第六章 胺類藥物的分析

第六章胺類藥物的分析第一節(jié)芳胺類藥物的分析芳胺類藥物對(duì)氨基苯甲酸酯類芳酰胺類苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因?qū)σ阴０被?、鹽酸利多卡因、鹽酸布比卡因等常見(jiàn)的芳胺類藥物

對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)鹽酸丁卡因有無(wú)芳香第一胺？苯佐卡因有無(wú)芳香第一胺？一性質(zhì)（一）水解后具有芳香第一胺特性，（均具有芳酰胺基），可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別或亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)，易氧化變色，弱堿性。（二）酯鍵或酰胺鍵易水解

尤其是藥物受光、熱或堿性條件的影響，更易促進(jìn)其水解（三）具脂烴胺側(cè)鏈，弱堿性，可與生物堿沉淀試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)進(jìn)行鑒別或非水堿量法測(cè)定含量。

（四）游離堿易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水。

芳酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)非那西?。▽?duì)乙酰氨基苯乙醚）對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）有無(wú)芳香第一胺？水解之后呢？醋氨苯砜鹽酸利多卡因有無(wú)酚羥基?有無(wú)芳香第一胺？鹽酸布比卡因性質(zhì)1.水解后顯芳香第一胺特性：芳酰氨基利多卡因和布比卡因在酰胺基鄰位存在兩個(gè)甲基，受空間位阻的影響，較難水解，因此其水溶液較穩(wěn)定。2.水解產(chǎn)物易酯化：對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯酯，水解后生成醋酸，可在酸性介質(zhì)中與乙醇反應(yīng)，生成醋酸乙酯。

3.酚羥基的特性：對(duì)乙酰氨基酚具有酚羥基4.弱堿性：利多卡因和布比卡因叔胺氮原子

對(duì)乙酰氨基酚和醋酸苯砜不具此側(cè)鏈5.與重金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：

利多卡因和布比卡因二、鑒別試驗(yàn)

（一）重氮化—偶合反應(yīng)

芳香第一胺類鑒別反應(yīng)

直接：鹽酸普魯卡因、對(duì)氨基水楊酸鈉、苯佐卡因鹽酸普魯卡因ChP（2000）[鑒別]（1）本品顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）取供試品約50mg，加稀鹽酸1m1，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成由橙黃到猩紅色沉淀。

間接：對(duì)乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、貝諾酯

對(duì)乙酰氨基酚ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加稀鹽酸5m1，置水浴中加熱40分鐘，放冷；取0.5m1，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3ml稀釋后，加堿性β-萘酚試液2m1，振搖，即顯紅色。

此反應(yīng)是重氮化偶合反應(yīng)嗎？鹽酸丁卡因（N-亞硝基化合物）（二）水解產(chǎn)物的反應(yīng)

1.鹽酸普魯卡因ChP（2000）[鑒別]（2）取本品約0.1g，加水2ml溶解后，加10％氫氧化鈉溶液1ml，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，產(chǎn)生的蒸氣，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。

鹽酸普魯卡因NaOH普魯卡因白色沉淀油狀物（普魯卡因）2-二乙氨基乙醇↑對(duì)氨基苯甲酸鈉使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)+HCl對(duì)氨基苯甲酸↓（白色）（三）三氯化鐵反應(yīng)

對(duì)乙酰氨基酚+FeCl3

藍(lán)紫色（四）與重金屬離子反應(yīng)1.與銅和鈷離子反應(yīng)

2．與汞離子的反應(yīng)

（五）制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)1．三硝基苯酚衍生物

鹽酸利多卡因ChP（2000）[鑒別]取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚試液10ml，即生成沉淀；濾過(guò)，沉淀用水洗滌后，干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)為228～232℃，熔融時(shí)同時(shí)分解。鹽酸布比卡因ChP（2000）2.硫氰酸鹽衍生物

鹽酸丁卡因ChP（2000）[鑒別]（1）取本品約0.1g，加5%醋酸鈉溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸銨溶液1ml，即析出白色結(jié)晶；濾過(guò)，結(jié)晶用水洗滌，在80℃干燥，依法測(cè)定（附錄ⅥC），熔點(diǎn)約為131℃。（六）氯化物的鑒別反應(yīng)鹽酸普魯卡因、鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因的水溶液。供試品+稀硝酸+Ag+

白色凝乳狀+氨試液溶解+稀硝酸沉淀

鹽酸布比卡因ChP（2000）[鑒別]（2）取本品，精密稱定，按干燥品計(jì)算，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測(cè)定，在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48。（七）UV

（八）IR

鹽酸布比卡因ChP（2000）[鑒別]（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜與對(duì)照的圖譜（光譜集324圖）一致。

1.鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查

檢查方法

TLC雜質(zhì)對(duì)照品法雜質(zhì)來(lái)源水解產(chǎn)生三、雜質(zhì)檢查鹽酸普魯卡因?qū)Π被郊姿?2-二乙氨基乙醇水解對(duì)氨基苯甲酸苯胺醌類化合物（黃色）

-CO2[O]

已黃的注射液不僅療效下降，且毒性增加《中國(guó)藥典》2005年版規(guī)定，TLC法檢查對(duì)氨基苯甲酸

精密量取本品，加乙醇稀釋使成為每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液，作為供試品溶液。取對(duì)氨基苯甲酸對(duì)照品，加乙醇制成每1ml中含30

g的溶液，作為對(duì)照品溶液。取上述兩種溶液各10

l，分別點(diǎn)于含有羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠H薄層板上，用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14∶1∶1∶4）為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，取出晾干，用對(duì)二甲氨基苯甲醛溶液（2％對(duì)二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加冰醋酸5ml制成）噴霧顯色。供試品溶液如顯與對(duì)照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液主斑點(diǎn)比較，不得更深。（二）對(duì)乙酰氨基酚

1.有關(guān)物質(zhì)

雜質(zhì)來(lái)源中間體、副產(chǎn)物及分解產(chǎn)物

對(duì)氯乙酰苯胺雜質(zhì)對(duì)照品法

檢查方法

TLC

其他雜質(zhì)參比雜質(zhì)對(duì)照品法

2.對(duì)氨基酚

雜質(zhì)來(lái)源中間體、水解產(chǎn)物反應(yīng)原理

3.乙醇溶液的澄清度與顏色（一）亞硝酸鈉滴定法1.原理具芳伯氨基的藥物四、含量測(cè)定

具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。

水解還原2.主要測(cè)定條件（1）反應(yīng)速度加入適量KBr加速反應(yīng)KBr為催化劑NaNO2+HCl→HNO2+NaClHNO2+HCl→NOCl+H2O在鹽酸存在下，重氮化反應(yīng)的機(jī)理為：（1）K1（2）K2

∵K1≈300K2

加入KBr，可增大被測(cè)溶液中NO+的濃度，所以能加快重氮化反應(yīng)速度（2）酸的種類及其濃度在不同酸中重氮化反應(yīng)的速度為：HBr＞HCl

＞H2SO4＞HNO3價(jià)格高鹽酸1:2.5～6；加入鹽酸：①重氮化反應(yīng)速度加快；②重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定；③防止生成偶氮氨基化合物，而影響測(cè)定結(jié)果（3）室溫條件下滴定

10～30℃（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3處，滴定液一次大部分放下，近終點(diǎn)時(shí)方改為慢速滴定（2）外指示劑法

3.指示終點(diǎn)的方法（1）永停滴定法線路中有電流通過(guò)，電流計(jì)指針突然偏轉(zhuǎn)，并不再回零，即為滴定終點(diǎn)。常用碘化鉀-淀粉指示劑（顯藍(lán)色）4.測(cè)定方法

鹽酸普魯卡因ChP（2000）取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl（三）紫外分光光度法

對(duì)乙酰氨基酚在0.4％氫氧化鈉溶液中，于257nm波長(zhǎng)處有最大吸收，其紫外吸收光譜特征，可用于其原料及其制劑的含量測(cè)定。

（二）非水溶液滴定法

脂肪烴胺側(cè)鏈，具弱堿性

對(duì)乙酰氨基酚ChP（2000）取本品約40mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50ml溶解后，加水至刻度，搖勻，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10m1，加水至刻度，搖勻，在257nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C8H9NO2的吸收系數(shù)為715計(jì)算，即得。原料藥

吸收系數(shù)法

USP（24）對(duì)照法

亞硝酸鈉滴定法中，加KBr的作用是（B）A.添加Br

B.生成NO+·Br

C．生成HBrD.生成Br2E.抑制反應(yīng)進(jìn)行

中國(guó)藥典（1990年版）所收載的亞硝酸鈉滴定法中指示終點(diǎn)的方法為（B）A.電位法B.永停法C.外指示劑法D.內(nèi)指示劑法E.自身指示劑法

亞硝酸鈉滴定法中，可用于指示終點(diǎn)的方法有（BCDE）A.自身指示劑法B.內(nèi)指示劑法C.永停法D.外指示劑法E.電位法

以下那種藥物中應(yīng)檢查對(duì)氨基苯甲酸（E）A.鹽酸普魯卡因B.鹽酸普魯卡因胺C.注射用鹽酸普魯卡因D.鹽酸普魯卡因胺片E.鹽酸普魯卡因注射液

例3.鹽酸普魯卡因采用亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量時(shí)的反應(yīng)條件是（ABCDE）A.強(qiáng)酸B.加入適量溴化鉀C.室溫（10～30℃）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示終點(diǎn)

第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析

苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)*常見(jiàn)的苯乙胺類藥物鹽酸克侖特羅硫酸沙丁胺醇一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

1.脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性

2.酚羥基特性，易氧化變色，可發(fā)生三氯化鐵反應(yīng)

3.具手性碳原子，具旋光性

4.溶解性游離堿難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，其鹽可溶于水

5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的鹽酸克侖特羅可用重氮化—偶合反應(yīng)鑒別、亞硝酸鈉滴定法測(cè)定含量。二、鑒別試驗(yàn)1.三氯化鐵反應(yīng)2.與甲醛—硫酸反應(yīng)3.氧化反應(yīng)4.UV與IR5.與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)（Rimini反應(yīng)）

脂肪族伯胺的專屬反應(yīng)三、雜質(zhì)檢查

雜質(zhì)來(lái)源原料殘存檢查方法紫外-可見(jiàn)分光光度法（一）酮體

檢查原理利用酮體在310nm波長(zhǎng)處有最大吸收，而藥物本身在此波長(zhǎng)處幾乎沒(méi)有吸收，規(guī)定一定濃度溶液在310nm波長(zhǎng)處的吸收度限制酮體的量。（二）有關(guān)物質(zhì)檢查鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺醇等藥物

檢查方法：TLC中高低濃度對(duì)比法配制兩種濃度對(duì)照溶液四、含量測(cè)定

（一）非水溶液滴定法原料藥

脂烴胺基側(cè)鏈，顯弱堿性

利用本類藥物分子結(jié)構(gòu)中的芳香第一胺或側(cè)鏈烴胺基的弱堿性，以冰醋酸位溶劑，加醋酸汞試液以消除氫鹵酸的干擾，并用結(jié)晶紫指示液指示終點(diǎn)。（二）溴量法鹽酸去氧腎上腺素及其注射液、重酒石酸間羥胺反應(yīng)摩爾比為1∶6

分子結(jié)構(gòu)中均有苯酚結(jié)構(gòu)，在酸性溶液中酚羥基的鄰、對(duì)位活潑氫能與過(guò)量的溴定量地發(fā)生溴代反應(yīng)，再以碘量法測(cè)定剩余的溴，根據(jù)消耗的硫代硫酸鈉滴定液的量，即可計(jì)算出供試品的含量。Br2+2KI

KBr+I2I2+Na2S2O3NaI+Na2S4O6(剩余）（三）HPLC法重酒石酸去甲腎上腺素注射液

例1.能和重酒石酸去甲腎上腺素發(fā)生顏色反應(yīng)的試液為（D）A.濃硫酸B.甲醛試液C.氨試液D.甲醛—硫酸試液E.茚三酮試液

例