B.4.6對照品蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚對照品英文名稱、CAS號、分子式和相對分子量見表B.1。表B.1化學(xué)對照品（標(biāo)準(zhǔn)品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量蘆薈大黃素Aloe-emodin481-72-1C15H10O5270.24大黃酸Rhein478-43-3C15H8O6284.21大黃素Emodin518-82-1C15H10O5270.24大黃酚Chrysophanol481-74-3C15H10O4254.24大黃素甲醚Physcion521-61-9C16H12O5284.26B.5色譜條件及系統(tǒng)適用性B.5.1色譜條件色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸（85∶15,v/v），等度洗脫；檢測波長：254nm；進(jìn)樣量：10μL；流速：1mL/min。B.5.2系統(tǒng)適用性理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。B.6操作方法B.6.1對照品溶液的制備取蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃素對照品、大黃酚對照品和大黃素甲醚對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚各16μg，含大黃素甲醚8μg的溶液，搖勻，備用。B.6.2供試品溶液的制備取供試品粉碎，取粉末約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜（B.4.5）濾過，取續(xù)濾液，備用。B.6.3供試品溶液的測定照高效液相色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0512）試驗(yàn)，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，測定，按外標(biāo)法計(jì)算試樣中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量。B.7測定結(jié)果的計(jì)算B.7.1計(jì)算公式熟大黃中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，數(shù)值以%表示，按公式（B.1）計(jì)算：Wi=AW=Wi式中：Wi：供試品中各待測成分（蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；AXARCR：對照品溶液中各待測成分的濃度（mg/mL）m：供試品的稱樣量（g）；V：供試品溶液的稀釋體積（mL）。W：供試品中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的總質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）。B.7.2重復(fù)性每個(gè)試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測定，以算數(shù)平均值為測定結(jié)果，小數(shù)點(diǎn)后保留2位。在重復(fù)條件下兩次獨(dú)立測定的結(jié)果絕對差值不得超過算數(shù)平均值的10%。附錄C（規(guī)范性附錄）標(biāo)志性成分總蒽醌檢驗(yàn)方法C.1一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時(shí)，均指分析純試劑和GB/T6682規(guī)定的三級水。實(shí)驗(yàn)中所用的溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。C.2方法提要本品經(jīng)甲醇加熱回流提取后，采用反相高效液相色譜法測定，以外標(biāo)法測定總蒽醌含量?？傒祯恳蕴J薈大黃素（C15H10O5）、大黃酸（C15H8O6）、大黃素（C15H10O5）、大黃酚（C15H10O4）和大黃素甲醚（C16H12O5）的總量計(jì)。C.3儀器C.3.1分析天平：感量為0.01mg和0.0001g。C.3.2超聲波清洗儀。C.3.3高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。C.4試劑和耗材C.4.1甲醇。C.4.2甲醇：色譜純。C.4.3磷酸。C.4.4三氯甲烷。C.4.5鹽酸。C.4.6水。C.4.70.45μm微孔濾膜（有機(jī)相）。C.4.8對照品蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚對照品英文名稱、CAS號、分子式和相對分子量見表C.1。表C.1化學(xué)對照品（標(biāo)準(zhǔn)品）信息中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子量蘆薈大黃素Aloe-emodin481-72-1C15H10O5270.24大黃酸Rhein478-43-3C15H8O6284.21大黃素Emodin518-82-1C15H10O5270.24大黃酚Chrysophanol481-74-3C15H10O4254.24大黃素甲醚Physcion521-61-9C16H12O5284.26C.5色譜條件及系統(tǒng)適用性C.5.1色譜條件色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸（85∶15,v/v），等度洗脫；檢測波長：254nm；進(jìn)樣量：10μL；流速：1mL/min。C.5.2系統(tǒng)適用性理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。C.6操作方法C.6.1對照品溶液的制備取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚各16μg，含大黃素甲醚8μg的溶液，搖勻，備用。C.6.2供試品溶液的制備取供試品粉碎，取粉末約0.15g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密稱取續(xù)濾液5mL，置燒瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理2分鐘，再加三氯甲烷10mL，加熱回流1小時(shí)，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10mL，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，轉(zhuǎn)移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，經(jīng)0.45μm濾膜（C.4.7）濾過，取續(xù)濾液，備用。C.6.3供試品溶液的測定照高效液相色譜法（《中華人民共和國藥典》2020年版四部0512）試驗(yàn)，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，測定，按外標(biāo)法計(jì)算試樣中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的含量。C.7測定結(jié)果的計(jì)算C.7.1計(jì)算公式制大黃中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)，數(shù)值以%表示，按公式（C.1）和（C.2）計(jì)算：