附子理中丸中烏頭堿的檢查

實訓(xùn)十九附子理中丸中烏頭堿的檢查一、實訓(xùn)目的掌握中藥制劑中烏頭堿限量檢查的一般操作步驟和技能。理解烏頭堿限量檢查的原理。二、檢驗依據(jù)附子理中丸藥品標(biāo)準(zhǔn)［《中國藥典》2005年版（一部）正文部分484頁］【處方】附子（制）100g黨參200g白術(shù)（炒）150g干姜100g甘草100g【檢查】烏頭堿限量取本品水蜜丸適量，研碎，取25g,或取大蜜丸適量，剪碎，取36g，加氨試液4ml，拌勻，放置2小時，加乙醚60ml，振搖1小時，放置24小時，濾過，濾液蒸干，殘渣用無水乙醇溶解使成1ml，作為供試品溶液。取烏頭堿對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，精密吸取供試品溶液12ul、對照品溶液5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以苯-乙酸乙酯-二乙胺（14:4:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置上出現(xiàn)的斑點應(yīng)小于對照品的斑點，或不出現(xiàn)斑點。三、 檢驗原理本品處方五味藥中有附子，附子中含有多種生物堿，其中烏頭堿型生物堿中C、C的羥基分別與乙酸、苯甲酸成雙酯型（烏頭堿型）生物堿存在，如烏頭堿、14 8美沙烏頭堿等。這種雙酯型生物堿親酯性強，毒性大，因此附子需要經(jīng)過炮制加工降低其毒性。為保證用藥安全，《中國藥典》采用薄層色譜法對烏頭堿進行限量檢查。四、 儀器與試劑硅膠G薄層板、展開槽、微升毛細管或微量注射器、分析天平、水浴鍋、震蕩器、量瓶等。烏頭堿對照品（中國藥品生物制品檢定所）、附子理中丸、乙醚、無水乙醇、苯、乙酸乙酯、二乙胺、氨試液、稀碘化鉍鉀試液等。五、 實驗步驟和內(nèi)容1?供試品溶液制備取水蜜丸適量，研碎，取25g，加氨試液4ml，拌勻，放置2小時，加乙醚60ml，振搖1小時，放置24小時，濾過，濾液蒸干，殘渣用無水乙醇溶解使成1ml，作為供試品溶液。2.對照品溶液制備取烏頭堿對照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。3?點樣精密吸取供試品溶液12ul、對照品溶液5ul，分別點于同一硅膠G薄層板上。4?展開在層析槽中放置展開劑苯-乙酸乙酯-二乙胺(14:4:1)適量，預(yù)飽和20?30分鐘，放置已點樣的薄層板，展開8?15cm，取出，晾干。5.顯色向已晾干的薄層板上噴以稀碘化鉍鉀試液顯色，對比供試品色譜與對照品色譜相應(yīng)位置上出現(xiàn)的斑點大小?！静僮饕c】本品取樣25g，要遵循“隨機、均勻”的原則，應(yīng)從整批藥品中抽取一定數(shù)量的樣本，破碎、混合均勻后，再從中稱取試驗所需數(shù)量的樣品。供試品、烏頭堿對照品的稱取要用分析天平精密稱定。供試品溶液制備的過程中需要蒸干濾液，必須在通風(fēng)櫥中水浴加熱回流濃縮，回收乙醚，不能接觸明火。供試品溶液與對照品溶液的制備時，要用適當(dāng)容量的容量瓶定容。需使用市售薄層G板，用前需要在110°C，活化30分鐘。使供試品與對照品的點樣點大小一致或相近。展開時，需要預(yù)飽和20?30分鐘，并在層析缸口涂凡士林以密閉，以克服邊緣效應(yīng)。顯色劑噴灑時要均勻。六、檢驗結(jié)論根據(jù)試驗記錄和結(jié)果，填寫檢驗報告，對本品檢查做出結(jié)論。七、實訓(xùn)思考制備供試品溶液時，樣品中為什么先加氨試液攪拌放置？在薄層展開前，在層析缸口涂凡士林的目的是什么？3?通過比較供試品色譜與對照品色譜相應(yīng)位置上出現(xiàn)的斑點大小的依據(jù)是什么？八、實訓(xùn)測試附子理中丸中烏頭堿限量檢查實訓(xùn)測試表（百分計）填寫檢驗報告10檢品名稱廠家檢品規(guī)格批號送檢單位檢驗項目檢驗方法檢驗結(jié)論：檢驗人： 復(fù)核人： 檢驗單位蓋章年月曰回答問題制備供