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./華南師范大學實驗報告學生姓名:譚曉東學號:20102501024專業(yè):生物科學年級、班級:10科四課程名稱:動物生理學實驗實驗項目:家兔尿生成的影響因素實驗類型:驗證實驗時間:20XX5月28日實驗指導老師:黃俊柅實驗評分:實驗目的學習輸尿管、膀胱插管技術(shù)和尿液收集的方法;了解神經(jīng)和體液因素對尿量的調(diào)節(jié)實驗原理尿生成的過程包括腎小球的濾過、腎小管和集合管的重吸收和分泌三個過程。凡能影響上述過程的任何因素,均可影響尿的生成并可引起尿量及尿的性質(zhì)、成分的改變。本實驗以家兔為實驗對象,采用膀胱插管術(shù)收集并記錄尿量,主要觀察不同因素或藥物對尿量的影響。實驗材料動物:家兔試劑:生理鹽水、20%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注射液、腎上腺素、垂體后葉素、20%甘露醇。器材:手術(shù)器械、生理信號采集系統(tǒng),壓力傳感器、注射器實驗步驟家兔麻醉:稱重、麻醉:2%戊巴比妥鈉,2ml/kg,耳緣靜脈注射。固定:仰臥位固定氣管插管術(shù):剪毛、中線剪開頸部皮膚〔6~7cm、鈍性分離頸部肌肉等組織,暴露氣管、氣管穿線、軟骨環(huán)上做T形切口、棉簽去氣管中的血塊、插氣管插管,結(jié)扎。分離右側(cè)迷走神經(jīng),穿線備用泌尿系統(tǒng)插管——全身抗凝:靜脈注射肝素,注射劑量10mg/kg〔1ml/kgA、輸尿管插管:分離兩側(cè)輸尿管,各穿2棉線備用;一側(cè)輸尿管結(jié)扎近膀胱端——結(jié)扎處往上做1/2切口——向上插管——綁線、動脈夾固定。B、膀胱插管:分離兩側(cè)輸尿管;輸尿管下穿線,結(jié)扎與尿道連接的位置;用大注射針頭刺破膀胱壁,從穿孔處將插管插入膀胱內(nèi),結(jié)扎并固定,如膀胱未充盈,可先注射生理鹽水,讓膀胱壁變薄儀器連接,觀察正常尿量5.改變影響因素〔1.快速注射30ml生理鹽水,記錄尿量變化?!?.靜脈注射腎上腺素0.2~0.3ml,記錄尿量變化。〔3.靜脈注射20%葡萄糖15ml,記錄尿量變化?!?靜脈注射垂體后葉素〔2單位,觀察尿量變化〔5靜脈注射10%NaSO4<4ml>,觀察尿量變化〔6刺激右側(cè)迷走神經(jīng)5~10秒,觀察尿量變化〔7靜脈注射20%甘露醇,觀察尿量變化實驗結(jié)果圖1家兔正常情況尿量圖正常情況下,家兔無尿液生成。圖2注射生理鹽水后家兔尿量變化圖注射生理鹽水后家兔尿量稍有增加。圖3注射腎上腺素后家兔尿量變化圖注射腎上腺素后家兔尿量減少。圖4注射葡萄糖后家兔尿量變化圖注射葡萄糖可使家兔尿量顯著增加圖5注射垂體后葉素家兔尿量變化圖 注射垂體后葉素后家兔尿量顯著減少 圖6注射Na2SO4后家兔尿量變化圖注射Na2SO4家兔尿量顯著增加圖7刺激迷走神經(jīng)家兔尿量變化圖刺激家兔迷走神經(jīng)后尿液的生成量減少。圖8注射甘露醇家兔尿量變化圖注射甘露醇使尿液生成量增加。六.討論與分析1.靜脈快速注射生理鹽水使血漿滲透壓降低,血液經(jīng)過腎小球時的濾過率增加,而且腎小球血漿流量也增加,原尿生成增加,同時血容量增加,可刺激容量感受器,血壓升高可刺激壓力感受器,增加抑制抗利尿激素的分泌和釋放,使遠端腎小管和集合管對水的重吸收減少。要排除體內(nèi)過多水分以維持血容量的正常,所以最后尿液生成量增加。2.腎上腺素可興奮血管平滑肌上的α-腎上腺素能受體,引起血管收縮,外周阻力增加,同時對心臟起到正性變時、變力和變傳導作用,從而導致血壓上升,尿量減少。并且去甲腎上腺素可同時興奮腎入球小動脈和出球小動脈,但前者收縮更明顯,腎血流量減少,腎小球毛細血管血壓下降,腎小球的有效濾過壓下降,尿生成減少。3.靜脈注射葡萄糖,由于腎小管對葡萄糖的重吸收具有一定限度〔腎糖閾160~180mg/ml,實驗中葡萄糖的注射量遠遠超過其腎糖閾,經(jīng)腎小球濾出的大量葡萄糖不能被腎小管上皮細胞全部重吸收,小管液中葡萄糖含量增多,滲透壓增高,妨礙了腎小管特別是近球小管對水的重吸收,小管液中的Na+濃度被稀釋而降低,故Na+的重吸收也減少,氯化鈉及水的排出均增加,水隨葡萄糖一起排出,尿量增加,稱為滲透性利尿。4.注射垂體后葉素〔催產(chǎn)素和ADH,ADH與遠曲后段,集合管上皮上的受體結(jié)合后,可增加管腔膜上的水通道,提高腎遠端小管和集合管上皮細胞的對水通透性,從而促進水的吸收,使得重吸收水增多而使尿量減少。5.注射Na2SO4后家兔尿量顯著增加。原因是在腎小管中,SO42-離子僅有少部分被重吸收,而在近端小管前半段,Na+的重吸收量最大,注射過多的硫酸鈉,會導致腎小管內(nèi)的SO42-離子與Na+離子濃度過高,滲透壓高,提高了小管液中溶質(zhì)濃度,阻礙近曲小管對水的吸收,導致尿量增多。6.刺激迷走神經(jīng),尿量大大減少,甚至可出現(xiàn)暫時無尿。刺激迷走神經(jīng)外周端,其末梢釋放乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M受體向結(jié)合,改變離子通道的通透性和心肌動作電位,引起心臟活動抑制,導致心腧出量的減少,血壓下降,腎小球有效濾過壓下降,腎小球濾過率下降,尿液濾過減少,最后引起尿量的減少。血壓下降還可以反射性地引起交感神經(jīng)興奮,導致入
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