高三一輪復(fù)習(xí)2012-專題5-DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)-專題6-植物有效成分的提取課件(高三復(fù)習(xí))

判斷以下說(shuō)法是否正確：1．(2011·江蘇卷，19·C)將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，參加二苯胺試劑即呈藍(lán)色()2．(2011·廣東理綜卷，5·A)洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂()3．DNA溶解度隨NaCl溶液濃度的下降而下降()4．玫瑰精油可用蒸餾法和壓榨法來(lái)提取()×√××一、DNA的粗提取與鑒定1．提取原理DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中 不同，在濃度為 時(shí)DNA的溶解度最小；此外DNA不溶于 ，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)那么可溶于酒精。2．DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇 會(huì)被染成藍(lán)色。溶解度0.14mol/L酒精二苯胺二、RCR技術(shù)1．PCR原理：在一定的緩沖溶液中提供 ，分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物，四種脫氧核苷酸，耐熱的 ，同時(shí)控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。2．PCR的反響過(guò)程(1)變性：90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解旋為 。(2)復(fù)性：溫度下降到 左右，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。(3)延伸：溫度上升到 左右，溶液中四種脫氧核苷酸在 的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么合成新的DNA鏈。DNA模塊DNA聚合酶55℃72℃DNA聚合酶單鏈1.PCR擴(kuò)增需要解旋酶嗎？需要哪種酶？提示：不需要解旋酶，是通過(guò)水浴加熱90℃，使雙鏈DNA解旋；需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶。三、血紅蛋白的提取和別離1．凝膠色譜法：也稱 ，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小別離蛋白質(zhì)的有效方法。2．電泳(1)概念：電泳是指 在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。(2)特點(diǎn)：電泳利用待別離樣品中各種分子的差異以及分子本身的大小、的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的別離。分配色譜法帶電粒子帶電性質(zhì)形狀2.用豬與雞的血液提取血紅蛋白哪個(gè)效果好？提示：用豬的血液；因?yàn)樨i的紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。四、植物芳香油的提取1．玫瑰精油的提取(1)原理：利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會(huì)重新分出油層和水層。(2)方法：

。(3)實(shí)驗(yàn)流程：鮮玫瑰花＋清水→水蒸氣蒸餾→油水混合物蒸餾法2．橘皮精油的提取(1)原理：利用

榨出芳香油等。(2)實(shí)驗(yàn)流程：

→漂洗→壓榨→過(guò)濾→靜置→

→橘皮油。壓榨法石灰水浸泡再次過(guò)濾五、胡蘿卜素的提取1．胡蘿卜素性質(zhì)：不溶于

，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。2．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(1)原理：

法。(2)實(shí)驗(yàn)流程：胡蘿卜→粉碎→

→

→

→濃縮→胡蘿卜素。3．鑒定方法：

法。水枯燥萃取過(guò)濾紙層析萃取3.胡蘿卜素的最主要成分是什么？它有什么用途？提示：胡蘿卜素中β－胡蘿卜素是最主要的成分，可以用來(lái)：①治療因缺乏維生素A而引起的疾??；②優(yōu)質(zhì)食用色素、飼料、飲料、食品的添加劑；③抗癌、治癌。1．PCR反響過(guò)程(1)變性：當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，如以下圖：(2)復(fù)性：系統(tǒng)溫度下降至50℃左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合，如以下圖：(3)延伸：當(dāng)溫度上升至72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么合成新的DNA鏈，如以下圖：2．結(jié)果(1)PCR一般要經(jīng)歷三十屢次循環(huán)，每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。(2)兩個(gè)引物之間的固定長(zhǎng)度的DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。1．PCR利用了DNA熱變性的原理，PCR儀實(shí)際上也是一種能自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制〞的以下說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A．酶促反響需要高的溫度，是為了確保模板的單鏈B．延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度，而小于變性溫度C．DNA聚合酶不能熱變性，要用耐高溫的聚合酶D．DNA解旋酶不能熱變性，為了確保模板是單鏈解析：PCR是一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶，靠高溫使其變性，雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開(kāi)；復(fù)性前，在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么合成新的DNA，因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度，小于變性溫度。答案：D1．DNA的粗提取與血紅蛋白的提取的比較提取物質(zhì)DNA血紅蛋白提取方法鹽析法凝膠色譜法、電泳法提取原理①DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同②DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)則溶于酒精①根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小②各種分子帶電性質(zhì)的差異步驟①溶解在2mol/L的NaCl溶液中②加水稀釋至0.14moI/LNaCl溶液使DNA析出過(guò)濾③加入冷卻酒精析出①樣品處理②粗提?、奂兓芗兌辱b定2.DNA的鑒定加入物質(zhì)結(jié)果圖示實(shí)驗(yàn)組均加入：①4mL二苯胺試劑②2mol/LNaCl溶液5mL絲狀物(DNA)溶液逐漸變藍(lán)對(duì)照組不變藍(lán)2．以下關(guān)于DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)驗(yàn)，表達(dá)正確的選項(xiàng)是()A．前者選擇雞血細(xì)胞作為材料較好，后者選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料較好B．樣品預(yù)處理時(shí)，前者靜置1天處理除去上清液；后者需要參加清水，反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌，至上清液無(wú)黃色C．在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，往2mol/L氯化鈉溶液中參加蒸餾水析出DNA時(shí)，應(yīng)該緩慢參加，直到出現(xiàn)黏稠物為止D．洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽等答案：A1．幾種物質(zhì)的提取方法、原理及步驟提取物質(zhì)提取方法提取原理步驟玫瑰精油水蒸氣蒸餾法利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái)①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水、過(guò)濾橘皮精油壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過(guò)濾、靜置③再次過(guò)濾胡蘿卜素萃取法使提取物溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)后得到提取物①粉碎、干燥②萃取、過(guò)濾③濃縮2.不同物質(zhì)的提取別離方法提取方法方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾、分離油層、除水過(guò)濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法石灰水浸泡、漂洗、壓榨、過(guò)濾、靜置、再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取粉碎、干燥、萃取、過(guò)濾、濃縮適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中3．在植物有效成分的提取過(guò)程中，常用萃取法、蒸餾法和壓榨法，以下關(guān)于這三種方法表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A．蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解下來(lái)，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油B．壓榨法的實(shí)驗(yàn)原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油C．萃取法的實(shí)驗(yàn)原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油D．蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油解析：蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)，適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油。壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油，適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取。萃取法使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油，它的適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中。答案：ADNA的粗提取、血紅蛋白的提取與別離(2011·江蘇卷)在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定〞的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)表達(dá)正確的選項(xiàng)是()A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L，濾去析出物B．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或參加木瓜蛋白酶，都可以去除局部雜質(zhì)C．將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，參加二苯胺試劑即呈藍(lán)色D．用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同解析：用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L時(shí)，濾取析出物；將絲狀物溶解在0.015mol/L的NaCl中，參加二苯胺試劑，需沸水浴加熱幾分鐘，才呈藍(lán)色；用菜花替代雞血為實(shí)驗(yàn)材料，需要對(duì)材料的細(xì)胞壁進(jìn)行處理。調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度改變不同物質(zhì)在其中的溶解度，或參加木瓜蛋白酶分解蛋白質(zhì)都可以去除局部雜質(zhì)，故B正確。答案：B1.(2012·河南長(zhǎng)葛模擬)以下關(guān)于血紅蛋白提取和別離的過(guò)程及原理表達(dá)正確的選項(xiàng)是()A．紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中要參加5倍體積的蒸餾水，重復(fù)洗滌3次B．將血紅蛋白溶液放在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液中透析12小時(shí)C．凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻，不能有氣泡存在D．蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的移動(dòng)速度慢解析：紅細(xì)胞洗滌過(guò)程中要參加5倍體積的生理鹽水，重復(fù)洗滌3次目的是除去雜蛋白。透析時(shí)使用物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液，而不是用0.9%的NaCl溶液。蛋白質(zhì)通過(guò)凝膠時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的在凝膠外部移動(dòng)，移動(dòng)速度快。在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在，氣泡會(huì)攪亂洗脫中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低別離效果。答案：C植物有效成分的三大提取方法蒸餾：適用于提取揮發(fā)性強(qiáng)的成分。壓榨：適用于從易焦糊的原料中提取有效成分。萃?。阂笤项w粒盡可能小，易溶于提取液。在植物有效成分的提取過(guò)程中，常用萃取法、蒸餾法和壓榨法，以下關(guān)于這三種方法表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是()A．蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水將芳香油溶解下來(lái)，再把水蒸發(fā)掉，剩余的就是芳香油B．壓榨法的實(shí)驗(yàn)原理是通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油C．萃取法的實(shí)驗(yàn)原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油D．蒸餾法適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油解析：蒸餾法是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)，適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油。壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油，適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取。萃取法使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑后就可獲得芳香油，它的適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中。答案：A2.提取胡蘿卜素和玫瑰精油時(shí)都需要加熱，但是用萃取法提取胡蘿卜素時(shí)，采用水浴加熱法；而用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰精油時(shí)，可以用直接加熱法，其原因是()A．前者需要保持恒溫，后者不需要恒溫B．前者容易蒸發(fā)，后者不容易蒸發(fā)C．胡蘿卜素不耐高溫，玫瑰精油耐高溫D．前者燒瓶里含有機(jī)溶劑，易燃易爆，后者是水答案：D1．關(guān)于DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的有關(guān)說(shuō)法正確的選項(xiàng)是()A．充分溶解DNA的鹽溶液是0.14mol/L的NaCl溶液B．實(shí)驗(yàn)中提取較純潔的DNA利用了DNA不溶于酒精的特點(diǎn)C．對(duì)最后提取出的DNA用二苯胺試劑鑒定時(shí)不需要加熱D．實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中先后兩次參加蒸餾水的作用相同解析：充分溶解DNA的鹽溶液是2mol/L的NaCl溶液；在加熱的條件下，才能用二苯胺試劑鑒定DNA；實(shí)驗(yàn)中第一次使用蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破，第二次使用蒸餾水的目的是稀釋NaCl溶液。答案：B2．(2011·廣東理綜卷)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的選項(xiàng)是()A．洗滌紅細(xì)胞時(shí)，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B．豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少C．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法別離過(guò)程的監(jiān)測(cè)D．在凝膠色譜法別離過(guò)程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動(dòng)慢解析：豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時(shí)雜蛋白較少，是提純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步：紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、別離血紅蛋白溶液、透析，其中洗滌紅細(xì)胞時(shí)，要用生理鹽水反復(fù)洗滌，既要將紅細(xì)胞洗滌干凈，又要不破壞紅細(xì)胞，然后再用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂，釋放出血紅蛋白。別離提純血紅蛋白時(shí)用凝膠色譜法，是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小來(lái)別離蛋白質(zhì)，相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)移動(dòng)速度較快；血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動(dòng)情況，并據(jù)此判斷別離效果。答案：D3．(2011·山東理綜卷)研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白質(zhì))均有抑菌作用，兩者的提取及應(yīng)用如下圖；(1)柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)________除去其中的固體雜質(zhì)。(2)篩選乳酸菌A時(shí)可選用平板劃線法或________________接種。對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_____________________________________________________。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行________處理。(3)培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長(zhǎng)提供________。電泳法純化乳酸菌素時(shí)，假設(shè)別離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，那么其分子量越大，電泳速度________。(4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈?？赏ㄟ^(guò)測(cè)定透明圈的________來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。解析：(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。柚皮易焦糊，宜采用壓榨法提取柚皮精油。壓榨過(guò)程中得到的糊狀液體需用過(guò)濾法除去其中固定雜質(zhì)。(2)篩選、純化培養(yǎng)某一特定微生物時(shí)，常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。為防止雜菌的污染，需對(duì)器具培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒滅菌處理，培養(yǎng)基宜采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行高溫滅菌處理，而超凈工作臺(tái)常使用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒處理。(3)微生物培養(yǎng)過(guò)程中為微生物的生長(zhǎng)提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮豐富的物質(zhì)。電泳法純化特定生物成分，是利用了待別離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，這些不同使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中不同分子的別離。當(dāng)待別離分子所帶電荷相同時(shí)，分子量越大，電泳速度越慢。(4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí)，在長(zhǎng)滿致病菌的平板上，會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。答案：(1)壓榨過(guò)濾(2)稀釋涂布平板法(或：稀釋混合平板法)高壓蒸汽