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第47講

動(dòng)物細(xì)胞工程考點(diǎn)要求考題統(tǒng)計(jì)考情分析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2023,湖南、遼寧,選擇2023,湖南,填空2022,福建、遼寧江蘇、湖北,選擇本專題知識(shí)難度較高,要求基礎(chǔ)要扎實(shí)??疾閷W(xué)生對(duì)相關(guān)動(dòng)物細(xì)胞工程的整體性的認(rèn)識(shí),或結(jié)合一些情景信息或表格信息設(shè)置題目,考查學(xué)生的應(yīng)變能力、獲取信息和綜合分析能力。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體2023,北京,選擇2022,福建、浙江,填空2022,江蘇、山東,填空動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物2021,江蘇、浙江,選擇2021,湖南,填空1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件血清培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具7.2~7.4維持培養(yǎng)液的pH血清、血漿可補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需的未知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無菌、無毒的環(huán)境:即對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行

(填“滅菌”“消毒”)處理,培養(yǎng)過程加一定量的______殺菌,但要注意選擇抗生素的

;此外還應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,清除代謝產(chǎn)物,這樣做的目的是

??股販缇乐辜?xì)胞代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害種類和劑量通常采用

,將其置于含

的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶95%的空氣和5%CO2考點(diǎn)一.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)③使用胰蛋白酶分散細(xì)胞說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是

。用胰蛋白酶處理

(會(huì)/不會(huì))把所培養(yǎng)的細(xì)胞消化掉?原因是

;故必須控制好胰蛋白酶的

。2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程胰蛋白膠原蛋白單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代懸浮貼壁分裂受阻或停止傳代培養(yǎng)①在培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素,從培養(yǎng)基功能的角度分類屬于

培養(yǎng)基,用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中沒有加入凝固劑(如瓊脂),從物理性質(zhì)分類屬于

培養(yǎng)基,從化學(xué)成分分類屬于

培養(yǎng)基選擇液體合成②選材:

;原因是

。動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官細(xì)胞分化程度低,分裂能力強(qiáng),容易培養(yǎng)蛋白質(zhì)會(huì)蛋白質(zhì)是細(xì)胞膜的主要成分之一用量和處理時(shí)間④培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞的目的是:

。

利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收及便于代謝廢物排出,利于細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖.⑤細(xì)胞貼壁和接觸抑制A.細(xì)胞貼壁是指體外培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在瓶壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象;接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。B.細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)對(duì)培養(yǎng)瓶的要求:培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。C.打破接觸抑制現(xiàn)象的方法是將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖?!军c(diǎn)撥】將癌細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)

(會(huì)/不會(huì))出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象.

不會(huì)2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程⑥原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)辨析:A.含義不同:?動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為

。?當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到貼滿瓶壁時(shí)用胰蛋白酶等處理,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)的過程稱為

。B.細(xì)胞增殖特點(diǎn)不同:?原代培養(yǎng):細(xì)胞分裂旺盛。?傳代培養(yǎng):正常細(xì)胞的傳代培養(yǎng)的次數(shù)一般是有限的,一般傳至10代后就不易傳下去,一般來說細(xì)胞在傳至10-50代左右,增殖會(huì)逐漸緩慢,甚至停止。但有些細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限,獲得

。目前使用的(如用于核移植的供體細(xì)胞)或冷凍保存的正常細(xì)胞通常選用傳代

代以內(nèi)的細(xì)胞,這樣做的目的是

。原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)不死性細(xì)胞10保持細(xì)胞正常的二倍體核型2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)理論基礎(chǔ)__________________________培養(yǎng)前處理無菌;用機(jī)械的方法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理,使組織分散成單個(gè)細(xì)胞無菌、離體取材動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織植物幼嫩的部位或花藥等培養(yǎng)基性質(zhì)__________培養(yǎng)基成分_________________________________________________________________________________________細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較液體固體糖類、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素和瓊脂等項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)結(jié)果__________________________________________________應(yīng)用人造皮膚的構(gòu)建、動(dòng)物分泌蛋白的規(guī)?;a(chǎn)快速繁殖、作物脫毒、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)和單倍體育種等相同點(diǎn)①都需人工條件下的無菌操作;②都需要適宜的溫度、pH等條件;③都進(jìn)行有絲分裂,都不涉及減數(shù)分裂細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞,不形成新個(gè)體可產(chǎn)生新個(gè)體3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較4.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用4.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用①胚胎干細(xì)胞為什么可以解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題?其應(yīng)用有什么限制因素?答案

通過胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化,可以培育出人造組織器官,從而解決供體器官不足問題,另一方面,由于是自身細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的,所以無免疫排斥反應(yīng)。胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,這涉及倫理問題,因而限制了應(yīng)用。②為什么科學(xué)家認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞?答案

iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎,而且iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。4.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用③科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞,嘗試說出幾種獲取iPS細(xì)胞的方法。答案

借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的,后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞。4.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的4點(diǎn)提醒1.重組新冠病毒疫苗是將新冠病毒S蛋白受體結(jié)合區(qū)(RBD)基因通過基因工程技術(shù),重組到中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞內(nèi),在體外培養(yǎng)并大量表達(dá)出RBD二聚體的方法。下列說法正確的是(

)A.CHO細(xì)胞作為新冠病毒的宿主細(xì)胞,提供病毒所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞,需要用液體培養(yǎng)基C.體外培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時(shí)需添加適量的干擾素防止雜菌污染D.CHO細(xì)胞能夠表達(dá)出RBD二聚體,說明新冠病毒與倉(cāng)鼠的遺傳物質(zhì)相同答案:BP463T2.(不定項(xiàng))(2023·河北衡水金卷)研究人員欲采用“異源囊胚補(bǔ)全法”將人源iPS細(xì)胞培育出的腎元祖細(xì)胞導(dǎo)入囊胚,然后移植到去除生腎區(qū)既存的腎元祖細(xì)胞的母豬體內(nèi),培育出100%人源iPS細(xì)胞來源的腎單位并實(shí)際應(yīng)用于移植醫(yī)療(如圖所示)。下列說法正確的是(

)ABA.培育人源腎元祖細(xì)胞需向iPS細(xì)胞培養(yǎng)液中加入定向誘導(dǎo)分化劑B.過程②需要將熒光蛋白標(biāo)記的人源腎元祖細(xì)胞植入囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)C.過程③操作之前需對(duì)代孕母豬進(jìn)行超數(shù)排卵和同期發(fā)情處理D.該技術(shù)培育的人源腎臟不必考慮腎移植個(gè)體之間的遺傳差異1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等細(xì)胞膜的流動(dòng)性滅活的病毒物理或化學(xué)手段喪失感染性(不感染細(xì)胞)不破壞抗原結(jié)構(gòu)(誘導(dǎo)細(xì)胞融合)考點(diǎn)二.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞融合過程植物體細(xì)胞雜交過程去壁融合植物組織培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)原理融合前的處理誘導(dǎo)融合的方法結(jié)果細(xì)胞膜的流動(dòng)性、

植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性物理:離心,振動(dòng),電激化學(xué):PEG、高Ca2+—高pH融合法物理:電激、離心等化學(xué):PEG生物:滅活的病毒獲得雜種植株獲得雜交細(xì)胞用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,打破了生殖隔離,擴(kuò)展了雜交的親本組合相似點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法相似植物體細(xì)胞雜交、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較A.抗體的概念:抗體是機(jī)體受

刺激后產(chǎn)生的、并能與之發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的

。B.抗體是由

細(xì)胞合成和分泌的,每種這種細(xì)胞能產(chǎn)生

抗體。C.動(dòng)物免疫反應(yīng)中產(chǎn)生的抗體有

(一/多)種D.傳統(tǒng)制備抗體的方法:向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使之產(chǎn)生抗體,然后從動(dòng)物

中分離所需要的抗體;其缺點(diǎn)是:

。E.為獲得單一的抗體,

(能/不能)選用特定的漿細(xì)胞直接去培養(yǎng);理由是

??乖鞍踪|(zhì)漿多血清產(chǎn)量低,純度低,特異性差不能漿細(xì)胞已經(jīng)高度分化,不能再分裂一種2.單克隆抗體的制備(回顧)①制備原理A.B淋巴細(xì)胞特點(diǎn):一種B淋巴細(xì)胞只分泌

種特異性抗體。B.骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn):能在體外

。C.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能

,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的

。一大量增殖大量增殖特定抗體2.單克隆抗體的制備②制備過程B淋巴細(xì)胞選擇雜交瘤細(xì)胞A.圖中給小鼠注射特定的抗原蛋白,其目的是什么?刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答,從而產(chǎn)生特定的B淋巴細(xì)胞。B.若僅考慮細(xì)胞的兩兩融合,在獲取雜交瘤細(xì)胞的過程中,篩選淘汰的細(xì)胞有幾種類型?為什么?有未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(B-B融合細(xì)胞、瘤-瘤融合細(xì)胞)兩種類型。出現(xiàn)不同類型是因?yàn)榧?xì)胞融合不是100%的,且是隨機(jī)的。2.單克隆抗體的制備C.單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導(dǎo)融合后會(huì)得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇培養(yǎng)獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞②制備過程2.單克隆抗體的制備項(xiàng)目第一次篩選第二次篩選篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞(“B—B”細(xì)胞、“瘤—瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B—瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞②制備過程2.單克隆抗體的制備D.第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞的方法:

②制備過程2.單克隆抗體的制備P238T5.請(qǐng)根據(jù)以下信息,設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法),從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞,并寫出其依據(jù)的原理。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管只有D途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合,加入聚乙二醇促融,獲得雜種細(xì)胞。為了篩選出雜交瘤細(xì)胞,除去其他細(xì)胞,可向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤,收集增殖的細(xì)胞,因?yàn)榧尤氚被堰屎?,使D合成途徑阻斷,僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖,但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖。③單克隆抗體的應(yīng)用A.作為

:在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。B.運(yùn)載藥物:抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將

與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的

結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由

三部分組成。?ADC的抗體和藥物各具有什么作用?診斷試劑細(xì)胞毒素單克隆抗體抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)ADC的抗體和藥物具有的作用分別是導(dǎo)向和治療。2.單克隆抗體的制備B.運(yùn)載藥物:?除了細(xì)胞毒素,還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物?放射性同位素和化學(xué)藥物等。?ADC在臨床應(yīng)用上的作用機(jī)理是什么?其作用機(jī)理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面抗原,然后利用細(xì)胞本身具備的內(nèi)吞作用使化學(xué)藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞體內(nèi)發(fā)生藥力,從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。C.治療疾病。2.單克隆抗體的制備(選擇性必修3P50“思考·討論”)抗體—藥物偶聯(lián)物(antibody-drug

conjugate,ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如下圖所示。ADC的作用機(jī)制示意圖

P463T4.(2023·北京延慶區(qū)模擬)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷,過程如圖所示。下列表述正確的是(

)CA.ADC可通過主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入腫瘤細(xì)胞B.抗體進(jìn)入細(xì)胞后激活溶酶體酶,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡C.單克隆抗體攜帶細(xì)胞毒素與腫瘤細(xì)胞特異性結(jié)合D.腫瘤細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動(dòng)死亡的過程,所以不會(huì)產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)2.(2022·山東·)如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體,簡(jiǎn)稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是(

)A.雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D.同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞D3.豬繁殖與呼吸綜合征是一種嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的傳染病,由PRRSV病毒引起。我國(guó)科學(xué)家制備出PRRSV病毒GP3蛋白的單克隆抗體可對(duì)該病進(jìn)行診斷和治療,過程如下圖所示。下列敘述不正確的是(

)A.用純化的GP3蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi),以獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞B.過程①可以用PEG誘導(dǎo)融合,融合原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性C.用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)細(xì)胞乙進(jìn)行篩選,融合細(xì)胞都能正常生長(zhǎng)D.丙和丁只含雜交瘤細(xì)胞,第2次篩選前需對(duì)細(xì)胞丙進(jìn)行克隆培養(yǎng)C4.(2023·遼寧·)大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細(xì)胞,可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是(

)A.懸浮培養(yǎng)單克隆細(xì)胞可有效避免接觸抑制B.用于培養(yǎng)單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)基通常需加血清C.當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的增殖D.培養(yǎng)基pH不會(huì)影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量C、病毒借助于細(xì)胞進(jìn)行繁殖,利用了活細(xì)胞的物質(zhì)、能量、酶等,當(dāng)病毒達(dá)到一定數(shù)量時(shí)細(xì)胞的生命活動(dòng)受到影響,會(huì)影響細(xì)胞的增殖,C正確;D、細(xì)胞的正常生命活動(dòng)需要適宜的pH,培養(yǎng)基pH會(huì)影響細(xì)胞代謝,進(jìn)而影響單克隆細(xì)胞的病毒產(chǎn)量,D錯(cuò)誤。DP331T2.(2021·遼寧卷,13)下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程圖,有關(guān)敘述正確的是(

)BA.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C.過程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理D.過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植考點(diǎn)三.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物①概念分析A.供體:動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的

。B.受體:去掉細(xì)胞核的

。C.結(jié)果:重新組合的細(xì)胞發(fā)育成

,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。D.原理:

。②哺乳動(dòng)物核移植類型:

細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。細(xì)胞核卵母細(xì)胞新胚胎動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性胚胎1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)2.體細(xì)胞核移植的過程MⅡ去核卵母①動(dòng)物核移植技術(shù)的理論基礎(chǔ)(原理)是什么?克隆動(dòng)物屬于有性生殖還是無性繁殖?動(dòng)物細(xì)胞核的全能性??寺?dòng)物屬于無性繁殖。②為什么體細(xì)胞核移植較胚胎細(xì)胞核移植更困難?由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,表現(xiàn)全能性相對(duì)容易;而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,表現(xiàn)全能性十分困難。因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度就明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。④為什么不是取供體細(xì)胞核進(jìn)行核移植操作,而是將供體細(xì)胞整個(gè)注入去核卵母細(xì)胞中?保證供核不被破壞,使克隆動(dòng)物更像供體動(dòng)物,操作也方便。⑤在體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?為使核移植的胚胎或動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的體細(xì)胞,在供體細(xì)胞的細(xì)胞核移至受體細(xì)胞之前,必須將受體細(xì)胞的核遺傳物質(zhì)去掉或?qū)⑵淦茐?。③受體細(xì)胞為什么選用卵母細(xì)胞?體積大,易操作;去核時(shí)易于同時(shí)吸走第一極體;含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)。2.體細(xì)胞核移植的過程⑥從多莉的產(chǎn)生過程可以看出多莉有三個(gè)親本,探究多莉的性狀表現(xiàn)與三個(gè)親本的關(guān)系并分析原因。A.大多數(shù)性狀與母羊A(體細(xì)胞核供體)相同,因基因型與母羊A完全一樣。B.少數(shù)性狀與母羊B(卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)供體)相同,因細(xì)胞質(zhì)中的基因來自母羊B,受質(zhì)基因控制的性狀與母羊B相同。C.性狀與母羊C(代孕母體)無關(guān),因母羊C沒有為新個(gè)體提供遺傳物質(zhì)。2.體細(xì)胞核移植的過程教材隱性知識(shí):源于選擇性必修3P54“相關(guān)信息”:目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是

。也有人采用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的

。顯微操作法DNA變性

通過

去除卵母細(xì)胞的核,再用

可一并吸出細(xì)胞核和第一極體。

可用物理或化學(xué)方法(如

、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)激活受體細(xì)胞,使其

的過程顯微操作微型吸管完成細(xì)胞分裂和發(fā)育電脈沖3.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景和存在的問題前景畜牧業(yè)加速家畜

進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育醫(yī)藥衛(wèi)生①作為

生產(chǎn)醫(yī)用蛋白;②

的細(xì)胞、組織和器官可以用于異種移植;③人核移植

經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織、器官,可用于器官移植保護(hù)瀕危物種增加瀕危物種的存活數(shù)量問題①成功率

;②絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在

問題,表現(xiàn)出________________遺傳改良生物反應(yīng)器轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物胚胎干細(xì)胞非常低健康遺傳和生理缺陷總結(jié):細(xì)胞工程的各種技術(shù)手段及其原理總結(jié)5.在體細(xì)胞克隆猴培育過程中,為調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá),提高胚胎的發(fā)育率和妊娠率,研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構(gòu)胚,同時(shí)用組蛋白脫乙酰酶抑制劑(TSA)處理,具體培育流程如下圖所示。下列說法正確的是(

)A.去核時(shí)使用

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