儀器分析-紫外線

第二章

紫外—可見分光光度法2.1引言2.2紫外－可見吸收光譜2.3光吸收定律－Lambert-Beer定律2.4紫外－可見分光光度計2.5分析條件的選擇2.6UV-Vis光度法的應(yīng)用1精選ppt光譜分析法：利用物質(zhì)與光〔輻射能〕相互作用而建立起來的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法。作用粒子：原子光譜法分子光譜法和核磁共振波譜法吸收和發(fā)射光：吸收光譜和發(fā)射光譜光的能量：射線光譜法、x射線光譜法、紫外可見光譜法、紅外光譜法等分類2.1引言2精選ppt紫外可見分光光度法定義：〔又稱：紫外可見吸收光譜法〕是根據(jù)溶液中物質(zhì)的分子或離子對紫外——可見光譜區(qū)的輻射能的吸收來研究物質(zhì)的組成和結(jié)構(gòu)的方法。較高的靈敏度和準確度，檢出限可達10-7g/ml，相對誤差通常為1%～5%。該方法儀器設(shè)備簡單、操作方便、易于掌握和推廣，是常用分析方法之一。3精選ppt光是一種電磁波整個電磁波包括：無線電波微波紅外光可見光紫外光X射線

射線共同特點：橫向電磁波，在真空中的傳播速度等于光速，即4精選ppt

光具有波粒二象性，即波動性和粒子性。波動性：折射、衍射、偏振及干預等性質(zhì)。粒子性：具有動量，光電效應(yīng)。光的特性5精選ppt光子的能量與波長的關(guān)系〔反比〕能量J或eVPlanck常數(shù)6.626×10-34J·s頻率，Hz光速2.998×108m/s波長nm1eV=1.602×10-19J

＝96.55kJ/mol6精選ppt例：計算波長為200nm的光子的能量解：7精選ppt各種電磁波譜波長范圍：無線電波1～1000m微波10-3～1m紅外0.76～1000

m可見400～800nm紫外100～400nm近紫外200～400遠紫外100～200X射線0.01～10nm本章重點討論8精選ppt2.2紫外－可見吸收光譜一.吸收光譜的產(chǎn)生分子內(nèi)三種運動對應(yīng)三種能級：電子運動－電子能級(Electronenergylevel)原子之間的相對振動－振動能級(vibration)分子轉(zhuǎn)動－轉(zhuǎn)動能級(rotation)分子整體能級E=Ee+Ev+Er9精選ppt當有一頻率v,如果輻射能量hv恰好等于該分子較高能級與較低能級的能量差時，即有：

分子從基態(tài)能級躍遷到激發(fā)態(tài)能級10精選ppt基態(tài)激發(fā)態(tài)11精選ppt

ΔE電=1-20eVΔE轉(zhuǎn)=0.05-1eVΔE振=0.005-0.05eV在分子能級躍遷所產(chǎn)生的能量變化，電子躍遷能量變化最大，它對應(yīng)電磁輻射能量主要在區(qū)紫外—可見區(qū)。用紫外—可見光照射分子時，會發(fā)生電子能級的躍遷，對應(yīng)產(chǎn)生的光譜，稱為電子光譜，通常稱為紫外—可見吸收光譜。12精選ppt

電子能級躍遷伴隨分子振動和轉(zhuǎn)動能級的躍遷，因此得到光譜是帶狀光譜。UV-Vis是帶狀光譜？13精選ppt二、物質(zhì)的顏色與吸收光的關(guān)系

當一束白光通過棱鏡后就色散成紅、橙、黃、綠、青、藍、紫等顏色的光，它們具有不同的波長范圍。反之，這些不同顏色的光按一定的強度比混合后便又形成白光。14精選ppt將兩種適當顏色的光按一定的強度比例混合可形成白光，這兩種光稱為互補色光。白光紅650～750紫400～450藍450～480綠藍480～500綠500～560黃綠560～580黃580～600橙600～65015精選ppt物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色與吸收光顏色是互補色關(guān)系。假設(shè)物質(zhì)對白光中所有顏色的光全部吸收，它就呈現(xiàn)黑色。假設(shè)反射所有顏色的光那么呈現(xiàn)白色假設(shè)透過所以顏色的光，那么為無色。16精選ppt物質(zhì)不同顏色是對光的選擇性吸收不同物質(zhì)的分子組成和結(jié)構(gòu)不同，E不同，△E也不同。

M＋hνM*。由于△E＝hν，所以能級差決定只能吸收特定波長的光。人眼可以比作是定性分析可見光區(qū)分光光度計。17精選pptKMnO4溶液吸收525nm綠青色光(互補光的400nm附近的紫色光),所以KMnO4溶液呈紫紅色。例：18精選ppt溶液顏色的深淺，決定于溶液吸收光的量，即取決于吸光物質(zhì)濃度的上下。如CuSO4溶液的濃度愈高，對黃色光的吸收就愈多，表現(xiàn)為透過的藍色光愈強，溶液的藍色愈深。因此，人眼可以通過比較溶液顏色的深淺來確定溶液中吸光物質(zhì)的濃度大小。19精選ppt三、吸收光譜吸收光譜〔吸收曲線〕：不同波長的單色光依次照射溶液，并測量在每一波長處對光的吸收程度的大小〔吸光度〕，并以波長〔〕為橫坐標，吸光度〔A〕為縱坐標作圖，即可得一條吸光度隨波長變化的曲線，。它反映物質(zhì)對各種不同波長光的吸收情況。20精選ppt吸收峰谷肩峰末端吸收21精選ppt①同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應(yīng)的波長稱為最大吸收波長λmax②不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax那么不同。吸收曲線的討論：22精選ppt③吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一(分子內(nèi)部能級分布狀況)。

不同濃度的同一種物質(zhì)，在λmax處吸光度A的差異性可作為物質(zhì)定量分析的依據(jù)。

在λmax處吸光度隨濃度變化的幅度最大，所以測定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長的重要依據(jù)。23精選ppta.有機分子的軌道類型及躍遷類型四.有機化合物的吸收光譜24精選ppt能量成鍵成鍵未成鍵反鍵反鍵

n**→*→*n→*n→*1.→*躍遷鍵類型：飽和鍵。特點：1.所需能量高2.吸收波長短<200nm3.不易檢測例子：甲烷125nm，乙烷135nm成鍵作用越強，反鍵軌道能量越高。25精選ppt2.→*躍遷鍵類型：碳碳雙鍵、三鍵、共軛雙鍵等特點：吸收強度大單個飽和鍵吸收波長<200nm，如乙烯為165nm。共軛雙鍵吸收波長>200nm,如1，3-丁二烯210nm能量成鍵成鍵未成鍵反鍵反鍵

n**→*→*n→*n→*26精選ppt3.n→*躍遷

特點：1.n→*所需能量小

2.吸收波長長

3.吸收強度很小(10～100)鍵類型：連有雜原子〔N、S、P、O〕的不飽和鍵范圍：醛、酮等能量成鍵成鍵未成鍵反鍵反鍵

n**→*→*n→*n→*27精選ppt4.n→*躍遷鍵類型：含雜原子〔N、S、P、O〕飽和鍵一般雜原子電負性越大，n電子被束縛得越緊，躍遷所需的能量越大，吸收的波長越短，如CH3Cl為173nm，CH3Br為204nm，CH3I為258nm。ε不大，為100～300能量成鍵成鍵未成鍵反鍵反鍵

n**→*→*n→*n→*特點：n→*所需能量在200nm接近。28精選ppt小結(jié)：→*飽和鍵所需能量最大<200nm遠紫外區(qū)紫外—可見分光光度法溶劑，例己烷、環(huán)己烷等→*C=C或共軛雙鍵所需能量適中單雙鍵<200nm共軛雙鍵>200nm共軛雙鍵常為紫外－可見分光光度法研究對象，躍遷強度大，ε>1×104n→*C=X(X=O/N/S/P)所需能量最小>200nm近紫外區(qū)紫外－可見研究對象，躍遷強度小，ε<100.n→*C-X(X=O/N/S/P)所需能量適中200nm附近雜原子電負性越大，λmax越小。29精選pptb.幾個常用術(shù)語生色團〔發(fā)色團〕：能吸收外來輻射并引起n→*和→*躍遷結(jié)構(gòu)單元。例-C=C-、-C=O、-N=N-、-N=O等30精選ppt助色團：一種能使生色團的吸收峰向長波方向位移并增強其吸收強度的官能團如—NH2、—OH、—NR2、—OR、—SH、—SR、—Cl、—Br等這些基團中的n電子能與生色團中的π電子相互作用(可能產(chǎn)生n—π共軛)，使π—π*躍遷能量降低，躍遷幾率變大。31精選ppt紅移：使化合物的吸收波長向長波方向移動效應(yīng)。影響紅移因素：1、引入助色團引入n—π共軛，使分子整體共軛效應(yīng)增強?！?躍遷吸收峰發(fā)生紅移。飽和脂肪酸與醛相比，吸收峰發(fā)生紅移32精選ppt化合物H(CH=CH)nH溶劑

max/nmn=1乙烯蒸汽162n=21,3-丁二烯正己烷217n=31,3,5-己三烯正己烷258n=41,3,5,7-辛四烯環(huán)己烷3042〕共軛作用不共軛雙鍵不發(fā)生紅移。C=O雙鍵同C=C雙鍵的共軛作用使n→*和→*躍遷的吸收峰都發(fā)生紅移。33精選ppt3〕溶劑效應(yīng)極性溶劑使π-π*躍遷發(fā)生紅移。4〕pH值pH增大，苯酚π-π*吸收帶發(fā)生紅移。由于n—π共軛參與，使分子整體共軛效應(yīng)增強。Note:測UV-Vis應(yīng)注明溶劑34精選ppt5)取代基苯環(huán)或烯烴〔吸電子基〕上的H被各種取代基取代，多發(fā)生紅移。6〕空間異構(gòu)35精選ppt藍移〔紫移〕：使化合物的吸收波長向短波方向移動效應(yīng)。影響藍移因素：1〕溶劑效應(yīng)極性溶劑使n-π*躍遷發(fā)生藍移2〕pH值pH值減小，苯胺的π-π*吸收帶藍移n—π共軛參與少，使分子整體π共軛效應(yīng)減少。36精選ppt增強效應(yīng)：吸收強度增強的現(xiàn)象；減弱效應(yīng)：吸收強度減弱的現(xiàn)象。37精選pptc．各類有機化合物的紫外吸收光譜①飽和化合物：σ→σ＊躍遷，λmax一般在150nm；當含有n電子的原子取代時產(chǎn)生n→σ＊躍遷，可使λmax增大，到達近紫外區(qū)(200~270nm)。②烯烴：有雙鍵，產(chǎn)生π→π＊躍遷，λmax約在180nm；共軛體系中的π→π＊躍遷，對應(yīng)K帶吸收，ε大；π→π＊躍遷的λmax隨共軛增長，移向長波方向，當有五個雙鍵時，λmax到達可見光區(qū)。38精選ppt

③醛酮：有＞C＝O基因，產(chǎn)生n→π＊；n→σ＊；π→π＊三種躍遷。n→π＊躍遷吸收帶對應(yīng)R帶，其ε小，λmax位于較長波方向(300nm左右)。α,β-不飽和醛酮會使n→π＊與π→π＊發(fā)生紅移。④芳香族：芳環(huán)共軛躍遷，由π→π＊躍遷產(chǎn)生，有三個吸收帶，E1、E2和B帶特征。隨共軛增長吸收帶紅移。39精選ppt化合物溶劑

max苯2%甲醇256甲苯262氯苯264碘苯258苯酚271酚鹽離子286某些苯衍生物的特征吸收〔~256)苯三個吸收帶E1(184nm)、E2(204nm)、B(256nm),B帶是苯及苯衍生物的特征吸收，其強度不變〔250〕,但其精細結(jié)構(gòu)在極性溶劑中消失。40精選ppt〔三〕無機化合物的吸收光譜1.d—d躍遷和f－f躍遷過渡金屬離子未充滿的d軌道，由于受配位場〔或晶體場〕的影響而發(fā)生分裂，當吸收光時可發(fā)生d—d躍遷，吸收波長取決于分裂能的大小，L越強，分裂能越大，吸收波長越短。41精選pptH2O的配位場小于NH3特點：吸收強度小。M(H2O)6M+(Cr3+、Co2+)型水合離子分別為藍色和桃紅色。42精選ppt2.電荷遷移躍遷在金屬配合物中，配體和金屬之間發(fā)生躍遷，一般是L→M，吸收波長取決于L給電子和M接受電子能力。SCN-比Cl-易給電子，F(xiàn)eSCN2+，吸收波長長，在可見區(qū)，F(xiàn)eCl2+在紫外區(qū)。43精選ppt特點：靈敏度高，實際工作中常用。常將M與某L〔顯色劑〕生成具有電荷遷移的配合物，然后進行含量測定。3.

－*躍遷配體具有雙鍵的金屬絡(luò)合物44精選ppt2.3光的吸收定律一、郎伯-比爾〔Lambert-Beer〕定律入射光強度吸光強度反光強度透光強度＋IS散射光強度均勻溶液，散射光小，可忽略45精選ppt參比溶液：1.材料和厚度根本相同，抵消池的反射光〔10％〕2.調(diào)節(jié)儀器零點吸收?！睺為透光度〕IaI0參比46精選ppt溶液對光透光度：1.與b、c及入射光λ(與a有關(guān)〕等因素有關(guān)。2.a的大小反映測量的靈敏度。3.如果保持λ不變，那么只與b〔非平行光〕、c有關(guān)。溶液濃度液層厚度透光度〔Transmittance)t47精選ppt吸光度（absorbance）吸光系數(shù)液層厚度溶液濃度48精選ppt當a、c一定時，A∝bLambert’slaw當a、b一定時，A∝cBeer’slawLambert-Beer定律可表述為：在一定條件下，物質(zhì)的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比，稱為光吸收定律，是吸收光譜定量的依據(jù)。49精選pptLambert-Beer定律是均勻、非散射介質(zhì)對光吸收的根本定律，只有對入射光是單色光才完全適用。Lambert-Beer定律適應(yīng)范圍：50精選ppt二、吸光系數(shù)absorptivity當濃度以g/l表示時，k為吸收系數(shù)，用a表示,單位為L?cm-1?g-1，那么當濃度以mol/l表示時，k為摩爾吸收系數(shù)，用ε表示,單位為L?cm-1?mol-1，那么A=lg(I0/It)=kbcA=lg(I0/It)=abcA=lg(I0/It)=εbca與ε關(guān)系：a=ε/M(M為摩爾質(zhì)量〕51精選ppt

與物質(zhì)的本性、溶劑和入射光的波長有關(guān)，即〔1〕物質(zhì)不同，不同，是物質(zhì)在一定條件下的特性常數(shù)?！?〕溶劑不同，同一物質(zhì)的不同，所以應(yīng)注明溶劑?！?〕不同，同一物質(zhì)的吸收系數(shù)也不同，所以吸收系數(shù)應(yīng)注明波長；52精選ppt〔4〕可作為定性鑒定的參數(shù)〔區(qū)分π→π＊及n→π＊〕〔5〕ε在數(shù)值上等于濃度為1mol/l,液層厚度為1cm時，溶液的吸光度?！?〕εmax越大說明該物質(zhì)吸光能力越強，用光度法測定該物質(zhì)靈敏度越高。ε>105超高靈敏；〔6－10〕×104高靈敏；<2×104不靈敏。53精選ppt三、偏離比耳定律的原因

1.L-B本身局限性(濃度過大不適合)當c>0.01mol·L-1,分子或離子間平均距離縮小，其電子云或電荷分布相互影響，分子軌道能級之差發(fā)生變化，從而改變最大吸收波長光的吸收能力。消除措施：濃度控制在上限以下。正偏離負偏離54精選ppta．非單色光當E1=E2時，A=E1CLA～C有線性關(guān)系。設(shè)

1是需要的光：當E1＞E2時，測得的A值低，負誤差；反之，產(chǎn)生正誤差。且E1與E2越接近，誤差越小單色光越純越好；一般使用靈敏度最大的吸收波長作為測定波長。當E1≠E2時A～C非線性，偏離比爾定律。2.儀器因素〔光學因素〕55精選pptb．雜散光儀器中常含有與所需波長相差較大的光，一般樣品不吸收，所以不干擾測定。c．散射光和反射光渾濁溶液產(chǎn)生散射和反射，不能用空白消除影響(被認為成吸光〕，I變小，但I0不變。A變大，正誤差。d.非平行光通過吸收池的非平行光影響光程L，不同儀器測定A值不同的主要原因。56精選ppta.吸光物質(zhì)在溶液中發(fā)生化學變化引起的偏離

由于吸光物質(zhì)變成了不同的存在形式

消除措施：控制適當?shù)娘@色條件。如酸度控制。

b.配合物不穩(wěn)定也會引起的偏離有些顯色配合物不穩(wěn)定,發(fā)生解離〔越稀〕。消除措施：試液濃縮富集。3.化學因素57精選ppt

2.4紫外—可見分光光度計紫外－可見分光光度計由上五局部組成?！飳庠吹囊笞銐蚬鈴姟⒎€(wěn)定、連續(xù)輻射且強度隨波長變化小1.鎢燈和碘鎢燈：340～2500nm，多用在可見光區(qū)。2.氫燈和氘燈:160～375nm，用于紫外光區(qū)。

58精選ppt★單色器

單色器的用途就是把混合光變成單色光，由入射狹縫、準直鏡、色散元件、聚焦元件和出口狹縫組成。常用的色散元件有棱鏡和光柵。棱鏡不同波長的光具有不同的折射率光柵光的衍射和干預。其特點是：色散波長范圍寬，分辨率高，色散率根本上不隨波長改變而改變?，F(xiàn)代儀器多用光柵作色柵元件。59精選ppt★吸收池absorptioncell比色皿cuvette玻璃吸收池：用于可見光區(qū)石英吸收池：用于紫外區(qū)1〕盛放參比的吸收池和盛放樣品的吸收池應(yīng)匹配，即有相同的厚度與透光性。2〕吸收池的光學面應(yīng)垂直于光束方向。比色池0.1、1.0、1.5、2.0cm微量池0.5mL流動池5－11uL60精選ppt★檢測器將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘栠M行檢測。光電池〔硒光電池〕、光電管和光電倍增管★信號處理與顯示裝置放大信號并以適當?shù)姆绞街甘净蛴涗?。檢流計、數(shù)字顯示及微機〔控制及數(shù)據(jù)的采集和處理〕。61精選ppt1.單波長分光光度計

a.單光束0.575光源單色器吸收池檢測器顯示優(yōu)點：結(jié)構(gòu)簡單，操作方便；缺點：光源不穩(wěn)定。721、751、724、英國SP500型以及BackmanDU－8型62精選ppt差值ΔA光源單色器吸收池檢測器顯示光束分裂器b.雙光束特點：消除光源強度變化所引起的誤差國產(chǎn)710型、730型、740型都屬于這類型。

63精選pptS為背景吸收切光器吸收池光源檢測器單色器單色器2.雙波長分光度計特點：可測多組份試樣、混濁試樣、而且可作成導數(shù)光譜、不需參比液、克服了電源不穩(wěn)而產(chǎn)生的誤差，靈敏度高。

國產(chǎn)WFZ800-5型、島津UV-260型、UV-265型64精選ppt

分光光度計校正儀器使用過一段時間后波長和吸光度出現(xiàn)漂移，要進行校正。

波長校正鐠玻璃或鈥玻璃都有假設(shè)干特征的吸收峰，可用來校正分光光度計的波長標尺，前者用于可見光區(qū)，后者那么對紫外和可見光區(qū)都適用。

吸光度校正可用K2CrO4標準溶液來校正吸光度標度。將0.0400gK2CrO4溶解于1L的0.05mol·L－1KOH溶液中，在1cm光程的吸收池中，在25℃時用不同波長測得的吸光度值〔有表可對〕。65精選ppt2.5分析條件選擇一.儀器測量條件選擇測量波長的選擇

a.選擇最強吸收帶的最大吸收波長λmaxb.如果λmax處有干擾，應(yīng)選擇靈敏度稍低但能防止干擾的入射光波長。66精選ppt2.吸光度范圍選擇最正確吸光度范圍0.2～0.7(T％為65～20％)(，67精選ppt二、反響條件選擇1.顯色劑選擇原那么顯色劑與待測離子生成配合物組成恒定、穩(wěn)定性好、吸收能力強，即ε大、顯色劑與配合物的吸收波長有明顯的差異，一般要求Δε＞60nm。2.顯色劑用量形成逐級配合物時，顯色劑的用量關(guān)系較大，一般就需過量較多或必須嚴格控制用量。3.溶液酸度〔配位數(shù)和水解等與pH相關(guān)〕。4.顯色時間、溫度、放置時間68精選ppt參比溶液的選擇why使用參比溶液只有使用參比溶液，才能真正反映待測溶液的吸光度值。1.溶劑參比當組成簡單，共存組分很少，顯色劑沒有吸收時，可消除溶劑、吸收池等因素的影響。2.試劑參比

如果顯色劑或其他試劑在測定波長有吸收，按顯色反響同的條件，只是不參加試樣溶液。消除顯色劑的吸收影響。69精選ppt3.試樣參比

如果試樣基體〔除被測組分外的其它共存組分〕在測定波長處有吸收，而與顯色劑不起顯色反響時可按與顯色反響相同的條件處理試樣，只是不加顯色劑，作為參比溶液。這種參比溶液適用于試樣中有較多的共存組分，參加的顯色劑量不大，且顯色劑在測定波長無吸收的情況。

4.平行操作溶液參比

用不含被測組分的試樣，在相同條件下與被測試樣同樣進行處理，由此得到平行操作參比溶液干擾及消除方法。70精選ppt小結(jié)：參比溶液選擇原那么：但凡有色的溶劑或顯色劑或基底液，應(yīng)盡量消除對測定配合物的吸收影響。當作為參比溶液時，可扣除這種影響。如果仍有干擾，那么可采取以下方式：71精選ppt

1.控制酸度例雙硫腙能與Hg2+、Pb2+、Cu2+、Ni2+、Cd2+等形成有色配合物，其中與Hg2+生成的配合物最穩(wěn)定，而上述其他離子在此條件下不發(fā)生反響。2.選擇適當?shù)难诒蝿?.選擇適當?shù)臏y量波長4.干擾物別離5.導數(shù)光譜及雙波長技術(shù)

72精選ppt2.6UV-Vis分光光度法應(yīng)用一、定性分析二、純度分析三、結(jié)構(gòu)分析四、定量分析73精選ppt作用：鑒定物質(zhì)做法：與或標準物的UV-Vis進行比較原那么：比照吸收光譜的特征〔形狀和max〕一、定性分析1．比照吸收光譜特征數(shù)據(jù)max，min，ε等

2.比照吸收光譜的形狀一致性

74精選ppt比較未知物與標準物的吸收光譜曲線75精選ppt[1]SadtlerStandarSpectra(Ultraviolet),Heyden,London,1978.(46000種化合物)。

[2]R.A.FriedelandM.Orchin,“UltravioletandVisibleAbsorptionSpectraofAromaticComp-ounds〞,Wiley,NewYork,1951.(597種芳香化合物)。

[3]KenzoHirayama：“HandbookofUltravioletandVisibleAbsorptionSpectraofOrganicCompounds.〞,NewYork,Plenum,1967。

[4]“OrganicElectronicSpectralData〞，JohnWileyandSons，1946～〔目前還在繼續(xù)編寫〕。與標準譜圖比較〔以下四種〕76精選ppt二、純度分析：1.當化合物在紫外光譜區(qū)的某一波長范圍內(nèi)無吸收，而雜志有強的吸收時，那么可用于測定該化合物中的雜質(zhì)。例如乙醇中微量苯的鑒定。2.如果在某一紫外光譜區(qū)，化合物有強吸收而雜志無吸收，也可以用摩爾吸光系數(shù)檢查它的純度。例如標準菲的氯仿溶液在296nm處有強吸收，測得摩爾吸光系數(shù)比精制的菲在相同波長處低10％，說明菲樣品的實際含量只有90％77精選ppt三、結(jié)構(gòu)分析可以鑒定化合物中的共軛結(jié)構(gòu)和芳香環(huán)結(jié)構(gòu)〔無這些結(jié)構(gòu)，那么近紫外區(qū)內(nèi)無吸收〕。經(jīng)驗規(guī)那么：伍德沃德〔Woodward〕規(guī)那么適用：計算二烯烴或多烯烴的最大吸收位置斯科特〔Scott〕規(guī)那么適用：計算不飽和羰基化合物的－*最大吸收位置78精選ppt母體類型λ/nm

基數(shù)214同環(huán)的二烯烴基數(shù)253

（注意：當兩種情形同時存在時，選擇波長較長的為其母體）增加一個共軛雙鍵30環(huán)外雙鍵5每個烷基取代基5―O―乙?；?―O―R6―S―R30―Cl，―Br5―NR260

〔Woodward〕規(guī)那么79精選ppt母體〔同環(huán)二烯〕253取代烷基〔5個〕25環(huán)外雙鍵〔3個〕15延伸雙鍵30323nm

例子：(實測320nm〕80精選pptα，β－不飽和羰基化合物母體215每增加一個共軛雙鍵30同環(huán)二烯化合物39環(huán)外雙鍵5αβγ

每個烷基101218

－OH353050－OAc666

－Cl1512

－Br2530－NR295母體215延伸雙鍵30取代烷基〔3個〕54299〔實測296〕〔Scott〕規(guī)那么81精選ppt四、定量分析〔一〕單組分定量1.標準曲線法82精選pptAcAxcx標準曲線83精選ppt2.標準比較法該法是標準曲線法的簡化，即只配制一個濃度為cs的標準溶液，并測量其吸光度，求出吸收系數(shù)k，然后求出cx該法只有在測定濃度范圍內(nèi)遵守L-B定律，且cx與cs大致相當時，才可得到準確結(jié)果。84精選ppt〔二〕多組分定量方法(a)當各組分的吸收光譜不重疊，如單組分測定其濃度。(b)、〔c)中A、B互相干擾，根據(jù)吸光度加和性，解方程組?？煞謩e用濃度A、B純液求出85精選ppt2.雙波長法—等吸收點法雙波長輸出信號為ΔA輸出訊號ΔA與干擾組分A無關(guān)，它只正比于待測組分B的濃度，即消除了A的干擾.

吸收光譜重疊較為嚴重

86精選ppt3.系數(shù)倍率法當干擾組分A是陡坡狀，不存在兩個波長處等吸收點。

利用雙波長分光光度計中差分函數(shù)放大器，把分別(雙波長分光光度計〕放大k1、k2倍，那么兩波長處的信號差為S,、調(diào)節(jié)放大器，